microbeПроблемы особо опасных инфекцийProblems of Particularly Dangerous Infections0370-10692658-719XRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”10.21055/0370-1069-2014-2-94-96microbe-147Research ArticleДИАГНОСТИКАDIAGNOSTICSИспользование ускоренного линейного иммуноэлектрофореза для дифференцирования буркхольдерийApplication of the Rapid Linear Immune-Electrophoresis for Differentiation between BurkholderiaКорсаковаИ. И.KorsakovaI. I.vari2@sprint-v.com.ruХраповаН. П.KhrapovaN. P.vari2@sprint-v.com.ruНапалковаГ. М.NapalkovaG. M.vari2@sprint-v.com.ruЛомоваЛ. В.LomovaL. V.vari2@sprint-v.com.ruБулатоваТ. В.BulatovaT. V.vari2@sprint-v.com.ruВолгоградский научно-исследовательский противочумный институтРоссияVolgograd Research Anti-Plague InstituteRussian Federation201420062014029496Copyright © Корсакова И.И., Храпова Н.П., Напалкова Г.М., Ломова Л.В., Булатова Т.В., 20142014Корсакова И.И., Храпова Н.П., Напалкова Г.М., Ломова Л.В., Булатова Т.В.Korsakova I.I., Khrapova N.P., Napalkova G.M., Lomova L.V., Bulatova T.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.microbe.ru/jour/article/view/147

Целью работы являлась разработка способа ускоренного линейного иммуноэлектрофореза для дифференцирования патогенных возбудителей сапа и мелиоидоза от непатогенных близкородственных буркхольдерий. Предлагаемая модификация метода позволила обнаружить антигены патогенных B. pseudomallei и B. mallei по наличию линий преципитата на границе гель-образца и геля с иммунными сыворотками. B. thailandensis , B. cepacia и B. gladioli таких линий преципитата не образовали, что дало возможность дифференцировать их от патогенных буркхольдерий. Способ ускоренного ЛИЭФ отличается простотой, быстротой исполнения, наглядностью. Метод пригоден для определения общих и специфических антигенов буркхольдерий, отбора иммунных сывороток, содержащих антитела к соответствующим антигенам, и может применяться как дополнительный аналитический метод выявления антигенов патогенных буркхольдерий.

Objective of the study was to develop a method that would allow for rapid linear immune-electrophoresis to differentiate between pathogenic agents of glanders and melioidosis and non-pathogenic closely-related Burkholderia . The put-forward modification of the technique made it possible to detect the antigens of pathogenic B. pseudomallei and B. mallei due to the presence of precipitation lines in between the sample gel and the one with immune sera. B. thailandensis, B. cepacia, and B. gladioli did not form such precipitation lines, which in its turn provided for the possibility to differentiate between the mentioned ones and pathogenic Burkholderia. The rapid enhanced linear immune-electrophoresis is easy to perform and compelling, and takes little time. It is qualified for identification of heterogenic and specific antigens in Burkholderia , selection of immune sera containing antibodies to the existing antigens, and can be used as a supportive alternative analytical means for the detection of antigens of pathogenic Burkholderia .

