<?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?>
<!DOCTYPE article PUBLIC "-//NLM//DTD JATS (Z39.96) Journal Publishing DTD v1.3 20210610//EN" "JATS-journalpublishing1-3.dtd">
<article article-type="research-article" dtd-version="1.3" xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" xmlns:xlink="http://www.w3.org/1999/xlink" xmlns:xsi="http://www.w3.org/2001/XMLSchema-instance" xml:lang="ru"><front><journal-meta><journal-id journal-id-type="publisher-id">microbe</journal-id><journal-title-group><journal-title xml:lang="ru">Проблемы особо опасных инфекций</journal-title><trans-title-group xml:lang="en"><trans-title>Problems of Particularly Dangerous Infections</trans-title></trans-title-group></journal-title-group><issn pub-type="ppub">0370-1069</issn><issn pub-type="epub">2658-719X</issn><publisher><publisher-name>Russian Research Anti-Plague Institute “Microbe”</publisher-name></publisher></journal-meta><article-meta><article-id pub-id-type="doi">10.21055/0370-1069-2021-3-60-65</article-id><article-id custom-type="elpub" pub-id-type="custom">microbe-1548</article-id><article-categories><subj-group subj-group-type="heading"><subject>Research Article</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="section-heading" xml:lang="ru"><subject>ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="section-heading" xml:lang="en"><subject>ORIGINAL ARTICLES</subject></subj-group></article-categories><title-group><article-title>Оценка использования генцианвиолета и малахитового зеленого в качестве селективных агентов при выделении бруцелл</article-title><trans-title-group xml:lang="en"><trans-title>Assessment of the Use of Gentian Violet and Malachite Green as Selective Agents in the Isolation of Brucella</trans-title></trans-title-group></title-group><contrib-group><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0003-4320-5877</contrib-id><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Ковтун</surname><given-names>Ю. С.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Kovtun</surname><given-names>Yu. S.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Российская Федерация, 355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15</p></bio><bio xml:lang="en"><p>13–15, Sovetskaya St., Stavropol, 355035, Russian Federation</p></bio><email xlink:type="simple">stavnipchi@mail.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Курилова</surname><given-names>А. А.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Kurilova</surname><given-names>A. A.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Российская Федерация, 355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15</p></bio><bio xml:lang="en"><p>13–15, Sovetskaya St., Stavropol, 355035, Russian Federation</p></bio><xref ref-type="aff" rid="aff-2"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0001-8774-101X</contrib-id><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Катунина</surname><given-names>Л. С.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Katunina</surname><given-names>L. S.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Российская Федерация, 355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15</p></bio><bio xml:lang="en"><p>13–15, Sovetskaya St., Stavropol, 355035, Russian Federation</p></bio><xref ref-type="aff" rid="aff-2"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><contrib-id contrib-id-type="orcid">https://orcid.org/0000-0001-7580-0991</contrib-id><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Василенко</surname><given-names>Е. И.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Vasilenko</surname><given-names>E. I.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Российская Федерация, 355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15</p></bio><bio xml:lang="en"><p>13–15, Sovetskaya St., Stavropol, 355035, Russian Federation</p></bio><xref ref-type="aff" rid="aff-2"/></contrib></contrib-group><aff-alternatives id="aff-1"><aff xml:lang="ru">ФКУЗ «Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт»<country>Россия</country></aff><aff xml:lang="en">Stavropol Research Anti-Plague Institute<country>Russian Federation</country></aff></aff-alternatives><aff-alternatives id="aff-2"><aff xml:lang="ru">Российская Федерация, 355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15<country>Россия</country></aff><aff xml:lang="en">Stavropol Research Anti-Plague Institute<country>Russian Federation</country></aff></aff-alternatives><pub-date pub-type="collection"><year>2021</year></pub-date><pub-date pub-type="epub"><day>22</day><month>10</month><year>2021</year></pub-date><volume>0</volume><issue>3</issue><fpage>60</fpage><lpage>65</lpage><permissions><copyright-statement>Copyright &amp;#x00A9; Ковтун Ю.