microbeПроблемы особо опасных инфекцийProblems of Particularly Dangerous Infections0370-10692658-719XRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”10.21055/0370-1069-2025-2-134-144microbe-2175Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESВстречаемость у природных штаммов туляремийного микроба генетических детерминант, ассоциированных с аттенуациейOccurrence of Genetic Determinants Associated with Attenuation in Wild-Type Strains of the Tularemia Microbehttps://orcid.org/0000-0002-9190-099XНарышкинаЕ. А.NaryshkinaE. A.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

rusrapi@microbe.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0954-5683ОсинаН. А.OsinaN. A.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

rusrapi@microbe.ruhttps://orcid.org/0009-0000-7575-653XКатышевС. Д.KatyshevS. D.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

https://orcid.org/0000-0002-4909-2394КрасновЯ. М.KrasnovYa. M.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

https://orcid.org/0000-0002-5289-7783ШараповаН. А.SharapovaN. A.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

https://orcid.org/0000-0001-7190-4427ФедоровА. В.FedorovA. V.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

https://orcid.org/0000-0002-8260-4670КатышевА. Д.KatyshevA. D.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

https://orcid.org/0000-0002-1332-9580ЛяшоваО. Ю.LyashovaO. Yu.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

https://orcid.org/0000-0001-5308-0022ОсинА. В.OsinA. V.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

https://orcid.org/0009-0005-8528-1933ДевдарианиЗ. Л.DevdarianiZ. L.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

https://orcid.org/0000-0003-1143-4069ЩербаковаС. А.ShcherbakovaS. A.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

ФКУН «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»РоссияRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”Russian Federation20250407202502134144Copyright © Нарышкина Е.А., Осина Н.А., Катышев С.Д., Краснов Я.М., Шарапова Н.А., Федоров А.В., Катышев А.Д., Ляшова О.Ю., Осин А.В., Девдариани З.Л., Щербакова С.А., 20252025Нарышкина Е.А., Осина Н.А., Катышев С.Д., Краснов Я.М., Шарапова Н.А., Федоров А.В., Катышев А.Д., Ляшова О.Ю., Осин А.В., Девдариани З.Л., Щербакова С.А.Naryshkina E.A., Osina N.A., Katyshev S.D., Krasnov Y.M., Sharapova N.A., Fedorov A.V., Katyshev A.D., Lyashova O.Y., Osin A.V., Devdariani Z.L., Shcherbakova S.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.microbe.ru/jour/article/view/2175

Цель работы – определение генетических маркеров, ассоциированных с аттенуацией (делеции в RD-18, RD‑19, единичные мутации), у природных штаммов возбудителя туляремии. Материалы и методы. В работе использованы 107 штаммов Francisella tularensis из Государственной коллекции патогенных бактерий ФКУН Российский противочумный институт «Микроб» Роспотребнадзора, а также 1077 геномов F. tularensis из базы данных NCBI GenBank. Культивирование осуществляли на чашках Петри с FT-агаром (ФБУН ГНЦ ПМБ), рН 7,2, посевы инкубировали в течение 36–48 ч при температуре (37±1) °С. Сборку чернового генома осуществляли с помощью пакета программ Unicycler v.0.4.7. С использованием программы snippy v.4.6.0 получена матрица из коровых SNPs. Дендрограмму получали в программе PhyML методом Likelihood c моделью замен GTR. Результаты и обсуждение. Среди изученных штаммов туляремийного микроба выявлено 11 эритромицин-резистентных штаммов F. tularensis филогенетических групп B.12 B.24 и B.12 B.20, содержащих делеции в областях RD-18 и RD-19. Также определены эритромицин-резистентные и эритромицин-чувствительные культуры патогена групп B.12 B.24, B.12 B.20, B.12 B.39 и B.4, B.6 B.10, B.6 B.7 соответственно, имеющие делецию только в области RD-18 – 11 штаммов, и только в RD-19 – 8. Из 11 культур, имеющих делеции в обеих областях, 9 относились к филогенетической группе B.12 B.24 и формировали отдельный кластер, оставшиеся две – к B.12 B.20. Для кластера таких штаммов характерно наличие семи уникальных мутаций, ассоциированных с формированием липолисахарида, метаболизмом ароматических соединений и размножением в макрофагах. У штаммов группы B.12 B.24 выявлены три дополнительные специфичные мутации. Нами определены 29 штаммов возбудителя туляремии (вакцинные, их производные и природные), несущие в разном количестве генетические маркеры, ассоциированные с аттенуацией.

