microbeПроблемы особо опасных инфекцийProblems of Particularly Dangerous Infections0370-10692658-719XRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”10.21055/0370-1069-2021-4-79-83microbe-1594Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESОценка применения эритроцитарного диагностикума (лиофилизата) при выявлении возбудителя туляремии в природных очагахAssessment of the Application of Erythrocytal Diagnosticum (Lyophilizate) in Detecting Tularemia Agent in Natural Focihttps://orcid.org/0000-0002-6617-9504КошкидькоА. Г.Koshkid’koA. G.

355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15

13–15, Sovetskaya St., Stavropol, 355035, Russian Federation

https://orcid.org/0000-0002-3564-0791КурчеваС. А.KurchevaS. A.

355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15

13–15, Sovetskaya St., Stavropol, 355035, Russian Federation

stavnipchi@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8443-4089ЖарниковаИ. В.ZharnikovaI. V.

355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15

13–15, Sovetskaya St., Stavropol, 355035, Russian Federation

https://orcid.org/0000-0003-2516-4813ЗайцевА. А.ZaitsevA. A.

355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15

13–15, Sovetskaya St., Stavropol, 355035, Russian Federation

https://orcid.org/0000-0003-2516-4813ГнусареваО. А.GnusarevaO. A.

355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15

13–15, Sovetskaya St., Stavropol, 355035, Russian Federation

https://orcid.org/0000-0002-5493-5296СтарцеваО. Л.StartsevaO. L.

355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15

13–15, Sovetskaya St., Stavropol, 355035, Russian Federation

https://orcid.org/0000-0002-8775-0087ГазиеваА. Ю.GazievaA. Yu.

355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15

13–15, Sovetskaya St., Stavropol, 355035, Russian Federation

https://orcid.org/0000-0001-5360-3786ЖдановаЕ. В.ZhdanovaE. V.

355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15

13–15, Sovetskaya St., Stavropol, 355035, Russian Federation

https://orcid.org/0000-0002-0801-5077ЖарниковаТ. В.ZharnikovaT. V.

355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15

13–15, Sovetskaya St., Stavropol, 355035, Russian Federation

https://orcid.org/0000-0003-2229-6570РусановаД. В.RusanovaD. V.

355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15

13–15, Sovetskaya St., Stavropol, 355035, Russian Federation

ФКУЗ «Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт»РоссияStavropol Research Anti-Plague InstituteRussian Federation202126012022047983Copyright © Кошкидько А.Г., Курчева С.А., Жарникова И.В., Зайцев А.А., Гнусарева О.А., Старцева О.Л., Газиева А.Ю., Жданова Е.В., Жарникова Т.В., Русанова Д.В., 20222022Кошкидько А.Г., Курчева С.А., Жарникова И.В., Зайцев А.А., Гнусарева О.А., Старцева О.Л., Газиева А.Ю., Жданова Е.В., Жарникова Т.В., Русанова Д.В.Koshkid’ko A.G., Kurcheva S.A., Zharnikova I.V., Zaitsev A.A., Gnusareva O.A., Startseva O.L., Gazieva A.Y., Zhdanova E.V., Zharnikova T.V., Rusanova D.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.microbe.ru/jour/article/view/1594

Туляремия – зоонозная болезнь, имеющая широкое географическое распространение, а ее возбудитель Francisella tularensis может быть использован в качестве биотеррористического агента. Цель исследования – оценка применения набора реагентов «Диагностикум эритроцитарный туляремийный иммуноглобулиновый сухой» («ДЭТ -Иг») с использованием контрольных тест-штаммов и полевого материала из природных очагов туляремии. Материалы и методы. С использованием предложенного эритроцитарного диагностикума проведено исследование обеззараженных культур тест-штаммов (F. tularensis Miura, F. tularensis 55, F. tularensis Sсhu, F. tularensis 15 НИИЭГ , Brucella abortus 544, B. melitensis 16-M, B. suis 1330 и Yersinia enterocolitica 64, Y. Enterocolitica 178, Y. enterocolitica 383) и проб объектов окружающей среды, подозрительных на содержание F. tularensis. Результаты и обсуждение. Доказано, что разработанный диагностикум специфичен, чувствителен, прост в использовании при осуществлении рутинной диагностики туляремии. В ходе лабораторных испытаний экспериментальных серий набора реагентов «ДЭТ -Иг» показана возможность качественного определения возбудителя туляремии в бактериальных культурах, биологическом материале и объектах окружающей среды в реакции непрямой гемагглютинации. Сравнение результатов применения эритроцитарных диагностикумов в жидкой и лиофилизированной формах показало преимущества препаратов после лиофилизации: возможность транспортирования и длительного хранения при любых температурных режимах в различных климатических условиях; постановка реакции возможна без применения специальной разводящей жидкости. Установлен гарантийный срок хранения в течение двух лет (срок наблюдения). Полученные результаты указывают на перспективность внедрения разработанного препарата в практику здравоохранения.

