microbeПроблемы особо опасных инфекцийProblems of Particularly Dangerous Infections0370-10692658-719XRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”10.21055/0370-1069-2026-1-158-164microbe-2296Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESОрганизация внешнего контроля качества исследований на чуму с использованием панелей шифрованных образцовOrganization of External Quality Control Testing for Plague Using Encrypted Sample Panelshttps://orcid.org/0000-0003-1026-2680СеничкинаА. М.SenichkinaM. A.

Сеничкина Айслу Мухамятовна

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

Aislu M. Senichkina

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

rusrapi@microbe.ruhttps://orcid.org/0000-0002-0037-3048ШароваИ. Н.SharovaI. N.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

rusrapi@microbe.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8334-9173ПортенкоС. А.PortenkoS. A.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

rusrapi@microbe.ruhttps://orcid.org/0000-0002-5416-6714БлиноваК. Д.BlinovaK. D.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

rusrapi@microbe.ruhttps://orcid.org/0009-0008-2029-0646КорешковаО. А.KoreshkovaO. A.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

rusrapi@microbe.ruhttps://orcid.org/0000-0001-9600-3801СмолинаА. П.SmolinaA. P.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

rusrapi@microbe.ruhttps://orcid.org/0000-0003-1143-4069ЩербаковаС. А.ShcherbakovaS. A.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

rusrapi@microbe.ruhttps://orcid.org/0000-0003-3788-3452КутыревВ. В.KutyrevV. V.

410005, Саратов, ул. Университетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005

rusrapi@microbe.ruРоссийский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»РоссияRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”Russian Federation20263003202601158164Copyright © Сеничкина А.М., Шарова И.Н., Портенко С.А., Блинова К.Д., Корешкова О.А., Смолина А.П., Щербакова С.А., Кутырев В.В., 20262026Сеничкина А.М., Шарова И.Н., Портенко С.А., Блинова К.Д., Корешкова О.А., Смолина А.П., Щербакова С.А., Кутырев В.В.Senichkina M.A., Sharova I.N., Portenko S.A., Blinova K.D., Koreshkova O.A., Smolina A.P., Shcherbakova S.A., Kutyrev V.V.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.microbe.ru/jour/article/view/2296

Цель работы – оценка результатов внешнего контроля качества исследований молекулярно-генетическим и иммунологическим методами на чуму в лабораториях противочумных учреждений с использованием шифрованных панелей. Материалы и методы. Участниками внешнего контроля качества являлись 19 противочумных учреждений. Оценивалось качество исследований, выполненных методами полимеразной цепной реакции (ПЦР) и флуоресцирующих антител (МФА), с использованием шифрованных панелей, которые содержали следующие образцы: для контроля исследований методом ПЦР – высушенные препараты ДНК Yersinia pestis EV НИИЭГ («положительные» образцы) и ДНК Yersinia pseudotuberculosis, Escherichia coli в концентрации не менее 1 нг, 15 % раствор сахарозы («отрицательные» пробы); для контроля индикации чумы с помощью МФА – фиксированные мазки штаммов тех же возбудителей (Y. pestis EV НИИЭГ, Y. pseudotuberculosis и E. coli) в концентрациях 1·106 м.к./мл. Результаты и обсуждение. Анализ результатов внешнего контроля качества деятельности лабораторий противочумных учреждений проведен за период с 2011 по 2025 г. Число ложноположительных проб при исследовании МФА составило 0,7 %, ложноотрицательных – 0,47 %; при индикации методом ПЦР количество ложноположительных случаев составило 1,27 %, ложноотрицательных – 0,36 %. Проведенный анализ позволил установить возможные ошибки при проведении исследований по индикации возбудителя чумы в лабораториях противочумных учреждений и пути их устранения. Для исключения возможных ошибок и недопущения получения неудовлетворительных результатов в лабораториях целесообразно осуществлять внутрилабораторный контроль качества исследований, своевременную закупку диагностических препаратов, оснащение необходимым оборудованием, соблюдать рекомендации производителей тест-систем в части использования адаптированных к методике приборов, подтверждать квалификацию персонала. Проведение процедуры внешнего контроля качества на чуму в противочумных учреждениях с применением шифрованных панелей образцов Y. pestis, имитирующих реальные биологические пробы, позволяет эффективно осуществлять контроль индикации возбудителя чумы, обеспечить качество лабораторных исследований и гарантировать достоверность получаемых результатов.