The aim of our work was to determine genetic markers associated with attenuation (deletions in RD-18, RD-19 positions, single mutations) in natural strains of the causative agent of tularemia. Materials and methods. The work used 107 Francisella tularensis strains from the State Collection of Pathogenic Bacteria of the Russian Anti-Plague Institute “Microbe”, as well as 1077 F. tularensis genomes provided by the NCBI GenBank database. Cultivation was carried out on Petri dishes with FT-agar (State Research Center of Applied Microbiology and Biotechnology), pH 7.2; the cultures were incubated for 36–48 h at a temperature of (37±1) °С. The draft genome was assembled using the Unicycler v.0.4.7 software package. The snippy v.4.6.0 program was used to obtain a matrix of core SNPs. The dendrogram was drawn in the PhyML program using the Likelihood method with the GTR substitution model. Results and discussion. Among the studied strains of tularemia microbe, eleven erythromycin-resistant strains of F. tularensis of the phylogenetic groups B.12 B.24 and B.12 B.20 were identified, containing deletions in the RD-18 and RD-19 regions. Erythromycinresistant and erythromycin-sensitive cultures of the pathogen of the groups B.12 B.24, B.12 B.20, B.12 B.39 and B.4, B.6 B.10, B.6 B.7, respectively, were also identified, having a deletion only in the RD-18 region – 11 strains, and only in RD-19 – 8. Of the 11 cultures with deletions in both regions, in 9 cases the strains belonged to the phylogenetic group B.12 B.24 and formed a separate cluster, the remaining two – to B.12 B.20. The cluster of such strains is characterized by the presence of seven unique mutations associated with the formation of lipopolysaccharide, metabolism of aromatic compounds and reproduction in macrophages. Three additional specific mutations have been identified for the B.12 B.24 group strains. We have identified 29 strains of the tularemia pathogen (vaccine ones, their derivatives and natural ones), carrying genetic markers associated with attenuation to varying degrees.