С., Курилова А.А., Катунина Л.С., Василенко Е.И., 2021</copyright-statement><copyright-year>2021</copyright-year><copyright-holder xml:lang="ru">Ковтун Ю.С., Курилова А.А., Катунина Л.С., Василенко Е.И.</copyright-holder><copyright-holder xml:lang="en">Kovtun Y.S., Kurilova A.A., Katunina L.S., Vasilenko E.I.</copyright-holder><license license-type="creative-commons-attribution" xlink:href="https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/" xlink:type="simple"><license-p>This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.</license-p></license></permissions><self-uri xlink:href="https://journal.microbe.ru/jour/article/view/1548">https://journal.microbe.ru/jour/article/view/1548</self-uri><abstract><p>Цель работы – изучение ингибирующего действия генцианвиолета и малахитового зеленого в отношении двух тест-штаммов бруцелл и восьми штаммов микробов-ассоциантов, влияния автоклавирования на их активность; оценка вариабельности селективного действия разных партий красителей, необходимости корректировки концентрации красителей при изготовлении среды для выделения бруцелл.</p><sec><title>Материалы и методы</title><p>Материалы и методы. Использованы по три партии генцианвиолета и малахитового зеленого импортного производства. Ингибиторы вносили в среду культивирования, включающую панкреатические гидролизаты желатина и рыбной муки, дрожжевой экстракт, натрий хлористый, глюкозу, натрий сернистокислый пиро, агар микробиологический. Эту же среду без добавления красителей использовали в качестве контрольной. Действие красителей изучали с помощью тест-штаммов Brucella abortus 19 ВА, B. melitensis Rev I, Enterococcus faecium VKM B-602, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus vulgaris HX 19 222, Pseudomonas aeruginosa 22/99, Serracia plymuthica 1, Shigella ﬂexneri 1a 8516, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Yersinia enterocolitica C-187.</p></sec><sec><title>Результаты и обсуждение</title><p>Результаты и обсуждение. Определены показатели прорастания питательных сред, содержащих генцианвиолет в концентрации 5,0; 2,5; 1,25 мг/л, малахитовый зеленый в концентрации 2,0; 1,0; 0,5 мг/л при выращивании бруцелл. Установлено, что генцианвиолет в концентрации 5 мг/л может значительно ингибировать рост бруцелл. Рост S. aureus ATCC 25923 отсутствовал на всех средах, содержащих малахитовый зеленый, и средах с генцианвиолетом в концентрациях 5,0 и 2,5 мг/л. Малахитовый зеленый интенсивнее, чем генцианвиолет, ингибировал рост энтерококка, но слабее подавлял «роение» протея. Другие микробы-ассоцианты к действию использованных концентраций красителей были резистентны. Показана необходимость применения красителей в сочетании с другими селективными агентами, а также целесообразность введения генцианвиолета в стерильную среду, а малахитового зеленого – до ее автоклавирования. Концентрацию генцианвиолета при изготовлении питательной среды следует корректировать в связи с выявленными расхождениями ингибирующей активности в разных партиях данного красителя.</p></sec></abstract><trans-abstract xml:lang="en"><p>The aim of the work is to evaluate ability of gentian violet and malachite green to inhibit 2 Brucella test strains and 8 strains of unwanted organisms and the inﬂuence of autoclaving on their activity. The study also aims to evaluate variability of inhibition in diﬀerent batches of colorants and necessity in adjustment of their concentration.</p><sec><title>Materials and methods</title><p>Materials and methods. The study included 3 imported lots of gentian violet and malachite green. Inhibitors were put into nutrient medium containing pancreatic hydrolysates of gelatin and fsh meal, yeast extract, sodium chloride, glucose, sodium pyrosulfate, and agar. The same medium without colorants was used as a control medium. Eﬀect of the colorants was studied with the help of test strains of Brucella abortus 19 ВА, B. melitensis Rev I, Enterococcus faecium VKM B-602, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus vulgaris HX 19 222, Pseudomonas aeruginosa 22/99, Serracia plymuthica 1, Shigella ﬂexneri 1a 8516, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Yersinia enterocolitica C-187.