microbeПроблемы особо опасных инфекцийProblems of Particularly Dangerous Infections0370-10692658-719XRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”10.21055/0370-1069-2021-4-96-104microbe-1597Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESХарактеристика связанных с HBsAg-негативной формой заболевания мутаций вируса гепатита В у пациентов гемодиализных центровProfile of Hepatitis B Virus Mutations Associated with HBsAg-Negative Disease in Patients of Hemodialysis Centershttps://orcid.org/0000-0003-2270-8897ОстанковаЮ. В.OstankovaYu. V.

Российская Федерация, 197101, Санкт-Петербург, ул. Мира, 14

14, Mira St., St. Petersburg, 197101, Russian Federation

shenna1@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0547-3945СериковаЕ. Н.SerikovaE. N.

Российская Федерация, 197101, Санкт-Петербург, ул. Мира, 14

14, Mira St., St. Petersburg, 197101, Russian Federation

https://orcid.org/0000-0003-3223-8219СеменовА. В.SemenovA. V.

Российская Федерация, 620030, Екатеринбург, ул. Летняя, 23

23, Letnyaya St., Ekaterinburg, 620030, Russian Federation

alexvsemenov@yahoo.comhttps://orcid.org/0000-0003-2364-9980БанцевичМ. Д.BancevicM. D.

Республика Сербия, 11152, Белград, ул. Воеводы Степе, 458

458, Voevody Stepe St., Belgrade, 11152, Republic of Serbia

mbancevic@torlak.rshttps://orcid.org/0000-0002-1373-6872Филипович-ВигньевичС. Б.Filipovic-VignjevicS. B.

Республика Сербия, 11152, Белград, ул. Воеводы Степе, 458

458, Voevody Stepe St., Belgrade, 11152, Republic of Serbia

https://orcid.org/0000-0002-0579-110XЗуеваЕ. Б.ZuevaE. B.

Российская Федерация, 197101, Санкт-Петербург, ул. Мира, 14

14, Mira St., St. Petersburg, 197101, Russian Federation

https://orcid.org/0000-0001-7267-6024ВасильеваГ. В.Vasil’evaG. V.

Российская Федерация, 194354, Санкт-Петербург, Северный пр., 1, лит. А

1, Severny Avenue, St. Petersburg, 194354, Russian Federation

galina.vasilyeva@fmc-ag.ruhttps://orcid.org/0000-0002-3451-9674ЗаряЯ. В.ZaryaYa. V.

Российская Федерация, 194354, Санкт-Петербург, Северный пр., 1, лит. А

1, Severny Avenue, St. Petersburg, 194354, Russian Federation

https://orcid.org/0000-0002-7603-3269СайтгалинаМ. А.SaitgalinaM. A.

Российская Федерация, 197101, Санкт-Петербург, ул. Мира, 14

14, Mira St., St. Petersburg, 197101, Russian Federation

https://orcid.org/0000-0002-4794-7475ИвановаА. Р.IvanovaA. R.

Российская Федерация, 197101, Санкт-Петербург, ул. Мира, 14

14, Mira St., St. Petersburg, 197101, Russian Federation

https://orcid.org/0000-0002-9887-8246ЖабасоваА. С.ZhabasovaA. S.

Российская Федерация, 195112, Санкт-Петербург, пр. Шаумяна, 51

51, Shaumyan Avenue, St. Petersburg, 195112, Russian Federation

her.infernal.majesty.95@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0003-4571-8799ТотолянА. А.TotolianA. A.