The aim of the work was to evaluate the results of external quality control of molecular-genetic and immunological testing for plague in anti-plague laboratories using encrypted control panels. Materials and methods. A total of 19 anti-plague institutions participated in the external quality control program. The quality of laboratory testing was assessed using polymerase chain reaction (PCR) and fluorescent antibody method (FAM) with encrypted panels, in which the composition of samples was unknown to the participating laboratories. The PCR panels contained dried DNA preparations of Yersinia pestis EV NIIEG strain as positive samples, as well as DNA of Yersinia pseudotuberculosis and Escherichia coli at concentrations of at least 1 ng and a 15 % sucrose solution as negative samples. For assessment of plague detection applying fluorescent antibody method, fixed smears of the same microorganisms (Y. pestis EV NIIEG, Y. pseudotuberculosis and E. coli) were used at concentrations of 1·106 microbial cells per milliliter. Results and discussion. The analysis of external quality control results obtained from anti-plague laboratories was performed over the period of 2011–2025. The proportion of false-positive results obtained through FAM was 0.7 %, while false-negative results accounted for 0.47 %. In PCR-based detection, false-positive results accounted for 1.27 % and false-negative results for 0.36%. The analysis made it possible to identify potential sources of analytical errors in plague detection and to determine measures aimed at their elimination. To prevent erroneous results, it is necessary to implement internal quality control procedures, ensure timely procurement of diagnostic reagents, maintain proper condition of laboratory equipment, strictly follow manufacturers’ recommendations regarding the use of validated instruments, and regularly confirm personnel qualifications. External quality control of plague diagnostics in anti-plague institutions using encrypted panels containing Y. pestis samples that simulate real biological samples is an effective tool for monitoring laboratory performance, ensuring the quality of laboratory testing, and maintaining the reliability of diagnostic results.

