microbeПроблемы особо опасных инфекцийProblems of Particularly Dangerous Infections0370-10692658-719XRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”10.21055/0370-1069-2024-2-15-19microbe-1993Research ArticleОБЗОРЫREVIEWSБиотехнологический потенциал антигенов возбудителей чумы, холеры, туляремии и сибирской язвы, полученных в институте «Микроб»Biotechnological Potential of Antigens of Plague, Cholera, Tularemia and Anthrax Pathogens, Obtained at the Russian Research Institute “Microbe”https://orcid.org/0000-0002-3059-4386КиреевМ. Н.KireevM. N.

Киреев Михаил Николаевич, 

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

Mikhail N. Kireev,

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

rusrapi@microbe.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0172-2964ГромоваО. В.GromovaO. V.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

https://orcid.org/0000-0003-3793-6526БорисоваС. В.BorisovaS. V.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

https://orcid.org/0000-0003-3624-0850ВоробьеваС. А.Vorob’evaS. A.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

https://orcid.org/0000-0003-0791-895XВольниковВ. Р.Vol’nikovV. R.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

https://orcid.org/0000-0003-4980-4109СалиховР. Р.SalikhovR. R.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

https://orcid.org/0000-0002-3044-971XВолохО. А.VolokhO. A.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

ФКУН «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»РоссияRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”Russian Federation202424062024021519Copyright © Киреев М.Н., Громова О.В., Борисова С.В., Воробьева С.А., Вольников В.Р., Салихов Р.Р., Волох О.А., 20242024Киреев М.Н., Громова О.В., Борисова С.В., Воробьева С.А., Вольников В.Р., Салихов Р.Р., Волох О.А.Kireev M.N., Gromova O.V., Borisova S.V., Vorob’eva S.A., Vol’nikov V.R., Salikhov R.R., Volokh O.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.microbe.ru/jour/article/view/1993

Во ФКУН Российский противочумный институт «Микроб» Роспотребнадзора разрабатываются и внедряются методы получения и очистки биологически активных веществ возбудителей чумы, холеры, туляремии и сибирской язвы, которые используются при конструировании профилактических и диагностических препаратов.

Цель обзора – обобщение и систематизация накопленных данных по выделению, очистке и анализу антигенов и токсинов возбудителей чумы, холеры, туляремии и сибирской язвы. Также уделено внимание применению и перспективам использования полученных антигенов для конструирования медицинских иммунобиологических препаратов (МИБП). Институт «Микроб» является референс-центром по чуме, поэтому современные иммунодиагностические препараты необходимы и востребованы. Профилактические препараты антигенного уровня против перечисленных выше инфекций также являются предметом изучения сотрудников института. Основные этапы выделения, очистки и анализа антигенов включают в себя выбор или конструирование подходящего штамма, культивирование, экстракцию, концентрирование и очистку антигенов и токсинов с применением биотехнологических методик, позволяющих получить и сохранить интересующее исследователя биологически активное вещество. Для изучения антигенной активности очищенных антигенов используют лабораторных животных, фиксируют и анализируют иммунный ответ, получают антисыворотку. Затем следует этап анализа физико-химических и иммунобиологических свойств выделенных антигенных препаратов и составление паспорта антигена. Охарактеризованные антигены используются для конструирования профилактических и диагностических препаратов.

Russian Research Anti-Plague Institute “Microbe” of the Rospotrebnadzor develops and implements methods for obtaining and purifying biologically active substances of the causative agents of plague, cholera, tularemia and anthrax, which are used in the design of preventive and diagnostic preparations.

The aim of the review is to summarize and systematize the accumulated data on the isolation, purification and assessment of antigens and toxins of plague, cholera, tularemia and anthrax pathogens. Attention is also paid to the application and prospects for using the obtained antigens for the design of medical immunobiological preparations (MIBPs). The Institute “Microbe” is a reference center for plague, hence modern immunodiagnostic drugs are necessary and in demand. Antigen-level preventive drugs against the infections listed above are also the subject of study by the institute’s staff. The main stages of isolation, purification and analysis of antigens include the selection or construction of a suitable strain; cultivation, extraction, concentration and purification of antigens and toxins using biotechnological techniques that allow for obtaining and preserving the biologically active substance of interest to the researcher. To study the antigenic activity of purified antigens, laboratory animals are involved, the immune response is recorded and analyzed, and antiserum is obtained. This is followed by the stage of investigating the physicochemical and immunobiological properties of the isolated antigen preparations and drawing up an antigen profile. The characterized antigens are used for the design of preventive and diagnostic drugs.