сапмелиоидозпатогенные и непатогенные буркхольдериидифференциацияускоренный линейный иммуноэлектрофорезglandersmelioidosispathogenic and non-pathogenic Burkholderiadifferentiationrapid linear immune-electrophoresisReferencesАксельсен Н., Крелль Й., Вееке Б. Руководство по количественному иммуноэлектрофорезу. Методы и применение. М.: Мир; 1977. 216 с.Aksel’sen N., Krell I., Veeke B. [Guidelines on Quantitative Immune-Electrophoresis. Techniques and Applications]. M.: Mir; 1977. 216 p.Антонов В.А., Илюхин В.И., Храпова Н.П., Прохватилова Е.В., Викторов Д.В., Сенина Т.В., Будченко А.А., Ткаченко Г.А., Алексеева В.В., Захарова И.Б., Савченко С.С., Зинченко О.В., Сорокина Ю.И., Алексеев В.В. Современные подходы к диагностике сапа и мелиоидоза. Идентификация и типирование Burkholderia mallei и Burkholderia pseudomallei. Пробл. особо опасных инф. 2012; 2(112):46-50.Antonov V.A., Ilyukhin V.I., Khrapova N.P., Prokhvatilova E.V., Viktorov D.V., Senina T.V., Budchenko A.A., Tkachenko G.A., Alekseeva V.V., Zakharova I.B., Savchenko S.S., Zinchenko O.V., Sorokina Yu.I., Alekseev V.V. [Modern approaches to the detection of glanders and melioidosis. Identification and typing of Burkholderia mallei and Burkholderia pseudomallei]. Probl. Osobo Opasn. Infek. 2012; 2(112):46–50.Корсакова И.И., Храпова Н.П., Напалкова Г.М., Ломова Л.В., Дрефс Н.М., Голосеев Ю.А., Булатова Т.В. Сравнительный анализ иммунохимических методов исследования антигенов патогенных буркхольдерий. Пробл. особо опасных инф. 2012; 3(113):82-5.Korsakova I.I., Khrapova N.P., Napalkova G.M., Lomova L.V., Drefs N.M., Goloseev Yu.A., Bulatova T.V. [Comparative analysis of immunochemical methods applied for studies of pathogenic Burkholderia antigens]. Probl. Osobo Opasn. Infek. 2012; 3(113):82–5.Храпова Н.П., Алексеев В.В., Корсакова И.И., Дрефс Н.М., Ломова Л.В., Булатова Т.В., Напалкова Г.М. Применение сапных и мелиоидозных моноклональных антител различной эпитопной направленности для обнаружения и идентификации патогенных буркхольдерий. Пробл. особо опасных инф. 2011; 1(107):66-9.Khrapova N.P., Alekseev V.V., Korsakova I.I., Drefs N.M., Lomova L.V., Bulatova T.V., Napalkova G.M. [Application of glanders and melioidosis monoclonal antibodies of different epitope specificity for pathogenic Burkholderia detection and identification]. Probl. Osobo Opasn. Infek. 2011; 1(107):66–9.Glass M.B., Popovic T. Preliminary evaluation of the API 20NE and RapIDNF plus systems for rapid identification of Burkholderia pseudomallei and B. mallei. J. Clin. Microbiol. 2005; 43(1):479-83.Glass M.B., Popovic T. Preliminary evaluation of the API 20NE and RapIDNF plus systems for rapid identification of Burkholderia pseudomallei and B. mallei. J. Clin. Microbiol. 2005; 43(1):479–83.Harding S.V., Sarkar-Tyson M., Oyston P.C.F., Titball R.W. Immunogenic proteins of Burkholderia pseudomallei and uses thereof. Patent WO/2008/017826. PCTT/GB2007/002989, 14.02.2008.Harding S.V., Sarkar-Tyson M., Oyston P.C.F., Titball R.W. Immunogenic proteins of Burkholderia pseudomallei and uses thereof. Patent WO/2008/017826. PCTT/GB2007/002989, 14.02.2008.Nieves W., Heang J., Asakrah S., Bentrup K.H., Roy C.J., Morici L.A. Immunospecific responses to bacterial elongation factor Tu during Burkholderia infection and immunization. PLoS ONE. 2010; 5(12):e14361.Nieves W., Heang J., Asakrah S., Bentrup K.H., Roy C.J., Morici L.A. Immunospecific responses to bacterial elongation factor Tu during Burkholderia infection and immunization. PLoS ONE. 2010; 5(12):e14361.Sarkar-Tyson M., Titball R.W. Progress toward development of vaccines against melioidosis: A review. Clin. Ther. 2010; 32(8):1437-45.Sarkar-Tyson M., Titball R.W. Progress toward development of vaccines against melioidosis: A review. Clin. Ther. 2010; 32(8):1437–45.Sim B.M.Q., Chantratita N., Ooi W.F., Nandi T., Tewhey R., Wuthiekanun V., Thaipadungpanit J., Tumapa S., Ariyaratne P., Sung W.-K., Sem X.H., Chua H.H., Ramnarayanan K., Lin C.H., Liu Y., Feil E.J., Glass M.B., Tan G., Peacock S.J., Tan P. Genomic acquisition of a capsular polysaccharide virulence cluster by non-pathogenic Burkholderia isolates. Genome Biol. 2010; 11:R89.Sim B.M.Q., Chantratita N., Ooi W.F., Nandi T., Tewhey R., Wuthiekanun V., Thaipadungpanit J., Tumapa S., Ariyaratne P., Sung W.-K., Sem X.H., Chua H.H., Ramnarayanan K., Lin C.H., Liu Y., Feil E.J., Glass M.B., Tan G., Peacock S.J., Tan P. Genomic acquisition of a capsular polysaccharide virulence cluster by non-pathogenic Burkholderia isolates. Genome Biol. 2010; 11:R89.Whitlock G.C., Robida M.D., Judy B.M., Qazi O., Brown K.A., Deeraksa A., Taylor K., Massey S., Loskutov A., Borovkov A.Y., Brown K., Cano J.A., Magee D.M., Torres A.G., Estes D.M., Sykes K.F. Protective antigens against glanders identified by expression library immunization. Front Microbiol. 2011; 2:227.Whitlock G.C., Robida M.D., Judy B.M., Qazi O., Brown K.A., Deeraksa A., Taylor K., Massey S., Loskutov A., Borovkov A.Y., Brown K., Cano J.A., Magee D.M., Torres A.G., Estes D.M., Sykes K.F. Protective antigens against glanders identified by expression library immunization. Front Microbiol. 2011; 2:227.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.