Российская Федерация, 197101, Санкт-Петербург, ул. Мира, 14

14, Mira St., St. Petersburg, 197101, Russian Federation

ФБУН «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Пастера»РоссияSt. Petersburg Pasteur InstituteRussian FederationЕкатеринбургский научно-исследовательский институт вирусных инфекций ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор»РоссияEkaterinburg Research Institute of Viral Infections of the State Scientific Center of Virology and Biotechnology “Vector”Russian FederationИнститут вирусологии, вакцин и сывороток «Торлак»СербияInstitute of Virology, Vaccines and Sera “Torlak”SerbiaООО «Центр Диализа Санкт-Петербург»РоссияLimited Liability Company “Saint Petersburg Dialysis Сenter”Russian FederationСанкт-Петербургское ГБУЗ «Городская поликлиника № 17»РоссияSt. Petersburg City Polyclinic No 17Russian Federation2021260120220496104Copyright © Останкова Ю.В., Серикова Е.Н., Семенов А.В., Банцевич М.Д., Филипович-Вигньевич С.Б., Зуева Е.Б., Васильева Г.В., Заря Я.В., Сайтгалина М.А., Иванова А.Р., Жабасова А.С., Тотолян А.А., 20222022Останкова Ю.В., Серикова Е.Н., Семенов А.В., Банцевич М.Д., Филипович-Вигньевич С.Б., Зуева Е.Б., Васильева Г.В., Заря Я.В., Сайтгалина М.А., Иванова А.Р., Жабасова А.С., Тотолян А.А.Ostankova Y.V., Serikova E.N., Semenov A.V., Bancevic M.D., Filipovic-Vignjevic S.B., Zueva E.B., Vasil’eva G.V., Zarya Y.V., Saitgalina M.A., Ivanova A.R., Zhabasova A.S., Totolian A.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.microbe.ru/jour/article/view/1597

Цель работы – охарактеризовать мутации в геноме вируса гепатита В (ВГВ ), связанные с HBsAg-негативной формой заболевания, у пациентов, получающих заместительную терапию гемодиализом. Материалы и методы. Материалом исследования служили образцы плазмы крови пациентов из гемодиализных центров Санкт-Петербурга, Россия (173 образца) и Белграда, Сербия (108 образцов), которые тестировали на наличие серологических и молекулярно-генетических маркеров вируса гепатита В с последующим полногеномным секвенированием и определением значимых мутаций. Результаты и обсуждение. Антитела к гепатиту В выявили у 7,5 и 11,1 % пациентов из Санкт-Петербурга и Белграда соответственно, а HBsAg – в 1,1 % случаев в группе из России и в 0,9 % – из Сербии. ДНК ВГВ как у пациентов из Санкт-Петербурга, так и из Белграда обнаружили в 2,8 % исследуемых проб. Филогенетический анализ девяти вирусных изолятов показал, что преобладал вирус генотипа D (88,9 %) по сравнению с генотипом А (11,1 %). Среди образцов, полученных от пациентов из Санкт-Петербурга, четыре относились к субгенотипу D2, а один – генотипу D3. Четыре образца от больных из Белграда относились к субгенотипам D1, D2, D3, A2. При анализе нуклеотидных последовательностей ВГВ во всех случаях выявлены мутации в MHR-регионе и только в HBsAg-негативных изолятах – в области 124–147 аминокислот, в том числе мутации P120T, R122K, A128V, Q129R, M133I, G145R, влияющие на распознавание HBsAg анти-HBs-антителами и связанные с устойчивостью вируса к вакцине. Результаты исследования указывают на сохранение проблемы передачи возбудителей гемоконтактных вирусных гепатитов в отделениях гемодиализа Российской Федерации и Республики Сербия. Распространенность скрытой формы хронического гепатита В и мутаций вакцинного бегства во всех выявленных случаях свидетельствует о необходимости обратить внимание на встречаемость мутантных вариантов возбудителя у пациентов гемодиализных центров.

The aim of this study was to characterize mutations in the hepatitis B virus (HBV) genome associated with HBsAg-negative form of the disease in patients receiving hemodialysis replacement therapy. Materials and methods. We used blood plasma samples obtained from hemodialysis centers in St. Petersburg, Russia – 173 patients and 108 patients from Belgrade, Republic of Serbia. The samples were examined for the presence of serological (HBsAg, antibodies anti-HBs IgG, anti-HBcore IgG) and molecular-genetic (HBV DNA) markers of HBV followed by whole-genome sequencing and determination of clinically significant virus mutations. Results and discussion. Antibodies to hepatitis B were detected in 7.5 % and 11.1 % of patients from St. Petersburg and Belgrade, respectively. HBsAg was identified only in 1.1 % of cases in the group from Russia and in 0.9 % of cases in the group from Serbia. HBV DNA was determined in 2.8 % of the studied samples from both, patients from Saint-Petersburg and Belgrade. Phylogenetic analysis of 9 viral isolates showed that genotype D virus (88.9 %) prevailed as compared to genotype A (11.1 %) in the examined group. Among the samples obtained from patients from St. Petersburg, four belonged to the D2 sub-genotype, one to the D3 genotype. Four samples obtained from Belgrade patients belonged to different sub-genotypes – D1, D2, D3, A2, respectively. When analyzing the nucleotide sequences of the HBV genomes, mutations in the MHR region were detected in all cases, but only in HBsAg-negative isolates, mutations were revealed in the region of 124–147 amino acids, including mutations P120T, R122K, A128V, Q129R, M133I, G145R affecting the recognition of HBsAg by anti-HBs antibodies and associated with the resistance of the virus to the vaccine. The results of this study indicate that transmission of blood-borne viral hepatitis agent in the hemodialysis departments of the Russian Federation and the Republic of Serbia still exists. The prevalence of the latent chronic hepatitis B, coupled with the presence of vaccine escape mutations in all identified cases, indicates the need to pay close attention to the occurrence of the virus mutant variants in hemodialysis centers.