Tularemia is a zoonotic disease with a wide geographical dissemination, and its causative agent Francisella tularensis can be used as a bioterrorism agent. The aim of the study was to evaluate the use of a set of reagents “Erythrocytic immunoglobulin dry tularemia diagnosticum” (“DET-Ig”) with the help of control test strains and field material from natural tularemia foci. Materials and methods. Using the introduced erythrocyte diagnosticum, we studied the decontaminated cultures of test strains (F. tularensis Miura, F. tularensis 55, F. tularensis Schu, F. tularensis 15 NIIEG, Brucella abortus 544, B. melitensis 16-M, B. suis 1330, and Yersinia enterocolitica 64, Y. enterocolitica 178, Y. enterocolitica 383) and environmental samples suspected of containing F. tularensis. Results and discussion. It has been proven that the developed diagnosticum is specific, sensitive, and easy to use for routine diagnostics of tularemia. In the course of laboratory tests of the experimental series of the DET-Ig reagent kit, the possibility of qualitative determination of the tularemia agent in bacterial cultures, biological material and environmental samples in the reaction of indirect hemagglutination was demonstrated. Comparison of the results of use of erythrocyte diagnosticum in liquid and lyophilized forms showed the advantages of drugs after lyophilization: the possibility of transportation and long-term storage at any temperature conditions in various climatic conditions; the setting of the reaction is possible without the use of special diluents. The guaranteed storage term is set for two years (observation period). The results obtained indicate the prospects of introducing the developed drug into healthcare practice.