Francisella tularensisгенетические маркерыассоциированные с аттенуацией полиморфные нуклеотидыобласти дифференциации RD-18 и RD-19вакцинные штаммыфилогенетическая линияFrancisella tularensisgenetic markersattenuation-associated polymorphic nucleotidesRD-18 and RD19 differentiation regionsvaccine strainsphylogenetic lineageReferencesKarlsson E., Golovliov I., Lärkeryd A., Granberg M., Larsson E., Öhrman C., Niemcewicz M., Birdsell D., Wagner D.M., Forsman M., Johansson A. Clonality of erythromycin resistance in Francisella tularensis. J. Antimicrob. Chemother. 2016; 71(10):2815–23. DOI: 10.1093/jac/dkw235.Karlsson E., Golovliov I., Lärkeryd A., Granberg M., Larsson E., Öhrman C., Niemcewicz M., Birdsell D., Wagner D.M., Forsman M., Johansson A. Clonality of erythromycin resistance in Francisella tularensis. J. Antimicrob. Chemother. 2016; 71(10):2815–23. DOI: 10.1093/jac/dkw235.Colquhoun D.J., Larsson P., Duodu S., Forsman M. The family Francisellaceae. In: Rosenberg E., DeLong E.F., Lory S., Stackebrandt E., Thompson F., editors. The Prokaryotes. Gammaproteobacteria. Berlin, Heidelberg: Springer; 2014. P. 287–314. DOI: 10.1007/978-3-642-38922-1_236.Colquhoun D.J., Larsson P., Duodu S., Forsman M. The family Francisellaceae. In: Rosenberg E., DeLong E.F., Lory S., Stackebrandt E., Thompson F., editors. The Prokaryotes. Gammaproteobacteria. Berlin, Heidelberg: Springer; 2014. P. 287–314. DOI: 10.1007/978-3-642-38922-1_236.Кудрявцева Т.Ю., Попов В.П., Мокриевич А.Н., Куликалова Е.С., Холин А.В., Мазепа А.В., Борзенко М.А., Черепанова Е.А., Матвеева В.А., Транквилевский Д.В., Храмов М.В., Дятлов И.А. Анализ эпизоотологической и эпидемиологической ситуации по туляремии на территории Российской Федерации в 2023 г. и прогноз на 2024 г. Проблемы особо опасных инфекций. 2024; (1):17–29. DOI: 10.21055/0370-1069-2024-1-17-29.Kudryavtseva T.Yu., Popov V.P., Mokrievich A.N., Kulikalova E.S., Kholin A.V., Mazepa A.V., Borzenko M.A., Cherepanova E.A., Matveeva V.A., Trankvilevsky D.V., Khramov M.V., Dyatlov I.A. [Analysis of the epizootiological and epidemiological situation on tularemia in the Russian Federation in 2023 and forecast for 2024]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2024; (1):17–29. DOI: 10.21055/0370-1069-2024-1-17-29.Кутырев В.В., Девдариани З.Л., Саяпина Л.В. Современное состояние научных исследований в области вакцинопрофилактики особо опасных бактериальных инфекций. Проблемы особо опасных инфекций. 2006; (2):18–24.Kutyrev V.V., Devdariani Z.L., Sayapina L.V. [Current state of scientific research in the field of vaccine prevention of particularly dangerous bacterial infections]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2006; (2):18–24.Саяпина Л.В., Бондарев В.П., Олефир Ю.В. Современное состояние вакцинопрофилактики особо опасных инфекций. Проблемы особо опасных инфекций. 2016; (2):107–10. DOI: 10.21055/0370-1069-2016-2-107-110.Sayapina L.V., Bondarev V.P., Olefir Yu.V. [Current state of the vaccine prophylaxis of particularly dangerous infections]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2016; (2):107–10. DOI: 10.21055/0370-1069-2016-2-107-110.Саяпина Л.В., Хорева И.И., Байдалова Н.П., Горяев А.А., Давыдов Д.С., Поступайло В.Б., Меркулов В.А. Оценка остаточной вирулентности вакцинного штамма Francisella tularensis 15 НИИЭГ по данным многолетних наблюдений. Проблемы особо опасных инфекций. 2018; (1):98–102. DOI: 10.21055/0370-1069-2018-1-98-102.Sayapina L.V., Khoreva I.I., Baidalova N.P., Goryaev A.A., Davydov D.S., Postupailo V.B., Merkulov V.A. [Assessment of residual virulence of the Francisella tularensis 15 NIIEG vaccine strain based on long-term observations]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2018; (1):98–102. DOI: 10.21055/0370-1069-2018-1-98-102.Нарышкина Е.А., Краснов Я.М., Альхова Ж.В., Баданин Д.В., Осин А.В., Ляшова О.Ю., Саяпина Л.В., Бондарев В.П., Меркулов В.А., Олефир Ю.В., Кутырев В.