антигеныYersinia pestisVibrio choleraeFrancisella tularensisBacillus аnthracisYersinia pestisVibrio choleraeFrancisella tularensisBacillus anthracisantigensReferencesБахрах Е.Э., Вейнблат В.И. Соматические полисахаридсодержащие антигены чумного микроба. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1972; 3:12–6.Bakhrakh E.E., Veinblat V.I. [Somatic polysaccharide containing antigens of the plague microbe]. Zhurnal Mikrobiologii, Epidemiologii i Immunologii [Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunology]. 1972; (3):12–6.Вейнблат В.И., Дальвадянц С.М., Веренков М.С. Методы получения и очистки капсульного антигена и эндотоксина возбудителя чумы. Лабораторное дело. 1983; 12:37–9.Veinblat V.I., Dal’vadyants S.M., Verenkov M.S. [Methods for obtaining and purifying capsular antigen and endotoxin of the plague pathogen]. Laboratornoe Delo [Laboratory Work]. 1983; (12):37–9.Тараненко Т.М., Гольдфарб Л.М., Наумов А.В., Андреева И.П. Ускоренный метод выявления структурных особенностей липополисахарида по наличию альдогептозы у бактерий чумы и псевдотуберкулеза. Лабораторное дело. 1982; 2:46–7.Taranenko T.M., Goldfarb L.M., Naumov A.V., Andreeva I.P. [An express method for identifying the structural features of lipopoly saccharide by the presence of aldoheptose in plague and pseudotu berculosis bacteria]. Laboratornoe Delo [Laboratory Work]. 1982; (2):46–7.Сердобинцев Л.Н., Тараненко Т.М., Веренков М.С., Наумов А.В. Получение капсульного антигена методом одноэтапной гелевой фильтрации. В кн.: Вопросы профилактики природно-очаговых инфекций. Саратов; 1983. С. 37–41.Serdobintsev L.N., Taranenko T.M., Verenkov M.S., Naumov A.V. [Production of capsular antigen using onestep gel filtration]. In: [Issues of Prevention of NaturalFocal Infections]. Saratov; 1983. P. 37–41.Гусева Н.П., Кравцов А.Л., Киреев М.Н., Тараненко Т.М., Шмелькова Т.П. Липополисахарид чумного микроба как индуктор апоптоза лимфоцитов крови и перитонеальных макрофагов. Проблемы особо опасных инфекций. 2003; 86:117–23.Guseva N.P., Kravtsov A.L., Kireev M.N., Taranenko T.M., Shmel’kova T.P. [Plague microbe lipopolysaccharide as an inducer of apoptosis of blood lymphocytes and peritoneal macrophages]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2003; (86):117–23.Щербаков А.А., Заднова С.П., Коннов Н.П. Анализ препарата мембранных белков чумного микроба иммунохимическими методами. В кн.: Молекулярная биология и микробиология природно-очаговых инфекций. Саратов; 1986. С. 93–100.Shcherbakov A.A., Zadnova S.P., Konnov N.P. [Analysis of preparation of the plague microbe membrane proteins using immu nochemical methods]. In: [Molecular Biology and Microbiology of NaturalFocal Infections]. Saratov; 1986. P. 93–100.Видяева H.A., Кутырев В.В., Проценко O.A., Олейников П.Н., Анисимов П.И. Экспрессия антигенов чумного микроба, кодируемых плазмидой Са2+-зависимости. Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 1990; 6:17–21.Vidyaeva N.A., Kutyrev V.V., Protsenko O.A., Oleynikov P.N., Anisimov P.I. [Expression of plague microbe antigens enco¬ ded by the Ca2+dependence plasmid]. Molekulyarnaya Genetika, Mikrobiologiya i Virusologiya [Molecular Genetics, Microbiology and Virology]. 1990; (6):17–21.Микеров А.Н., Емельянова Н.В., Назарова Л.С., Видяева Н.А., Кутырев В.В. Действие на мышей препаратов белков Yop, кодируемых плазмидой кальцийзависимости Yersinia pestis. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2000; 6:70–6.Mikerov A.N., Emel’yanova N.V., Nazarova L.S., Vidyaeva N.A., Kutyrev V.V. [Effect of Yop protein preparations encoded by the Yersinia pestis calcium dependence plasmid on mice]. Zhurnal Mikrobiologii, Epidemiologii i Immunologii [Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunology]. 