</p></sec><sec><title>Results and discussion</title><p>Results and discussion. We have determined biological parameters of nutrient media containing gentian violet (5,0; 2,5 1,25 mg/L) and malachite green (2.0; 1.0; 0.5 mg/L) when cultivating brucella. Gentian violet is able to inhibit Brucella greatly at concentration of 5 mg/L. S. aureus ATCC 25923 did not show any growth on the media containing malachite green or gential violet (5.0 and 2.5 mg/L). Malachite green inhibited the growth of enterococcus more actively than gentian violet. However, it inhibited swarming growth of Proteus less successfully than gentian violet. Other unwanted organisms were not sensitive to such concentrations of colorants at all. We have demonstrated the necessity to combine colorants with other selective agents, as well as advisability to put gentian violet into sterile media, while malachite green – into the media before its autoclaving. Adjustments to the concentration of gentian violet should be made when producing nutrient medium, as variations in inhibiting activity in diﬀerent batches of this colorant were revealed.</p></sec></trans-abstract><kwd-group xml:lang="ru"><kwd>генцианвиолет</kwd><kwd>малахитовый зеленый</kwd><kwd>ингибиция</kwd><kwd>селективные агенты</kwd><kwd>питательная среда</kwd><kwd>бруцеллы</kwd><kwd>микробы-ассоцианты</kwd></kwd-group><kwd-group xml:lang="en"><kwd>gentian violet</kwd><kwd>malachite green</kwd><kwd>inhibition</kwd><kwd>selective agents</kwd><kwd>nutrient medium</kwd><kwd>Brucella</kwd><kwd>unwanted organisms</kwd></kwd-group></article-meta></front><back><ref-list><title>References</title><ref id="cit1"><label>1</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Шепелин А.П., Дятлов И.А. Питательные среды для энтеробактерий. М.: Династия; 2017. С. 76.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Shepelin A.P., Dyatlov I.A. [Nutrient Media for Enterobacteria]. Moscow: Publishing house “Dynasty”; 2017. 76 p.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit2"><label>2</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Подплетенная И.М., Мищенко Д.Н. Модифицированная среда Кесслер для обнаружения бактерий группы кишечной палочки. Патент РФ № 2202618, опубл. 20.04.2003. Бюл. № 11.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Podpletennya I.M., Mishchenko D.N. [Modifed Kessler medium for the detection of E. coli bacteria]. RF patent No. 2202618, publ. 20.04.2003. Bul. No. 11.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit3"><label>3</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Васильев Д.А., Щербаков А.А., Карпунина Л.В., Золотухин С.Н. Методы частной бактериологии. Учебнометодическое пособие. Ульяновск: Ульяновская государственная сельскохозяйственная академия; 2004. 222 с.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Vasil’ev D.A., Shcherbakov A.A., Karpunina L.V., Zolotukhin S.N. [Special Bacteriology Methods. Study Guide]. Ulyanovsk: Ulyanovsk State Agricultural Academy; 2004. 222 p.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit4"><label>4</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Питательные среды для культивирования бруцеллеза. [Электронный ресурс]. URL: https://virus-infekciya.ru/bakterialnye/pitatelnye-sredy-dlya-kultivirovaniya-brucelleza.html (дата обращения 17.11.2020).</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">[Nutrient media for the cultivation of brucellosis]. (Cited 17 Nov 2020). [Internet]. Available from: https://virus-infekciya.ru/bakterialnye/pitatelnye-sredy-dlya-kultivirovaniya-brucelleza.html.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit5"><label>5</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Jones L.M., Morgan W.J.B. A preliminary report on a selective medium for the culture of Brucella, including fastidious types. Bull. World Health Organ. 1958; 19(1):200–3.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Jones L.M., Morgan W.J.B. A preliminary report on a selective medium for the culture of Brucella, including fastidious types. Bull. World Health Organ. 1958; 19(1):200–3.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit6"><label>6</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Keness J., Friedrich I., Banai M., Schonfeld S. Brucella melitensis growth on Loewen-stein-Jensen egg medium from a case of Brucella meningitis. Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 1993; 17(4):271–3. DOI: 10.1016/0732-8893(93)90035-6.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Keness J., Friedrich I., Banai M., Schonfeld S. Brucella melitensis growth on Loewenstein-Jensen egg medium from a case of Brucella meningitis. Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 1993; 17(4):271–3. DOI: 10.1016/0732-8893(93)90035-6.