В. Полногеномное секвенирование и филогенетический анализ вакцинного штамма Francisella tularensis 15 НИИЭГ. Проблемы особо опасных инфекций. 2020; (2):91–7. DOI: 10.21055/0370-1069-2020-2-91-97.Naryshkina E.A., Krasnov Ya.M., Al’khova Zh.V., Badanin D.V., Osin A.V., Lyashova O.Yu., Sayapina L.V., Bondarev V.P., Merkulov V.A., Olefir Yu.V., Kutyrev V.V. [Whole-genome sequencing and phylogenetic analysis of the Francisella tularensis 15 NIIEG vaccine strain]. Problemy Osobo Opasnykh Infektsii [Problems of Particularly Dangerous Infections]. 2020; (2):91–7. DOI: 10.21055/0370-1069-2020-2-91-97.Svensson K., Larsson P., Johansson D., Byström M., Forsman M., Johansson A. Evolution of subspecies of Francisella tularensis. J. Bacteriol. 2005; 187(11):3903–8. DOI: 10.1128/JB.187.11.3903-3908.2005.Svensson K., Larsson P., Johansson D., Byström M., Forsman M., Johansson A. Evolution of subspecies of Francisella tularensis. J. Bacteriol. 2005; 187(11):3903–8. DOI: 10.1128/JB.187.11.3903-3908.2005.Jaing C.J., McLoughlin K.S., Thissen J.B., Zemla A., Gardner S.N., Vergez L.M., Bourguet F., Mabery S., Fofanov V.Y., Koshinsky H., Jackson P.J. Identification of genome-wide mutations in ciprofloxacin-resistant F. tularensis LVS using whole genome tiling arrays and next generation sequencing. PLoS One. 2016; 11(9):e0163458. DOI: 10.1371/journal.pone.0163458.Jaing C.J., McLoughlin K.S., Thissen J.B., Zemla A., Gardner S.N., Vergez L.M., Bourguet F., Mabery S., Fofanov V.Y., Koshinsky H., Jackson P.J. Identification of genome-wide mutations in ciprofloxacin-resistant F. tularensis LVS using whole genome tiling arrays and next generation sequencing. PLoS One. 2016; 11(9):e0163458. DOI: 10.1371/journal.pone.0163458.Samrakandi M.M., Zhang C., Zhang M., Nietfeldt J., Kim J., Iwen P.C., Olson M.E., Fey P.D., Duhamel G.E., Hinrichs S.H., Cirillo J.D., Benson A.K. Genome diversity among regional populations of Francisella tularensis subspecies tularensis and Francisella tularensis subspecies holarctica isolated from the US. FEMS Microbiol Lett. 2004; 237(1):9–17. DOI: 10.1016/j.femsle.2004.06.008.Samrakandi M.M., Zhang C., Zhang M., Nietfeldt J., Kim J., Iwen P.C., Olson M.E., Fey P.D., Duhamel G.E., Hinrichs S.H., Cirillo J.D., Benson A.K. Genome diversity among regional populations of Francisella tularensis subspecies tularensis and Francisella tularensis subspecies holarctica isolated from the US. FEMS Microbiol Lett. 2004; 237(1):9–17. DOI: 10.1016/j.femsle.2004.06.008.Larsson P., Svensson K., Karlsson L., Guala D., Granberg M., Forsman M., Johanssont A. Canonical insertion-deletion markers for rapid DNA typing of Francisella tularensis. Emerg. Infect. Dis. 2007; 13(11):1725–32. DOI: 10.3201/eid1311.070603.Larsson P., Svensson K., Karlsson L., Guala D., Granberg M., Forsman M., Johanssont A. Canonical insertion-deletion markers for rapid DNA typing of Francisella tularensis. Emerg. Infect. Dis. 2007; 13(11):1725–32. DOI: 10.3201/eid1311.070603.Vogler A.J., Birdsell D., Price L.B., Bowers J.R., Beckstrom-Sternberg S.M., Auerbach R.K., Beckstrom-Sternberg J.S., Johansson A., Clare A., Buchhagen J.L., Petersen J.M., Pearson T., Vaissaire J., Dempsey M.P., Foxall P., Engelthaler D.M., Wagner D.M., Keim P. Phylogeography of Francisella tularensis: global expansion of a highly fit clone. J. Bacteriol. 2009; 191(8): 2474–84. DOI: 10.1128/JB.01786-08.Vogler A.J., Birdsell D., Price L.B., Bowers J.R., Beckstrom-Sternberg S.M., Auerbach R.K., Beckstrom-Sternberg J.S., Johansson A., Clare A., Buchhagen J.L., Petersen J.M., Pearson T., Vaissaire J., Dempsey M.P., Foxall P., Engelthaler D.M., Wagner D.M., Keim P. Phylogeography of Francisella tularensis: global expansion of a highly fit clone. J. Bacteriol. 2009; 191(8): 2474–84. DOI: 10.1128/JB.01786-08.Karlsson E., Svensson K., Lindgren P., Byström M., Sjödin A., Forsman M., Johansson A. The phylogeographic pattern of Francisella tularensis in Sweden indicates a Scandinavian origin of Eurosiberian tularaemia. Environ. Microbiol. 