вирус гепатита Воккультный гепатит Вскрытый гепатит Всерологические маркерымолекулярно-биологические маркерыклинически значимые мутациилабораторная диагностикагемодиализhepatitis В virusoccult hepatitis B infectionlatent hepatitis B serological markersmolecular-biological markersclinically significant mutationslaboratory diagnosticshemodialysisReferencesСтроков А.Г., Гуревич К.Я., Ильин А.П., Денисов А.Ю., Земченков А.Ю., Андрусев А.М., Шутов Е.В., Котенко О.Н., Злоказов В.Б. Лечение пациентов с хронической болезнью почек 5 стадии (ХБП 5) методами гемодиализа и гемодиафильтрации. Клинические рекомендации. Нефрология. 2017; 21(3):92–111. DOI: 10.24884/1561-6274-2017-3-92-111.Strokov G.A., Gurevich K.Ya., Il’in A.P., Denisov A.Yu., Zemchenkov A.Yu., Andrusev A.M., Shutov E.V., Kotenko O.N., Zlokazov V.B. [Treatment of patients with chronic kidney disease stage 5 (CKD 5) by hemodialysis and hemodiafiltration. Clinical guidelines]. Nefrologiya [Nephrology]. 2017. 21(3):92–111. DOI: 10.24884/1561-6274-2017-3-92-111.Bernieh B. Viral hepatitis in hemodialysis: An update. J. Transl. Int. Med. 2015; 3(3):93–105. DOI: 10.1515/jtim-2015-0018.Bernieh B. Viral hepatitis in hemodialysis: An update. J. Transl. Int. Med. 2015; 3(3):93–105. DOI: 10.1515/jtim-2015-0018.Lezaic V., Stosovic M., Marinkovic J., Rangelov V., Djukanovic L. Hepatitis B and hepatitis C virus infection and outcome of hemodialysis and kidney transplant patients. Ren. Fail. 2008; 30(1):81–7. DOI: 10.1080/08860220701742211.Lezaic V., Stosovic M., Marinkovic J., Rangelov V., Djukanovic L. Hepatitis B and hepatitis C virus infection and outcome of hemodialysis and kidney transplant patients. Ren. Fail. 2008; 30(1):81–7. DOI: 10.1080/08860220701742211.Raimondo G., Locarnini S., Pollicino T., Levrero M., Zoulim F., Lok A.S.; Taormina Workshop on Occult HBV Infection Faculty Members. Update of the statements on biology and clinical impact of occult hepatitis B virus infection. J. Hepatol. 2019; 71(2):397–408. DOI: 10.1016/j.jhep.2019.03.034.Raimondo G., Locarnini S., Pollicino T., Levrero M., Zoulim F., Lok A.S.; Taormina Workshop on Occult HBV Infection Faculty Members. Update of the statements on biology and clinical impact of occult hepatitis B virus infection. J. Hepatol. 2019; 71(2):397–408. DOI: 10.1016/j.jhep.2019.03.034.Awad G., Roch T., Stervbo U., Kaliszczyk S., Stittrich A., Hörstrup J., Cinkilic O., Appel H., Natrus L., Gayova L., Seibert F., Bauer F., Westhoff T., Nienen M., Babel N. Robust hepatitis B vaccine-reactive T cell responses in failed humoral immunity. Mol. Ther. Methods Clin. Dev. 2021; 21:288–98. DOI: 10.1016/j.omtm.2021.03.012.Awad G., Roch T., Stervbo U., Kaliszczyk S., Stittrich A., Hörstrup J., Cinkilic O., Appel H., Natrus L., Gayova L., Seibert F., Bauer F., Westhoff T., Nienen M., Babel N. Robust hepatitis B vaccine-reactive T cell responses in failed humoral immunity. Mol. Ther. Methods Clin. Dev. 2021; 21:288–98. DOI: 10.1016/j.omtm.2021.03.012.Edey M., Barraclough K., Johnson D.W. Review article: Hepatitis B and dialysis. Nephrology (Carlton). 2010; 15(2):137–45. DOI: 10.1111/j.1440-1797.2009.01268.x.Edey M., Barraclough K., Johnson D.W. Review article: Hepatitis B and dialysis. Nephrology (Carlton). 