реакция непрямой гемагглютинациивозбудитель туляремииFrancisella tularensisприрод- ные очагиindirect hemagglutination reactiontularemia agentFrancisella tularensisnatural fociReferencesZellner B., Huntley J.F. Ticks and tularemia: Do we know what we don’t know? Front Cell Infect. Microbiol. 2019; 9:146. DOI: 10.3389/fcimb.2019.00146.Zellner B., Huntley J.F. Ticks and tularemia: Do we know what we don’t know? Front Cell Infect. Microbiol. 2019; 9:146. DOI: 10.3389/fcimb.2019.00146.Sarva S.T., Waldo R.H., Belland R.J., Klose K.E. Comparative transcriptional analyses of Francisella tularensis and Francisella novicida. PLoS One. 2016; 11(8):e0158631. DOI: 10.1371/journal.pone.0158631.Sarva S.T., Waldo R.H., Belland R.J., Klose K.E. Comparative transcriptional analyses of Francisella tularensis and Francisella novicida. PLoS One. 2016; 11(8):e0158631. DOI: 10.1371/journal.pone.0158631.Farlow J., Wagner D.M., Dukerich M., Stanley M., Chu M., Kubota K., Petersen J., Keim P. Francisella tularensis in the United States. Emerg. Infect. Dis. 2005; 11(12):1835–41. DOI: 10.3201/eid1112.050728.Farlow J., Wagner D.M., Dukerich M., Stanley M., Chu M., Kubota K., Petersen J., Keim P. Francisella tularensis in the United States. Emerg. Infect. Dis. 2005; 11(12):1835–41. DOI: 10.3201/eid1112.050728.Champion M.D., Zeng Q., Nix E.B., Nano F.E., Keim P., Kodira C.D., Borowsky M., Young S., Koehrsen M., Engels R., Pearson M., Howarth C., Larson L., White J., Alvarado L., Forsman M., Bearden S.W., Sjöstedt A., Titball R., Michell S.L., Birren B., Galagan J. Comparative genomic characterization of Francisella tularensis strains belonging to low and high virulence subspecies. PLoS Pathog. 2009; 5(5):e1000459. DOI: 10.1371/journal.ppat.1000459.Champion M.D., Zeng Q., Nix E.B., Nano F.E., Keim P., Kodira C.D., Borowsky M., Young S., Koehrsen M., Engels R., Pearson M., Howarth C., Larson L., White J., Alvarado L., Forsman M., Bearden S.W., Sjöstedt A., Titball R., Michell S.L., Birren B., Galagan J. Comparative genomic characterization of Francisella tularensis strains belonging to low and high virulence subspecies. PLoS Pathog. 2009; 5(5):e1000459. DOI: 10.1371/journal.ppat.1000459.Кудрявцева Т.Ю., Мокриевич А.Н. Туляремия в мире. Инфекция и иммунитет. 2021; 11(2):249–64. DOI: 10.15789/2220-7619-TTW-1380.Kudryavtseva T.Yu., Mokrievich A.N. [Tularemia in the world]. Infektsiya i Immunitet [Infection and Immunity]. 2021; 11(2):249–64. DOI: 10.15789/2220-7619-TTW-1380.Leelaporn A., Yongyod S., Limsrivanichakorn S., Yungyuen T., Kiratisin P. Francisella novicida bacteremia, Thailand. Emerg. Infect. Dis. 2008; 14(12):1935–7. DOI: 10.3201/eid1412.080435.Leelaporn A., Yongyod S., Limsrivanichakorn S., Yungyuen T., Kiratisin P. Francisella novicida bacteremia, Thailand. Emerg. Infect. Dis. 2008; 14(12):1935–7. DOI: 10.3201/eid1412.080435.Chaignat V., Djordjevic-Spasic M., Ruettger A., Otto P., Klimpel D., Müller W., Sachse K., Araj G., Diller R., Tomaso H. Performance of seven serological assays for diagnosing tularemia. BMC Infect. Dis. 2014; 14:234. DOI: 10.1186/1471-2334-14-234.Chaignat V., Djordjevic-Spasic M., Ruettger A., Otto P., Klimpel D., Müller W., Sachse K., Araj G., Diller R., Tomaso H. Performance of seven serological assays for diagnosing tularemia. BMC Infect. Dis. 2014; 14:234. DOI: 10.1186/1471-2334-14-234.Yanes H., Hennebique A., Pelloux I., Boisset S., Bicout D.J., Caspar Y., Maurin M. Evaluation of in-house and commercial serological tests for diagnosis of human tularemia. J. Clin. Microbiol. 2017; 56(1):e01440-17. DOI: 10.1128/JCM.01440-17.Yanes H., Hennebique A., Pelloux I., Boisset S., Bicout D.J., Caspar Y., Maurin M. Evaluation of in-house and commercial serological tests for diagnosis of human tularemia. J. Clin. Microbiol. 2017; 56(1):e01440-17. DOI: 10.1128/JCM.01440-17.Petersen J.M., Mead P.S., Schriefer M.E. Francisella tularensis: an arthropod-borne pathogen. Vet. Res. 2009; 40(2):7. DOI: 10.1051/vetres:2008045.Petersen J.M., Mead P.S., Schriefer M.E. Francisella tularensis: an arthropod-borne pathogen. Vet. Res. 2009; 40(2):7. DOI: 10.1051/vetres:2008045.Онищенко Г.Г., Кутырев В.В., редакторы. Специфическая индикация патогенных биологических агентов. Практическое руководство. 2-е изд., перераб. и доп. Саратов: ООО «Буква»; 2014. 284 с.Onishchenko G.G., Kutyrev V.V., editors. [Specific Indication of Pathogenic Biological Agents. Practice Guidelines]. 2nd ed., rev. and add. Saratov: LLC “Bukva”; 2014. 284 p.Кошкидько А.Г., Курчева С.А., Жарникова И.В., Старцева О.Л. Разработка защитной среды высушивания для стабилизации эритроцитарного антигенного туляремийного диагностикума. Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю.А. Овчинникова. 2020; 16(4):12–6.Koshkid’ko A.G., Kurcheva S.A., Zharnikova I.V., Startseva O.L. [Development of a protective drying medium to stabilize erythrocyte antigenic tularemia diagnosticum]. Vestnik Biotekhnologii i Fiziko-Khimicheskoy Biologii Imeni Yu.A. Ovchinnikova [Bulletin of Biotechnology and Physical-Chemical Biology Named after Yu.A. Ovchinnikov]. 2020; 16(4):12–6.Онищенко Г.Г., Кутырев В.В., редакторы. Лабораторная диагностика опасных инфекционных болезней. Практическое руководство. 2-е изд., перераб. и доп. М.: ЗАО «Шико»; 2013. 560 с.Onishchenko G.G., Kutyrev V.V., editors. [Laboratory Diagnostics of Dangerous Infectious Diseases. Practice Guidelines]. 2nd ed., rev. and add. Moscow: JSC “Shiko”; 2013. 560 p.Жарникова И.В., Кошкидько А.Г., Курчева С.А., Жданова Е.В., Старцева О.Л., Тюменцева И.С., Афанасьев Е.Н., Семирчева А.А., Геогджаян А.С., Красовская Т.Л. Способ приготовления эритроцитарного диагностикума иммуноглобулинового туляремийного. Патент РФ № 2747420, опубл. 04.05.2021. Бюл. № 13.Zharnikova I.V., Koshkid’ko A.G., Kurcheva S.A., Zhdanova E.V., Startseva O.L., Tyumentseva I.S., Afanas’ev E.N., Semircheva A.A., Geogdzhayan A.S., Krasovskaya T.L. [Method for the production of erythrocyte immunoglobulin tularemia diagnosticum]. RF patent No. 2747420, publ. 04.05.2021. Bul. No. 13.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.