microbeПроблемы особо опасных инфекцийProblems of Particularly Dangerous Infections0370-10692658-719XRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”10.21055/0370-1069-2021-1-152-155microbe-1452Research ArticleКРАТКИЕ СООБЩЕНИЯBRIEF COMMUNICATIONSПути снижения контаминации на этапах производства холерной химической таблетированной вакциныWays to Reduce the Level of Contamination at the Stages of Tableted Chemical Cholera Vaccine Productionhttps://orcid.org/0000-0001-6933-8278УльяновА. Ю.Ul’yanovA. Yu.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

rusrapi@microbe.ruhttps://orcid.org/0000-0001-7119-0516КлоковаО. Д.KlokovaO. D.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

https://orcid.org/0000-0003-0172-2964ГромоваО. В.GromovaO. V.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

https://orcid.org/0000-0003-0791-895XВольниковВ. Р.Vol’nikovV. R.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

https://orcid.org/0000-0002-3044-971XВолохО. А.VolokhO. A.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

https://orcid.org/0000-0002-1130-3504НикифоровА. К.NikiforovA. K.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»РоссияRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”Russian Federation20211604202101152155Copyright © Ульянов А.Ю., Клокова О.Д., Громова О.В., Вольников В.Р., Волох О.А., Никифоров А.К., 20212021Ульянов А.Ю., Клокова О.Д., Громова О.В., Вольников В.Р., Волох О.А., Никифоров А.К.Ul’yanov A.Y., Klokova O.D., Gromova O.V., Vol’nikov V.R., Volokh O.A., Nikiforov A.K.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.microbe.ru/jour/article/view/1452

Цель работы – оценка степени контаминации холерной химической вакцины на этапах приготовления и определение путей ее снижения.

Материалы и методы

Материалы и методы. В работе использовали жидкие и лиофилизированные компоненты холерной химической вакцины: холероген-анатоксин и О-антигены штаммов Vibrio cholerae 569В и Vibrio cholerae М-41, а также вспомогательные вещества (сахароза, тальк, кальция стеарат, крахмал). Гранулирование осуществляли на аппарате, работающем по принципу псевдоожиженного слоя, GPCG 2 фирмы GLATT (Германия). Последующее таблетирование смеси проводили с помощью пресса MiniTabT фирмы LUXNER (Германия). Проведены исследования по оценке показателя «микробиологическая чистота» на стадиях изготовления холерной химической вакцины, таблеток, покрытых кишечнорастворимой оболочкой. Наличие или отсутствие роста микроорганизмов на чашках Петри с питательными средами оценивали визуально.

Результаты и обсуждение

Результаты и обсуждение. Выявлена динамика изменения микробной загрязненности на отдельных технологических стадиях производства вакцины. Показано, что растворы антигенов в процессе выделения подвержены микробной контаминации, что связано с использованием при осаждении антигенов сульфата аммония и нестерильной воды на стадии диализа. Стерильность полуфабрикатов достигалась двухэтапной фильтрацией холерогена-анатоксина и стерилизацией О-антигенов V. cholerae 569В и V. cholerae М-41 текучим паром при (100±1) °С в течение 30 мин. Для снижения микробной контаминации на технологической стадии гранулирования установлены дополнительные фильтры тонкой очистки в системе подачи воздуха. Далее провели сравнительное определение микробиологической чистоты серий вакцины, полученных методами прямого прессования и с предварительным гранулированием. Экспериментально показано, что применение гранулирования компонентов таблеточной смеси холерной вакцины приводит к снижению уровня бактериальной контаминации и улучшает показатели микробиологической чистоты в готовой лекарственной форме.

Objective of the study was an assessment of the degree of contamination of cholera chemical vaccine at the stages of preparation and determination of the ways to reduce it.

Materials and methods

Materials and methods. Liquid and lyophilized components of the cholera chemical vaccine used in the study: cholerogen-anatoxin and O-antigens of Vibrio cholerae 569B and V. cholerae M-41 strains, as well as auxiliary substances (sucrose, talc, calcium stearate, starch). Granulation was carried out in a device that works on a fluidized bed principle, GPCG 2 (GLATT, Germany). Subsequent tabletizing of the mixture was performed using MiniTabT compression machine (LUXNER, Germany). Studies were conducted on the evaluation of “microbiological purity” at the stages of manufacturing of the cholera chemical vaccine, tablets coated with an enteric coating. Positive or negative growth of microorganisms on Petri dishes with nutrient media was determined on visual inspection.

Results and conclusions

Results and conclusions. The dynamics of changes in microbial contamination at certain technological stages of vaccine production has been revealed. It is shown that the solutions of antigens in the process of separation are subject to microbial contamination which is associated with the use of ammonium sulfate during precipitation and non-sterile water at the stage of dialysis. Sterility of semi-finished products has been achieved through twophase filtration of choleragen-anatoxin and sterilization of O-antigens of V. cholerae 569B and V. cholerae M-41 strains with flowing steam at (100±1) °C for 30 minutes. In order to decrease microbial contamination at the stage of granulation additional fine filters were installed in the air-supply system. Further on comparative assessment of microbial purity of vaccine batches obtained using both, direct compression and preliminary granulation, was carried out. It has been experimentally demonstrated that granulation of the components of a tablet mixture of cholera vaccine leads to a decrease in the level of bacterial contamination and improves the microbiological purity of the finished dosage form.