2013; 15(2):634–45. DOI: 10.1111/1462-2920.12052.Karlsson E., Svensson K., Lindgren P., Byström M., Sjödin A., Forsman M., Johansson A. The phylogeographic pattern of Francisella tularensis in Sweden indicates a Scandinavian origin of Eurosiberian tularaemia. Environ. Microbiol. 2013; 15(2):634–45. DOI: 10.1111/1462-2920.12052.Svensson K., Larsson P., Johansson D., Byström M., Forsman M., Johansson A. Evolution of subspecies of Francisella tularensis. J. Bacteriol. 2005; 187(11):3903–8. DOI: 10.1128/JB.187.11.3903-3908.2005.Svensson K., Larsson P., Johansson D., Byström M., Forsman M., Johansson A. Evolution of subspecies of Francisella tularensis. J. Bacteriol. 2005; 187(11):3903–8. DOI: 10.1128/JB.187.11.3903-3908.2005.Wick R.R., Judd L.M., Gorrie C.L., Holt K.E. Unicycler: Resolving bacterial genome assemblies from short and long sequencing reads. PLoS Comput. Biol. 2017; 13(6):e1005595. DOI: 10.1371/journal.pcbi.1005595.Wick R.R., Judd L.M., Gorrie C.L., Holt K.E. Unicycler: Resolving bacterial genome assemblies from short and long sequencing reads. PLoS Comput. Biol. 2017; 13(6):e1005595. DOI: 10.1371/journal.pcbi.1005595.Player R.A., Verratti K.J., Grady S.L., Beck L.C., Goodwin B.G., Earnhart C.G., Sozhamannan S. Complete genome sequence of Francisella tularensis live vaccine strain NR-28537 (BEI Master Cell Bank). Microbiol. Resour. Announc. 2020; 9(50):e01248-20. DOI: 10.1128/MRA.01248-20.Player R.A., Verratti K.J., Grady S.L., Beck L.C., Goodwin B.G., Earnhart C.G., Sozhamannan S. Complete genome sequence of Francisella tularensis live vaccine strain NR-28537 (BEI Master Cell Bank). Microbiol. Resour. Announc. 2020; 9(50):e01248-20. DOI: 10.1128/MRA.01248-20.Shevtsov V., Kairzhanova A., Shevtsov A., Shustov A., Kalendar R., Abdrakhmanov S., Lukhnova L., Izbanova U., Ramankulov Y., Vergnaud G. Genetic diversity of Francisella tularensis subsp. holarctica in Kazakhstan. PLoS Negl. Trop. Dis. 2021; 15(5):e0009419. DOI: 10.1371/journal.pntd.0009419.Shevtsov V., Kairzhanova A., Shevtsov A., Shustov A., Kalendar R., Abdrakhmanov S., Lukhnova L., Izbanova U., Ramankulov Y., Vergnaud G. Genetic diversity of Francisella tularensis subsp. holarctica in Kazakhstan. PLoS Negl. Trop. Dis. 2021; 15(5):e0009419. DOI: 10.1371/journal.pntd.0009419.Rohmer L., Brittnacher M., Svensson K., Buckley D., Haugen E., Zhou Y., Chang J., Levy R., Hayden H., Forsman M., Olson M., Johansson A., Kaul R., Miller S.I. Potential source of Francisella tularensis live vaccine strain attenuation determined by genome comparison. Infect. Immun. 2006; 74(12):6895–906. DOI: 10.1128/IAI.01006-06.Rohmer L., Brittnacher M., Svensson K., Buckley D., Haugen E., Zhou Y., Chang J., Levy R., Hayden H., Forsman M., Olson M., Johansson A., Kaul R., Miller S.I. Potential source of Francisella tularensis live vaccine strain attenuation determined by genome comparison. Infect. Immun. 2006; 74(12):6895–906. DOI: 10.1128/IAI.01006-06.Crawford R.M., Van De Verg L., Yuan L., Hadfield T.L., Warren R.L., Drazek E.S., Houng H.H., Hammack C., Sasala K., Polsinelli T.,. Thompson J., Hoover D.L. Deletion of purE attenuates Brucella melitensis infection in mice. Infect. Immun. 1996; 64(6):2188–92. DOI: 10.1128/iai.64.6.2188-2192.1996.Crawford R.M., Van De Verg L., Yuan L., Hadfield T.L., Warren R.L., Drazek E.S., Houng H.H., Hammack C., Sasala K., Polsinelli T.,. Thompson J., Hoover D.L. Deletion of purE attenuates Brucella melitensis infection in mice. Infect. Immun. 1996; 64(6):2188–92. DOI: 10.1128/iai.64.6.2188-2192.1996.Karlsson J., Prior R.G., Williams K., Lindler L., Brown K.A., Chatwell N., Hjalmarsson K., Loman N., Mack K.A., Pallen M., Popek M., Sandström G., Sjöstedt A., Svensson T., Tamas I., Andersson S.G., Wren B.W., Oyston P.C., Titball R.W. Sequencing of the Francisella tularensis strain Schu 4 genome reveals the shikimate and purine metabolic pathways, targets for the construction of a rationally attenuated auxotrophic vaccine. Microb. Comp. Genomics. 