2000; (6):70–6.Спицын А.Н., Уткин Д.В., Киреев М.Н., Шарапова Н.А., Ерохин П.С., Германчук В.Г., Кочубей В.И. Оптическая регистрация образования иммунных комплексов с использованием наночастиц коллоидного золота. Оптика и спектроскопия. 2018; 125(5):716–20. DOI: 10.21883/OS.2018.11.46848.199.Spitsyn A.N., Utkin D.V., Kireev M.N., Sharapova N.A., Erokhin P.S., Germanchuk V.G., Kochubey V.I. [Optical registration of the formation of immune complexes using colloidal gold nano particles]. Optika i Spektroskopiya [Optics and Spectroscopy]. 2018; 125(5):716–20. DOI: 10.21883/OS.2018.11.46848.199.Уткин Д.В., Киреев М.Н., Никифоров К.А., Волох О.А. Способ изготовления биологических микроматриц для выявления генетических и белковых маркеров. Патент РФ № 2792447, опубл. 22.03.2023.Utkin D.V., Kireev M.N., Nikiforov K.A., Volokh O.A. [A method for producing biological microarrays for identifying gene¬ tic and protein markers]. RF Patent No. 2792447, publ. 03/22/2023.Бойко А.В., Киреев М.Н., Осина Н.А., Куклев В.Е. Композитный чумной антигенный F1-диагностикум для индикации специфических антител. Патент РФ № 2582941, опубл. 27.04.2016. Бюл. № 12.Boiko A.V., Kireev M.N., Osina N.A., Kuklev V.E. [Composite plague antigen F1 diagnosticum for indicating specific antibodies]. RF Patent No. 2582941, publ. 04/27/2016. Bull. No. 12.Киреев М.Н., Волох О.А., Никифоров А.К. Композиты на основе природных биополимеров: свойства и перспективы применения при создании трансдермальных форм вакцин. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2016; 1:70–2.Kireev M.N., Volokh O.A., Nikiforov A.K. [Composites based on natural biopolymers: properties and prospects for use in the creation of transdermal forms of vaccines]. Razrabotka i Registratsiya Lekarstvennykh Sredstv [Development and Registration of Medicinal Products]. 2016; (1):70–2.Джапаридзе М.Н., Наумов А.В., Мелещенко М.В., Никитина Г.П. Способ получения пероральной химической вакцины. Патент РФ № 2076734, опубл. 10.04.1997.Dzhaparidze M.N., Naumov A.V., Meleshchenko M.V., Nikitina G.P. [Method for producing an oral chemical vaccine]. RF Patent No. 2076734, publ. 04/10/1997.Волох О.А., Шепелёв И.А., Заднова С.П., Крепостнова И.М., Еремин С.А. Изучение биокинетических особенностей и оптимизация условий культивирования штаммов холерного вибриона – продуцентов протективных антигенов, перспективных для внедрения в производство. Проблемы особо опасных инфекций. 2008; 1:52–5. DOI: 10.21055/0370-1069-2008-1(95)-52-55.Volokh O.A., Shepelev I.A., Zadnova S.P., Krepostnova I.M., Eremin S.A. [A study of biokinetic peculiarities and optimi zation of the conditions for culturing Vibrio cholerae strains over producing protective antigens suitable for use in the production]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2008; (1):52–5. DOI: 10.21055/03701069 20081(95)5255.Громова О.В., Джапаридзе М.Н., Дятлов И.А., Елисеев Ю.Ю., Киреев М.Н., Космаенко О.М. Способ получения О-антигена холерного очищенного. Патент РФ № 2143280, опубл. 27.12.1919.Gromova O.V., Dzhaparidze M.N., Dyatlov I.A., Eliseev Yu.Yu., Kireev M.N., Kosmaenko O.M. [Method for obtaining puri fied cholera Oantigen]. RF Patent No. 2143280, publ. 12/27/1919.Захарова Т.Л., Заднова С.П., Ливанова Л.Ф., Киреев М.Н., Смирнова Н.И. Использование рекомбинантных штаммов для одновременного получения нескольких очищенных основных протективных антигенов холерного вибриона. Проблемы особо опасных инфекций. 