внешний контроль качествашифрованные образцыконтрольные панелиПЦРМФАиндикация Y. Pestisexternal quality controlencrypted samplescontrol panelsPCRfluorescent antibody methodYersinia pestis detectionАвторы заявляют об отсутствии дополнительного финансирования при проведении данного исследованияThe authors declare no additional financial support for this studyReferencesWang L.N., Wu J.M., Deng W., Shen Z.Y., Chen W.X., Li J.M. Lyophilized standards for the calibration of real time PCR assay for hepatitis C virus RNA. Chin. Med. J. (Engl.) 2006; 119(22): 1910–14.Wang L.N., Wu J.M., Deng W., Shen Z.Y., Chen W.X., Li J.M. Lyophilized standards for the calibration of real time PCR assay for hepatitis C virus RNA. Chin. Med. J. (Engl.) 2006; 119(22): 1910–14.Neumaier M. 11. European quality assessment networks in molecular diagnostics. EJIFCC. 2008; 19(1):75–8.Neumaier M. 11. European quality assessment networks in molecular diagnostics. EJIFCC. 2008; 19(1):75–8.Терещенко А.Г., Пикула Н.П. Внутрилабораторный контроль качества результатов химического анализа. Томск: STT; 2017. 266 с.Tereshchenko A.G., Pikula N.P. [Internal Laboratory Quality Control of Chemical Analysis Results]. Tomsk: STT Publ.; 2017. 266 p.Семёнов С.Ю., Стерликов А.В., Тананыкин Н.И., Колбутова К.Б., Куриленко Ю.В., Воронков А.В. Внешний контроль качества исследований в испытательных лабораториях при проведении прямых измерений. Медицина экстремальных ситуаций. 2018; 20(2):223–31.Semenov S.Yu., Sterlikov A.V., Tananykin N.I., Kolbutova K.B., Kurilenko Yu.V., Voronkov A.V. [External control of the research quality in testing laboratories in performing direct measurements]. Meditsina Ekstremal’nykh Situatsij [Extreme Medicine]. 2018; 20(2):223–31.Кушнарев В.А., Кудайбергенова А.Г., Завалишина Л.Э. Применение внутрилабораторного и внешнего контроля качества иммуногистохимических исследований для улучшения выявления рецепторов эстрогенов и прогестеронов. Архив патологии. 2021; 83(2):5–9. DOI: 10.17116/patol2021830215.Kushnarev V.A., Kudaybergenova A.G., Zavalishina L.E. [The use of intralaboratory and external quality control of immunohistochemical studies to improve the detection of estrogen and progesterone receptors]. Arkhiv Patologii [Pathology Archive]. 2021; 83(2):5–9. DOI: 10.17116/patol2021830215.Zhang Yo., Wang X., Niu C., Wang D., Shen Q., Gao Y., Zhou H., Zhang Yu., Zhang Ya., Dong L. Evaluation of factors contributing to variability of qualitative and quantitative proficiency testing for SARS-CoV-2 nucleic acid detection. Biosaf. Health. 2022; 4(5):321–9. DOI: 10.1016/j.bsheal.2022.08.004.Zhang Yo., Wang X., Niu C., Wang D., Shen Q., Gao Y., Zhou H., Zhang Yu., Zhang Ya., Dong L. Evaluation of factors contributing to variability of qualitative and quantitative proficiency testing for SARS-CoV-2 nucleic acid detection. Biosaf. Health. 2022; 4(5):321–9. DOI: 10.1016/j.bsheal.2022.08.004.Делий И.В., Сизиков В.В., Безуглова Л.В. Опыт участия 6 клинико-диагностических лабораторий учреждений службы крови РФ в программе межлабораторных сличений «Вместе» (выявление HBsAg, анти-ВГС). В кн.: Материалы XXVII Всероссийской научно-практической конференции с международным участием. Клиническая лаборатория: вклад в борьбу с пандемией: сборник тезисов. М.; 2022. С. 41–2. [Электронный ресурс]. URL: https://pureportal.spbu.ru/files/107029858/2022_.pdf.Deliy I.V., Sizikov V.V., Bezuglova L.V. [Experience of 6 clinical diagnostic laboratories of blood service institutions of the Russian Federation in participation in the program of interlaboratory comparisons “Together” (detection of HBsAg, anti-HCV)]. In: [Materials of the XXVII All-Russian Scientific and Practical Conference with International Participation. Clinical Laboratory: Contribution to the Fight against the Pandemic: Collection of Abstracts]. Moscow; 2022. P. 41–2. [Internet]. Available from: https://pureportal.spbu.ru/files/107029858/2022_.pdf.