2000; 5(1):25–39. DOI: 10.1089/10906590050145249.Karlsson J., Prior R.G., Williams K., Lindler L., Brown K.A., Chatwell N., Hjalmarsson K., Loman N., Mack K.A., Pallen M., Popek M., Sandström G., Sjöstedt A., Svensson T., Tamas I., Andersson S.G., Wren B.W., Oyston P.C., Titball R.W. Sequencing of the Francisella tularensis strain Schu 4 genome reveals the shikimate and purine metabolic pathways, targets for the construction of a rationally attenuated auxotrophic vaccine. Microb. Comp. Genomics. 2000; 5(1):25–39. DOI: 10.1089/10906590050145249.Ivánovics G., Marjai E., Dobozy A. The growth of purine mutants of Bacillus anthracis in the body of the mouse. J. Gen. Microbiol. 1968; 53(2):147–62. DOI: 10.1099/00221287-53-2-147.Ivánovics G., Marjai E., Dobozy A. The growth of purine mutants of Bacillus anthracis in the body of the mouse. J. Gen. Microbiol. 1968; 53(2):147–62. DOI: 10.1099/00221287-53-2-147.O’Callaghan D., Maskell D., Tite J., Dougan G. Immune responses in BALB/c mice following immunization with aromatic compound or purine-dependent Salmonella typhimurium strains. Immunology. 1990; 69(2):184–9.O’Callaghan D., Maskell D., Tite J., Dougan G. Immune responses in BALB/c mice following immunization with aromatic compound or purine-dependent Salmonella typhimurium strains. Immunology. 1990; 69(2):184–9.DeAngelis P.L. Evolution of glycosaminoglycans and their glycosyltransferases: Implications for the extracellular matrices of animals and the capsules of pathogenic bacteria. Anat. Rec. 2002; 268(3):317–26. DOI: 10.1002/ar.10163.DeAngelis P.L. Evolution of glycosaminoglycans and their glycosyltransferases: Implications for the extracellular matrices of animals and the capsules of pathogenic bacteria. Anat. Rec. 2002; 268(3):317–26. DOI: 10.1002/ar.10163.Kahler C.M., Carlson R.W., Rahman M.M., Martin L.E., Stephens D.S. Two glycosyltransferase genes, lgtF and rfaK, constitute the lipooligosaccharide ice (inner core extension) biosynthesis operon of Neisseria meningitidis. J. Bacteriol. 1996; 178(23):6677– 84. DOI: 10.1128/jb.178.23.6677-6684.1996.Kahler C.M., Carlson R.W., Rahman M.M., Martin L.E., Stephens D.S. Two glycosyltransferase genes, lgtF and rfaK, constitute the lipooligosaccharide ice (inner core extension) biosynthesis operon of Neisseria meningitidis. J. Bacteriol. 1996; 178(23):6677– 84. DOI: 10.1128/jb.178.23.6677-6684.1996.Phillips N.J., Schilling B., McLendon M.K., Apicella M.A., Gibson B.W. Novel modification of lipid A of Francisella tularensis. Infect. Immun. 2004; 72(9):5340–8. DOI: 10.1128/IAI.72.9.5340-5348.2004.Phillips N.J., Schilling B., McLendon M.K., Apicella M.A., Gibson B.W. Novel modification of lipid A of Francisella tularensis. Infect. Immun. 2004; 72(9):5340–8. DOI: 10.1128/IAI.72.9.5340-5348.2004.Павлов В.М., Дятлов И.А. Молекулярно-генетические исследования бактерий рода Francisella и их прикладное значение. М.; 2012. 267 с.Pavlov V.M., Dyatlov I.A. [Molecular Genetic Studies of Bacteria of the Genus Francisella and Their Applied Significance]. Moscow; 2012. 267 p.Iyer R., Williams C., Miller C. Arginine-agmatine antiporter in extreme acid resistance in Escherichia coli. J. Bacteriol. 2003; 185(22):6556–61. DOI: 10.1128/jb. 185.22.6556-6561.2003.Iyer R., Williams C., Miller C. Arginine-agmatine antiporter in extreme acid resistance in Escherichia coli. J. Bacteriol. 2003; 185(22):6556–61. DOI: 10.1128/jb. 185.22.6556-6561.2003.Гайский Н.А. Туляремийная вирус-вакцина. 2-е изд. Иркутск: Иркутское обл. изд-во; 1948. 111 с.Gaisky N.A. [Tularemia Virus Vaccine. 2nd ed]. Irkutsk: Irkutsk regional publishing house; 1948. 111 p.Sandström G. The Tularaemia vaccine. J. Chem. Tech. Biotechnol. 1994; 59(4):315–20. DOI: 10.1002/jctb.2805.Sandström G. The Tularaemia vaccine. J. Chem. Tech. Biotechnol. 1994; 59(4):315–20. DOI: 10.1002/jctb.2805.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.