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit7"><label>7</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Friedrich I., Schonfeld S., Keness Y. The ability of Brucella melitensis to grow on Loewenstein-Jensen egg medium: presentation of a case with Brucella meningitis. Isr. J. Med. Sci. 1992; 28(11):806–7.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Friedrich I., Schonfeld S., Keness Y. The ability of Brucella melitensis to grow on Loewenstein-Jensen egg medium: presentation of a case with Brucella meningitis. Isr. J. Med. Sci. 1992; 28(11):806–7.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit8"><label>8</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Hornsby R.L. Selective media for isolation of Brucella abortus strain RB51. Iowa, Ames: Iowa State University; 1998. [Электронный ресурс]. URL: https://lib.dr.iastate.edu/rtd/17852 (дата обращения 22.08.2019).</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Hornsby R.L. Selective media for isolation of Brucella abortus strain RB51. Iowa, Ames: Iowa State University; 1998. (Cited 22 Aug 2019) [Internet]. Available from: https://lib.dr.iastate.edu/rtd/17852.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit9"><label>9</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Пономаренко Д.Г., Русанова Д.В., Хачатурова А.А., Скударева О.Н., Логвиненко О.В., Ракитина Е.Л., Костюченко М.В., Семенко О.В., Малецкая О.В., Куличенко А.Н. Анализ эпидемической и эпизоотической ситуации по бруцеллезу в мире в 2019 г. и прогноз на 2020 г. в Российской Федерации. Проблемы особо опасных инфекций. 2020; (2):48–56. DOI: 10.21055/0370-1069-2020-2-48-56.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Ponomarenko D.G., Rusanova D.V., Khachaturova A.A., Skudareva O.N., Logvinenko O.V., Rakitina E.I., Kostyuchenko M.V., Semenko O.V., Maletskaya O.V., Кulichenko A.N. [Analysis of the epidemic and epizootic situation on brucellosis around the world in 2019 and the forecast for the Russian Federation for 2020]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2020; (2):48–56. DOI: 10.21055/0370-1069-2020-2-48-56.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit10"><label>10</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Karagul M.S., Ikiz S. The evaluation of Brucella spp. isolation rates in ruminant abortion cases by using diﬀerent selective media. Mac. Vet. Rev. 2018; 41(2):177–86. DOI: 10.2478/macvetrev-2018-0024.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Karagul M.S., Ikiz S. The evaluation of Brucella spp. isolation rates in ruminant abortion cases by using diﬀerent selective media. Mac. Vet. Rev. 2018; 41(2):177–86. DOI: 10.2478/macvetrev-2018-0024.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit11"><label>11</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Vicente A.F., Antunes J.M.А.Р., Lara G.H.В., Mioni M.S.R., Allendorf S.D., Peres M.G., Appolinário C.M., Listoni F.J.P., Ribeiro M.G., Megid J. Evaluation of three formulations of culture media for isolation of Brucella spp. regarding their ability to inhibit the growth of contaminating organisms. BioMed. Res. Int. 2014; 2014:702072. DOI: 10.1155/2014/702072.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Vicente A.F., Antunes J.M.А.Р., Lara G.H.В., Mioni M.S.R., Allendorf S.D., Peres M.G., Appolinário C.M., Listoni F.J.P., Ribeiro M.G., Megid J. Evaluation of three formulations of culture media for isolation of Brucella spp. regarding their ability to inhibit the growth of contaminating organisms. BioMed. Res. Int. 2014; 2014:702072. DOI: 10.1155/2014/702072.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit12"><label>12</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Ковтун Ю.С., Курилова А.А., Катунина Л.С, Василенко Е.И. Сравнительная оценка белковых гидролизатов при разработке на их основе питательной среды для культивирования бруцелл. Проблемы особо опасных инфекций. 2016; (4):93–7. DOI: 10.21055/0370-1069-2016-4-93-97.3</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Kovtun Yu.S., Kurilova A.A., Katunina L.S., Vasilenko E.I. [Comparative evaluation of protein hydrolysates in the process of constructing based on them nutrient medium for brucella cultivating]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2016; (4):93–7. DOI: 10.21055/0370-1069-2016-4-93-97.</mixed-citation></citation-alternatives></ref></ref-list><fn-group><fn fn-type="conflict"><p>The authors declare that there are no conflicts of interest present.</p></fn></fn-group></back></article>