2010; 15(2):137–45. DOI: 10.1111/j.1440-1797.2009.01268.x.Adane T., Getawa S. The prevalence and associated factors of hepatitis B and C virus in hemodialysis patients in Africa: A systematic review and meta-analysis. PLoS One. 2021. 16(6):e0251570. DOI: 10.1371/journal.pone.0251570.Adane T., Getawa S. The prevalence and associated factors of hepatitis B and C virus in hemodialysis patients in Africa: A systematic review and meta-analysis. PLoS One. 2021. 16(6):e0251570. DOI: 10.1371/journal.pone.0251570.Tang Y., Liu X., Lu X., He Q., Li G., Zou Y. Occult Hepatitis B Virus Infection in Maintenance Hemodialysis Patients: Prevalence and Mutations in “a” Determinant. Int. J. Med. Sci. 2020; 17(15):2299–305. DOI: 10.7150/ijms.49540.Tang Y., Liu X., Lu X., He Q., Li G., Zou Y. Occult Hepatitis B Virus Infection in Maintenance Hemodialysis Patients: Prevalence and Mutations in “a” Determinant. Int. J. Med. Sci. 2020; 17(15):2299–305. DOI: 10.7150/ijms.49540.Серикова Е.Н., Семенов А. В., Останкова Ю.В., Тотолян Арег А. Метод выявления вируса гепатита В в плазме крови при низкой вирусной нагрузке с использованием ПЦР в режиме реального времени. Клиническая лабораторная диагностика. 2021; 66(1):59–64. DOI: 10.18821/0869-2084-2021-66-1-59-64.Serikova E.N., Semenov A.V., Ostankova Yu.V., Totolyan Areg A. [Method for detecting hepatitis B virus in blood plasma at low viral load using real-time PCR]. Klinicheskaya Laboratornaya Diagnostika [Russian Clinical Laboratory Diagnostics]. 2021. 66(1):59–64. DOI: 10.18821/0869-2084-2021-66-1-59-64.Ostankova Yu.V., Semenov A.V., Zueva E.B., Totolian Areg A. The First Cases of Hepatitis B Virus Subgenotype D4 Detection in Patients with Chronic, Acute, and Occult Hepatitis B in the Russian Federation. Mol. Genet. Microbiol. Virol. 2020; 35(4):221–8. DOI: 10.3103/S0891416820040072.Ostankova Yu.V., Semenov A.V., Zueva E.B., Totolian Areg A. The First Cases of Hepatitis B Virus Subgenotype D4 Detection in Patients with Chronic, Acute, and Occult Hepatitis B in the Russian Federation. Mol. Genet. Microbiol. Virol. 2020; 35(4):221–8. DOI: 10.3103/S0891416820040072.Lazarevic I., Cupic M., Delic D., Svirtlih N.S., Simonovic J., Jovanovic T. Distribution of HBV genotypes, subgenotypes and HBsAg subtypes among chronically infected patients in Serbia. Arch. Virol. 2007; 152(11):2017–25. DOI: 10.1007/s00705-007-1031-0.Lazarevic I., Cupic M., Delic D., Svirtlih N.S., Simonovic J., Jovanovic T. Distribution of HBV genotypes, subgenotypes and HBsAg subtypes among chronically infected patients in Serbia. Arch. Virol. 2007; 152(11):2017–25. DOI: 10.1007/s00705-007-1031-0.Мукомолов С.Л., Левакова И.А., Синайская Е.В., Сулягина Л.Г., Кислый П.Н., Тимаховская Г.Ю., Иванова Н.В., Старосельский К.Г., Ряснянский В.Ю. Эпидемиологическая характеристика вирусных гепатитов В и С в отделениях гемодиализа в Санкт-Петербурге в современный период. Часть 1. Регистрация гемоконтактных вирусных гепатитов и серологические маркеры вирусных гепатитов В и С у пациентов отделений гемодиализа. Инфекция и иммунитет. 