Мезенцева Н.И., Лаптев С.В. Разработка программы и организация внешнего контроля качества ПЦР-диагностики COVID-19. В кн.: Акимкин В.Г., Творогова М.Г., редакторы. Молекулярная диагностика и биобезопасность – 2020. Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием (6–8 октября 2020 года): сборник материалов. М.: ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора; 2020. С. 155–6. DOI: 10.36233/978-5-9900432-9-9-155.Mezentseva N.I., Laptev S.V. [Program development and organization of external quality control over COVID-19 PCR diagnostics]. In: [Akimkin V.G., Tvorogova M.G., editors. Molecular Diagnostics and Biosafety – 2020. All-Russian Scientific and Practical Conference with International Participation (October, 6–8; 2020): Conference Proceedings]. Moscow: Central Research Institute of Epidemiology; 2020. P. 155–6. DOI: 10.36233/978-5-9900432-99-155.Мезенцева Н.И., Лаптев С.В. Внешняя оценка качества ПЦР-выявления РНК SARS-CoV-2 в период пандемии. В кн.: Материалы XXVII Всероссийской научно-практической конференции с международным участием. Клиническая лаборатория: Вклад в борьбу с пандемией: сборник тезисов. М.; 2022. С. 89–90. [Электронный ресурс]. URL: https://pureportal.spbu.ru/files/107029858/2022_.pdf.Mezentseva N.I., Laptev S.V. [External quality assessment of PCR detection of SARS-CoV-2 RNA during a pandemic]. In: [Proceedings of the XXVII All-Russian Scientific and Practical Conference with International Participation. Clinical Laboratory: Contribution to the Fight against the Pandemic]. Moscow; 2022. P. 89–90. [Internet]. Available from: https://pureportal.spbu.ru/files/107029858/2022.pdf.Жумамуродов С.Т., Ёдгорова Н.Т., Орынбаева З.Н. Оценка качества ПЦР исследований с использованием метода «сухая пробирка». В кн.: Фундаментальные и практические вопросы иммунологии и инфектологии: сборник научных статей участников Международной научно-практической конференции (г. Уфа, 3–5 октября 2018 г.). Уфа: НИЦ «НИКА»; 2018. Т. 1. С. 130–7.Zhumamurodov S.T., Edgorova N.T., Orynbaeva Z.N. Evaluation of the quality of PCR studies using the “dry tube” method. In: [Fundamental and Practical Aspects of Immunology and Infectology: Digest of Scientific Papers of the Participants of International Scientific and Practical Conference (Ufa, October 3–5, 2018) Ufa: RC “NIKA”; 2018. Vol. 1. P. 130–7.Schirm J., van Loon A.M., Valentine-Thon E., Klapper P.E., Reid J., Cleator G.M. External quality assessment program for qualitative and quantitative detection of hepatitis C virus RNA in diagnostic virology. J. Clin. Microbiol. 2002; 40(8):2973–80. DOI: 10.1128/JCM.40.8.2973-2980.2002.Schirm J., van Loon A.M., Valentine-Thon E., Klapper P.E., Reid J., Cleator G.M. External quality assessment program for qualitative and quantitative detection of hepatitis C virus RNA in diagnostic virology. J. Clin. Microbiol. 2002; 40(8):2973–80. DOI: 10.1128/JCM.40.8.2973-2980.2002.Pembrey L., Newell M.L., Tovo P.A., van Drimmelen H., Quinti I., Furlini G., Galli S., Meliconi M.G., Burns S., Hallam N., Sönnerborg A., Cilla G., Serrano E., Laccetti P., Portella G., Polywka S., Icardi G., Bruzzone B., Balbo L., Alfarano A.; European Paediatric Hepatitis C Virus Network. Inter-laboratory comparison of HCV-RNA assay results: implications for multi-centre research. J. Med. Virol. 2003; 69(2):195–201. DOI: 10.1002/jmv.10283.Pembrey L., Newell M.L., Tovo P.A., van Drimmelen H., Quinti I., Furlini G., Galli S., Meliconi M.G., Burns S., Hallam N., Sönnerborg A., Cilla G., Serrano E., Laccetti P., Portella G., Polywka S., Icardi G., Bruzzone B., Balbo L., Alfarano A.; European Paediatric Hepatitis C Virus Network. Inter-laboratory comparison of HCV-RNA assay results: implications for multi-centre research. J. Med. Virol. 