холерная химическая вакцинатехнологиятаблеткаконтаминациямикробиологическая чистотаchemical cholera vaccinetechnologytabletcontaminationmicrobiological purityReferencesОнищенко Г.Г., Дроздов И.Г. Актуальные аспекты проблемы противодействия биологической опасности. Вестник Российской академии медицинских наук. 2004; 5:14–20.Onishchenko G.G., Drozdov I.G. [Relevant aspects of the ssue of countering biological hazards]. Vestnik Rossiyskoy Akademii Meditsinskikh Nauk [Bulletin of the Russian Academy of Medical Sciences]. 2004; 5:14–20.Longini I.M. Jr., Nizam A., Ali M., Yunus M., Shenvi N., Clemens J.D. Controlling endemic cholera with oral vaccines. PLOS Med. 2007; 4(11):e336. DOI: 10.1371/journal.pmed.0040336.Longini I.M. Jr., Nizam A., Ali M., Yunus M., Shenvi N., Clemens J.D. Controlling endemic cholera with oral vaccines. PLOS Med. 2007; 4(11):e336. DOI: 10.1371/journal.pmed.0040336.Cholera vaccines: WHO position paper. Wkly Epidemiol. Rec. 2010; 85(13):117–28.Cholera vaccines: WHO position paper. Wkly Epidemiol. Rec. 2010; 85(13):117–28.Горяев А.А., Саяпина Л.В., Обухов Ю.И., Бондарев В.П. Эффективность и безопасность вакцин для профилактики холеры. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2018; 18(1):42–9. DOI: 10.30895/2221-996Х-2018-18-1-42-49.Goryaev A.A., Sayapina L.V., Obukhov Yu.I., Bondarev V.P. [Efficacy and safety of vaccines for cholera prevention]. BIOpreparaty. Profilaktika, Diagnostika, Lechenie [BIOPreparations. Prevention, Diagnosis, Treatment]. 2018; 18(1):42–9. DOI: 10.30895/2221-996-X-2018-18-1-42-49.Кутырев В.В., Щуковская Т.Н. Холерные вакцины. В кн.: Вакцины и вакцинация: национальное руководство. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2011. С. 431–45.Kutyrev V.V., Shchukovskaya T.N. [Cholera vaccines]. In: [Vaccines and Vaccination: National Guidelines]. Moscow: “GEOTAR-Media”; 2011. P. 431–45.Туманов А.С., Тетерин В.В., Лещенко А.А., Ежов А.В., Бирюков В.В., Багин С.В., Мохов Д.А., Логвинов С.В., Лазыкин А.Г., Белобородов Д.С., Бредихин В.Н., Поздняков И.В. Пути снижения контаминации таблетированной чумной живой вакцины на этапах ее производства. Проблемы особо опасных инфекций. 2016; 1:102–5. DOI: 10.21055/0370-1069-2016-1-102-105.Tumanov A.S., Teterin V.V., Leshchenko A.A., Yezhov A.V., Biryukov V.V., Bagin S.V., Mokhov D.A., Logvinov S.V., Lazykin A.G., Beloborodov D.S., Bredikhin V.N., Pozdnyakov I.V. [Ways to reduce contamination of tableted live plague vaccine at the stages of its production]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2016; 1:102–5. DOI: 10.21055/0370-1069-2016-1-102-105.Шуб Т.А., Каграманова К.А., Кивман Г.Я., Бухарцева Е.В., Гунар О.В., Николаенко Н.С. Пути контаминации нестерильных лекарственных средств. Химико-фармацевтический журнал. 1991; 25(12):45–7.Shub T.A., Kagramanova K.A., Kivman G.Ya., Bukhartseva E.V., Gunar O.V., Nikolaenko N.S. [Ways of contamination of nonsterile drugs]. Khimiko-Farmatsevtichesky Zhurnal [Pharmaceutical Chemistry Journal]. 1991; 25 (12):45–7.Суханова С.М., Бердникова З.Е., Захарова Н.Е., Мерку­ лов В.А. Испытание на стерильность иммунобиологических лекарственных препаратов в России. История вопроса и современные требования. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2018; 18(1):5–15. DOI: 10.30895/2221-996X2018-18-1-5-15.Sukhanova S.M., Berdnikova Z.E., Zakharova N.E., Merkulov V.A. [Sterility testing of immunobiological drugs in Russia. History of the issue and modern requirements]. BIOpreparaty. Profilaktika, Diagnostika, Lechenie [BIOPreparations. Prevention, diagnosis, treatment]. 2018; 18(1):5–15. DOI: 10.30895/2221-996-X-2018-18-1-5-15.Государственная фармакопея Российской Федерации. МЗ РФ. XIV изд. Т. 4. [Электронный ресурс]. URL: http://resource.rucml.ru/feml/pharmacopia/14_4/HTML/index.html (дата обращения 18.12.2018).[State Pharmacopoeia of the Russian Federation. Ministry of Health of the Russian Federation]. XIV ed. Vol. 4. (Cited: December 18, 2018). [Internet]. Available from: http://resource.rucml.ru/feml/pharmacopia/14_4/HTML/index.html.Белявская В.А., Ромашева Н.Г., Сорокулова И.Б., Ильичев А.А., Нестеров А.Н., Колосов А.В., Подкуйко В.В., Михайлов В.В. Разработка технологии получения таблеточной формы препарата субалин. Биотехнология. 2001; 2:64–9.Belyavskaya V.A., Romasheva N.G., Sorokulova I.B., Il’ichev A.A., Nesterov A.N., Kolosov A.V., Podkuiko V.V., Mikhailov V.V. [Development of a technology for obtaining a tableted form of the drug Subalin]. Biotekhnologiya [Biotechnology]. 2001; 2:64–9.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.