2011; 1(2):143–50. DOI: 10.15789/2220-7619-2011-2-143-150.Mukomolov S.L., Levakova I.A., Sinaiskaya E.V., Sulyagina L.G., Kisly P.N., Timakhovskaya G.Yu., Ivanova N.V., Staroselsky K.G., Ryasnyansky V.Yu. [Epidemiological characteristic of viral hepatitis B and C in the hemodialysis units in Saint-Petersburg in modern time. Part 1. Registration of hemo-contact viral hepatitis and serological markers of HBV and HCV infections in patients of hemodialysis unit]. Infektsiya i Immunitet [Russian Journal of Infection and Immunity]. 2011; 1(2):143–50. DOI: 10.15789/2220-7619-2011-2-143-150.Aghakhani A., Banifazl M., Kalantar E., Eslamifar A., Ahmadi F., Razeghi E., Atabak S., Amini M., Khadem-Sadegh A., Ramezani A. Occult hepatitis B virus infection in hemodialysis patients with isolated hepatitis B core antibody: a multicenter study. Ther. Apher. Dial. 2010; 14(3):349–53. DOI: 10.1111/j.1744-9987.2009.00798.x.Aghakhani A., Banifazl M., Kalantar E., Eslamifar A., Ahmadi F., Razeghi E., Atabak S., Amini M., Khadem-Sadegh A., Ramezani A. Occult hepatitis B virus infection in hemodialysis patients with isolated hepatitis B core antibody: a multicenter study. Ther. Apher. Dial. 2010; 14(3):349–53. DOI: 10.1111/j.1744-9987.2009.00798.x.Samadi E., Mirshahabi H., Motamed N., Sadeghi H. Prevalence of Occult Hepatitis B Virus Infection in Hemodialysis Patients Using Nested PCR. Rep. Biochem. Mol. Biol. 2020; 9(1):82–8. DOI: 10.29252/rbmb.9.1.82.Samadi E., Mirshahabi H., Motamed N., Sadeghi H. Prevalence of Occult Hepatitis B Virus Infection in Hemodialysis Patients Using Nested PCR. Rep. Biochem. Mol. Biol. 2020; 9(1):82–8. DOI: 10.29252/rbmb.9.1.82.Hashemi S.J., Hajiani E., Masjedizadeh A.R., Makvandi M., Shahbazian H., Shayesteh A.A., Karimi M. A case-control study on occult hepatitis B infection in chronic hemodialysis patients from South-West of Iran. Govaresh. 2015; 20(2):135–40.Hashemi S.J., Hajiani E., Masjedizadeh A.R., Makvandi M., Shahbazian H., Shayesteh A.A., Karimi M. A case-control study on occult hepatitis B infection in chronic hemodialysis patients from South-West of Iran. Govaresh. 2015; 20(2):135–40.Zerbini A., Pilli M., Boni C., Fisicaro P., Penna A., Di Vincenzo P., Giuberti T., Orlandini A., Raffa G., Pollicino T., Raimondo G., Ferrari C., Missale G. The characteristics of the cell-mediated immune response identify different profiles of occult hepatitis B virus infection. Gastroenterology. 2008; 134(5):1470–81. DOI: 10.1053/j.gastro.2008.02.017.Zerbini A., Pilli M., Boni C., Fisicaro P., Penna A., Di Vincenzo P., Giuberti T., Orlandini A., Raffa G., Pollicino T., Raimondo G., Ferrari C., Missale G. The characteristics of the cell-mediated immune response identify different profiles of occult hepatitis B virus infection. Gastroenterology. 2008; 134(5):1470–81. DOI: 10.1053/j.gastro.2008.02.017.Minuk G.Y., Sun D.F., Greenberg R., Zhang M., Hawkins K., Uhanova J., Gutkin A., Bernstein K., Giulivi A., Osiowy C. Occult hepatitis B virus infection in a North Americanadult hemodialysis patient population. Hepatology. 2004; 40(5):1072–7. DOI: 10.1002/hep.20435.Minuk G.Y., Sun D.F., Greenberg R., Zhang M., Hawkins K., Uhanova J., Gutkin A., Bernstein K., Giulivi A., Osiowy C. Occult hepatitis B virus infection in a North Americanadult hemodialysis patient population. Hepatology. 