2003; 69(2):195–201. DOI: 10.1002/jmv.10283.Preiksaitis J.K., Pang X.L., Fox J.D., Fenton J.M., Caliendo A.M., Miller G.G. Interlaboratory comparison of Epstein-Barr virus viral load assays. Am. J. Transplant. 2009; 9(2):269–79. DOI: 10.1111/j.1600-6143.2008.02514.x.Preiksaitis J.K., Pang X.L., Fox J.D., Fenton J.M., Caliendo A.M., Miller G.G. Interlaboratory comparison of Epstein-Barr virus viral load assays. Am. J. Transplant. 2009; 9(2):269–79. DOI: 10.1111/j.1600-6143.2008.02514.x.Тымчук С.Н., Ларин В.Е., Карташова А.В. МСИ водных образцов по бактериологическим показателям. Контроль качества продукции. 2020; (7):58–62.Tymchuk S.N., Larin V.E., Kartashova A.V. [Interlaboratory comparisons of water samples by bacteriological indicators]. Kontrol’ Kachestva Produktsii [Product Quality Control]. 2020; (7):58–62.Мезенцева Н.И., Лаптев С.В. Разработка программ межлабораторных сличительных испытаний и организация внешней оценки качества ПЦР-диагностики COVID-19. Справочник заведующего КДЛ. 2020; (12):6–10.Mezentseva N.I., Laptev S.V. [Development of interlaboratory comparison testing programs and organization of external quality assessment of PCR diagnostics of COVID-19]. Spravochnik Zaveduyushchego KDL [Handbook of the Head of CDL]. 2020; (12):6–10.Карташова А.В., Чамаев А.В., Прокошина Н.Ю. Участие в МСИ – независимое подтверждение компетентности лаборатории. Методы оценки соответствия. 2012; (12):5–9.Kartashova A.V., Chamaev A.V., Prokoshina N.Yu. [Participation in the ILC is an independent confirmation of the laboratory’s competence]. Metody Otsenki Sootvetstviya [Methods of Conformity Assessment]. 2012; (12):5–9.Карташова А.В., Халиков М.Р. МСИ как критерий аккредитации. Контроль качества продукции. 2015; (1):27–30.Kartashova A.V., Khalikov M.R. [Interlaboratory comparative tests as an accreditation criterion]. Kontrol’ Kachestva Produktsii [Product Quality Control]. 2015; (1):27–30.Лаврова Н. Все аспекты деятельности испытательной лаборатории. Практическое пособие. М.; 2021. 556 с. ISBN 978-5-0053-0895-5.Lavrova N. [All Aspects of the Testing Laboratory Activities. Practice Guidelines]. Moscow; 2021. 556 p. ISBN 978-5-0053-0895-5.Сеничкина А.М., Портенко С.А., Шарова И.Н., Корешкова О.А., Блинова К.Д., Осина Н.А., Малюкова Т.А. Конструирование панелей шифрованных образцов для подготовки специалистов Роспотребнадзора и валидации новых методик в лабораториях. Здоровье населения и среда обитания. 2025; 33(3):17–24. DOI: 10.35627/2219-5238/2025-33-3-17-24.Senichkina A.M., Portenko S.A., Sharova I.N., Koreshkova O.A., Blinova K.D., Osina N.A., Malyukova T.A. [Development of coded sample panels for training of Rospotrebnadzor specialists and validation of new laboratory techniques]. Zdorovie Naseleniya i Sreda Obitaniya [Public Health and Life Environment]. 2025; 33(3):17–24. DOI: 10.35627/2219-5238/2025-33-3-17-24.Карташова А.В., Прокошина Н.Ю., Халиков М.Р. Межлабораторные сравнительные испытания – внешний контроль качества работы лаборатории. Контроль качества продукции. 2018; (9):36–9.Kartashova A.V., Prokoshina N.Yu., Khalikov M.R. [Interlaboratory comparative tests – external quality control of laboratory work]. Kontrol’ Kachestva Produktsii [Product Quality Control]. 2018; (9):36–9.Карташова А.В., Тропынина Л.В. Опыт проведения межлабораторных сравнительных испытаний: обеспечение сопоставимости результатов анализа. Аналитика. 2022; 12(4):262–5.Kartashova A.V., Tropynina L.V. [The experience of conducting interlaboratory comparative tests: ensuring comparability of analysis results]. Analitika [Analytics]. 2022; 12(4):262–5.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.