2009; 2:68–71. DOI: 10.21055/03701069-2009-2(100)-68-71.Zakharova T.L., Zadnova S.P., Livanova L.F., Kireev M.N., Smirnova N.I. [Recombinant strains application for simultaneous preparation of several purified cholera vibrio antigens]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2009; (2):68–71. DOI: 10.21055/0370106920092(100)6871.Дыкман Л.А., Волох О.А., Громова О.В., Дуракова О.С., Воробьева С.А., Киреев М.Н., Ливанова Л.Ф., Никифоров А.К., Щеголев С.Ю., Кутырев В.В. Получение и характеристика антител к протективным антигенам холерного вибриона, конъюгированным с наночастицами золота. Доклады Российской академии наук. Науки о жизни. 2020; 490(1):27–30. DOI: 10.31857/S2686738920010084.Dykman L.A., Volokh O.A., Gromova O.V., Durakova O.S., Vorob’eva S.A., Kireev M.N., Livanova L.F., Nikiforov A.K., Shchegolev S.Yu., Kutyrev V.V. [Production and characteri¬ zation of antibodies to protective antigens of Vibrio cholerae con jugated with gold nanoparticles]. [Reports of the Russian Academy of Sciences. Life Sciences]. 2020; 490(1):27–30. DOI: 10.31857/S2686738920010084.Овчинникова М.В., Абрамова Е.Г., Киреев М.Н., Комиссаров А.В., Никифоров А.К., Кутырев В.В. Энтеросорбент для направленной сорбции холерного экзотоксина, лекарственная форма энтеросорбента для направленной сорбции холерного экзотоксина. Патент РФ № 26113556, опубл. 21.02.2017. Бюл. № 6.Ovchinnikova M.V., Abramova E.G., Kireev M.N., Komissarov A.V., Nikiforov A.K., Kutyrev V.V. [Enterosorbent for targeted sorption of cholera exotoxin, dosage form of enterosorbent for targeted sorption of cholera exotoxin]. RF Patent No. 26113556, publ. 02/21/2017. Bull. No. 6.Кузьмиченко И.А., Киреев М.Н., Громова О.В., Бронникова В.С., Нижегородцев С.А. Гидролизующая способность протеазы ферментного комплекса холерного вибриона – протеовибрина по отношению к белковым субстратам. Проблемы особо опасных инфекций. 2008; 4:37–9. DOI: 10.21055/03701069-2008-4(98)-37-39.Kuz’michenko I.A., Kireev M.N., Gromova O.V., Bronnikova V.S., Nizhegorodtsev S.A. [Hydrolyzing ability of pro tease of enzyme complex of cholera vibrio that is proteovibrin for protein substrates]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2008; (4):37–9. DOI: 10.21055/0370106920084(98)3739.Полунина Т.А., Гусева Н.П., Кузьмиченко И.А., Девдариани З.Л., Заднова С.П., Степанов А.В., Киреев М.Н. Способ получения липополисахарида возбудителя чумы. Патент РФ № 2483112, опубл. 27.05.2013. Бюл. № 15.Polunina T.A., Guseva N.P., Kuz’michenko I.A., Devdariani Z.L., Zadnova S.P., Stepanov A.V., Kireev M.N. [Method for produ¬ cing plague pathogen lipopolysaccharide]. RF Patent No. 2483112, publ. 05/27/2013. Bull. No. 15.Кузьмиченко И.А., Громова О.В., Киреев М.Н., Плотников О.П., Грачева И.В., Виноградова Н.А., Солодовников Н.С., Червякова Н.С., Нижегородцев С.А, Антонычева М.В. Способ получения питательной основы и питательная среда для культивирования микроорганизмов рода Yersinia и Vibrio. Патент РФ № 2360962, опубл. 10.07.2009.Kuz’michenko I.A., Gromova O.V., Kireev M.N., Plotnikov O.P., Gracheva I.V., Vinogradova N.A., Solodovnikov N.S., Chervyakova N.S., Nizhegorodtsev S.A., Antonycheva M.V. [Method for obtaining a nutrient base and nutrient medium for cultivating microorganisms of the genus Yersinia and Vibrio]. RF Patent No. 2360962, publ. 07/10/2009.Кузнецова Е.М., Волох О.А., Шепелёв И.А., Никифоров А.К. Компонентный состав протективного антигенного комплекса туляремийного микроба. Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 2012; 3:22–5.Kuznetsova E.M., Volokh O.A., Shepelev I.A., Nikiforov A.K. [Component composition of the protective anti genic complex of tularemia microbe]. Molekulyarnaya Genetika, Mikrobiologiya i Virusologiya [Molecular Genetics, Microbiology and Virology]. 2012; (3):22–5.Кузнецова Е.М., Волох О.А., Краснов Я.М., Полунина Т.А., Авдеева Н.Г., Самохвалова Ю.И., Баданин Д.В., Киреев М.Н., Германчук В.Г., Никифоров А.К. Комплекс Bfr-O-антиген внешних мембран Francisella tularensis: получение, характеристика, возможности использования. Биотехнология. 2019; 35(1):73–81. DOI: 10.21519/0234-2758-2019-35-1-73-81.Kuznetsova E.M., Volokh O.A., Krasnov Ya.M., Polunina T.A., Avdeeva N.G., Samokhvalova Yu.I., Badanin D.V., Kireev M.N., Germanchuk V.G., Nikiforov A.K. [Francisella tularensis outer membrane complex BfrOantigen: preparation, characteris tics, possibilities of use]. Biotekhnologiya [Biotechnology]. 2019; 35(1):73–81. DOI: 10.21519/0234275820193517381.Борисова С.В., Волох О.А., Кожевников В.А., Кравцов А.Л., Никифоров А.К. Динамика показателей иммунитета биомоделей, иммунизированных стресс-белками Francisella tularensis. Вестник биотехнологии и физико-химической биологии им. Ю.А. Овчинникова. 2023; 19(3):6–13.Borisova S.V., Volokh O.A., Kozhevnikov V.A., Kravtsov A.L., Nikiforov A.K. [Dynamics of immunity parameters of biomo¬ dels immunized with Francisella tularensis stress proteins]. [Bulletin of Biotechnology and PhysicalChemical Biology named after Yu.A. Ovchinnikov]. 2023; 19(3):6–13.Терешкина Н.Е., Терехова И.В., Сырова Н.А., Девдариани З.Л., Ляшова О.Ю., Григорьева Г.В., Лобовикова О.А., Шульгина И.В., Иваненко И.Л., Захарова Н.Б., Безрукова Г.А., Спирин В.Ф. Конструирование и медицинские испытания моноклональной дот-иммуноферментной тест-системы для детекции туляремийного микроба «ДИАТул-М». Проблемы особо опасных инфекций. 2013; 2:42–5. DOI: 10.21055/0370-1069-20132-42-45.Tereshkina N.E., Terekhova I.V., Syrova N.A., Devdariani Z.L., Lyashova O.Yu., Grigorieva G.V., Lobovikova O.A., Shul’gina I.V., Ivanenko I.L., Zakharova N.B., Bezrukova G.A., Spirin V.F. [Constructing and medical trials of a monoclonal dotimmunoenzyme testsystem “DIATulM” for tularemia microbe detection]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2013; (2):42–5. DOI: 10.21055/03701069201324245.Дыкман Л.А., Волох О.А., Кузнецова Е.М., Никифоров А.К. Иммуногенность конъюгатов протективных антигенных комплексов туляремийного микроба с наночастицами золота. Российские нанотехнологии. 2018; 13(7-8):36–43.Dykman L.A., Volokh O.A., Kuznetsova E.M., Nikiforov A.K. [Immunogenicity of conjugates of protective anti genic complexes of the tularemia microbe with gold nanoparticles]. Rossijskie Nanotekhnologii [Russian Nanotechnologies]. 2018; 13(78):36–43.Микшис Н.И., Семакова А.П., Попова П.Ю., Кудрявцева О.М., Бугоркова С.А., Комиссаров А.В., Германчук В.Г., Попов Ю.А. Определение соответствия прототипа рекомбинантной сибиреязвенной вакцины требованиям, предъявляемым к иммунобиологическим препаратам. Инфекция и иммунитет. 2018; 8(3):388–92.Mikshis N.I., Semakova A.P., Popova P.Yu., Kudryavtseva O.M., Bugorkova S.A., Komissarov A.V., Germanchuk V.G., Popov Yu.A. [Determination of compliance of the recombinant an thrax vaccine prototype with the requirements for immunobiological preparations]. Infektsiya i Immunitet [Infection and Immunity]. 2018; 8(3):388–92.Микшис Н.И., Попов Ю.А., Шулепов Д.В. Аспорогенный рекомбинантный штамм Bacillus anthracis 55ΔТПА1Spo– (pUB110PA-1)-продуцент протективного антигена сибиреязвенного микроба. Патент РФ № 2321629, опубл. 