2004; 40(5):1072–7. DOI: 10.1002/hep.20435.Colagrossi L., Hermans L.E., Salpini R., Di Carlo D., Pas S.D., Alvarez M., Ben-Ari Z., Boland G., Bruzzone B., Coppola N., Seguin-Devaux C., Dyda T., Garcia F., Kaiser R., Köse S., Krarup H., Lazarevic I., Lunar M.M., Maylin S., Micheli V., Mor O., Paraschiv S., Paraskevis D., Poljak M., Puchhammer-Stöckl E., Simon F., Stanojevic M., Stene-Johansen K., Tihic N., Trimoulet P., Verheyen J., Vince A., Lepej S.Z., Weis N., Yalcinkaya T., Boucher C.A.B., Wensing A.M.J., Perno C.F., Svicher V.; HEPVIR working group of the European Society for translational antiviral research (ESAR). Immune-escape mutations and stop-codons in HBsAg develop in a large proportion of patients with chronic HBV infection exposed to anti-HBV drugs in Europe. BMC Infect. Dis. 2018; 18(1):251. DOI: 10.1186/s12879-018-3161-2.Colagrossi L., Hermans L.E., Salpini R., Di Carlo D., Pas S.D., Alvarez M., Ben-Ari Z., Boland G., Bruzzone B., Coppola N., Seguin-Devaux C., Dyda T., Garcia F., Kaiser R., Köse S., Krarup H., Lazarevic I., Lunar M.M., Maylin S., Micheli V., Mor O., Paraschiv S., Paraskevis D., Poljak M., Puchhammer-Stöckl E., Simon F., Stanojevic M., Stene-Johansen K., Tihic N., Trimoulet P., Verheyen J., Vince A., Lepej S.Z., Weis N., Yalcinkaya T., Boucher C.A.B., Wensing A.M.J., Perno C.F., Svicher V.; HEPVIR working group of the European Society for translational antiviral research (ESAR). Immune-escape mutations and stop-codons in HBsAg develop in a large proportion of patients with chronic HBV infection exposed to anti-HBV drugs in Europe. BMC Infect. Dis. 2018; 18(1):251. DOI: 10.1186/s12879-018-3161-2.Chaouch H., Taffon S., Villano U., Equestre M., Bruni R., Belhadj M., Hannachi N., Aouni M., Letaief A., Ciccaglione A.R. Naturally occurring surface antigen variants of hepatitis B virus in Tunisian patients. Intervirology. 2016; 59(1):36–47. DOI: 10.1159/000445894.Chaouch H., Taffon S., Villano U., Equestre M., Bruni R., Belhadj M., Hannachi N., Aouni M., Letaief A., Ciccaglione A.R. Naturally occurring surface antigen variants of hepatitis B virus in Tunisian patients. Intervirology. 2016; 59(1):36–47. DOI: 10.1159/000445894.Almeida R.W., Mello F.C.D.A., Menegoy I.V., Santo M.P.D.E., Ginuíno C.F., Sousa P.S.F., Villar L.M., Lampe E., Lewis-Ximenez L.L. Detection and molecular characterisation of a diagnosis escape variant associated with occult hepatitis B virus in Brazil. Mem. Inst. Oswaldo Cruz. 2017; 112(7):485–91. DOI: 10.1590/0074-02760160477.Almeida R.W., Mello F.C.D.A., Menegoy I.V., Santo M.P.D.E., Ginuíno C.F., Sousa P.S.F., Villar L.M., Lampe E., Lewis-Ximenez L.L. Detection and molecular characterisation of a diagnosis escape variant associated with occult hepatitis B virus in Brazil. Mem. Inst. Oswaldo Cruz. 2017; 112(7):485–91. DOI: 10.1590/0074-02760160477.Lazarevic I. Clinical implications of hepatitis B virus mutations: recent advances. World J. Gastroenterol. 2014; 20(24):7653–64. DOI: 10.3748/wjg.v20.i24.7653.Lazarevic I. Clinical implications of hepatitis B virus mutations: recent advances. World J. Gastroenterol. 2014; 20(24):7653–64. DOI: 10.3748/wjg.v20.i24.7653.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.