10.04.2008.Mikshis N.I., Popov Yu.A., Shulepov D.V. [Asporogenous recombinant strain of Bacillus anthracis 55ΔTPA1Spo– (pUB110PA1), producer of the protective antigen of anthrax mi crobe]. RF Patent No. 2321629, publ. 04/10/2008.Киреев М.Н., Тараненко Т.М., Храмченкова Т.А., Гусева Н.П., Полунина Т.А., Павлова В.И., Подборонова Н.А., Девдариани З.Л., Голова А.Б., Дальвадянц С.М. Изучение стабильности антигенных компонентов чумной химической вакцины (Ф1+ОСА) в тестах на «ускоренное старение» и стрессусловия. Проблемы особо опасных инфекций. 2009; 1:70–4. DOI: 10.21055/0370-1069-2009-1(99)-70-74.Kireev M.N., Taranenko T.M., Khramchenkova T.A., Guseva N.P., Polunina T.A., Pavlova V.I., Podboronova N.A., Devdariani Z.L., Golova A.B., Dal’vadyants S.M. [Analysis of sta bility of plague chemical vaccine (F1+MSA) antigenic components in the tests of accelerated ageing and stress conditions]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2009; (1):70–4. DOI: 10.21055/0370106920091(99)7074.Гаева А.В., Громова О.В., Дуракова О.С., Генералов С.В., Волох О.А. Современные подходы к контролю активных компонентов холерной химической вакцины. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2018; 1:152–7.Gaeva A.V., Gromova O.V., Durakova O.S., Generalov S.V., Volokh O.A. [Modern approaches to the control of active com ponents of cholera chemical vaccine]. Razrabotka i Registratsiya Lekarstvennykh Sredstv [Development and Registration of Medicinal Products]. 2018; (1):152–7.Гаева А.В., Громова О.В., Дуракова О.С., Генералов С.В., Ливанова Л.Ф., Волох О.А. Определение специфической активности компонентов холерной химической вакцины с использованием культуры клеток. Биотехнология. 2020; 36(3):82–9.Gaeva A.V., Gromova O.V., Durakova O.S., Generalov S.V., Livanova L.F., Volokh O.A. [Determination of the specific ac tivity of cholera chemical vaccine components using cell culture]. Biotekhnologiya [Biotechnology]. 2020; 36(3):82–9.Громова О.В., Киреев М.Н., Дуракова О.С., Ливанова Л.Ф., Гаева А.В., Воробьева С.А., Волох О.А. Способ получения холерного токсина для контроля производства холерной химической вакцины. Патент РФ № 2799574, опубл. 06.07.2023. Бюл. № 19.Gromova O.V., Kireev M.N., Durakova O.S., Livanova L.F., Gaeva A.V., Vorob’eva S.A., Volokh O.A. [Method for obtai¬ ning cholera toxin to control the production of cholera chemical vac cine]. RF Patent No. 2799574, publ. 07/06/2023. Bull. No. 19.Воробьева С.А., Дуракова О.С., Волох О.А., Громова О.В. Возможность определения специфической активности О-АГ в производстве холерной химической вакцины с помощью дот-анализа. Известия Саратовского университета. Новая серия. Серия: Химия. Биология. Экология. 2018; 18(3):318–9. DOI: 10.18500/1816-9775-2018-18-3-318-319.Vorob’eva S.A., Durakova O.S., Volokh O.A., Gromova O.V. [Possibility of determining the specific activity of OAG in the production of cholera chemical vaccine using dot ana¬ lysis]. Izvestiya Saratovskogo Universiteta. Novaya Seriya. Seriya: Khimiya. Biologiya. Ekologiya [Bulletin of Saratov University. New series. Series: Chemistry. Biology. Ecology]. 2018; 18(3):318–9. DOI: 10.18500/181697752018183318319.Германчук В.Г., Уткин Д.В., Спицын А.Н., Киреев М.Н., Щербакова Н.Е. Индикация холерного токсина с помощью MALDI масс-спектрометрии. Здоровье населения и среда обитания – ЗНиСО. 2015; 3:27–31.Germanchuk V.G., Utkin D.V., Spitsyn A.N., Kireev M.N., Shcherbakova N.E. [Indication of cholera toxin using MALDI mass spectrometry]. Zdorov’e Naseleniya i Sreda Obitaniya [Public Health and Life Environment]. 2015; (3):27–31.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.