microbeПроблемы особо опасных инфекцийProblems of Particularly Dangerous Infections0370-10692658-719XRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”10.21055/0370-1069-2015-2-75-78microbe-231Research ArticleБИОТЕХНОЛОГИЯ, ИММУНОЛОГИЯBIOTECHNOLOGY, IMMUNOLOGYЯдрышковый аппарат лимфоцитов как индикатор функциональной активности лимфоидных органов при доклинической оценке вакцинNucleolar Apparatus of Lymphocytes as an Indicator of Lymphoid Organs’ Functional Activity in the Context of Pre-Clinical Vaccine EvaluationБугорковаС. А.BugorkovaS. A.rusrapi@microbe.ruЩуковскаяТ. Н.ShchukovskayaT. N.rusrapi@microbe.ruКурылинаА. Ф.KurylinaA. F.rusrapi@microbe.ruРоссийский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»РоссияRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”Russian Federation201520062015027578Copyright © Бугоркова С.А., Щуковская Т.Н., Курылина А.Ф., 20152015Бугоркова С.А., Щуковская Т.Н., Курылина А.Ф.Bugorkova S.A., Shchukovskaya T.N., Kurylina A.F.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.microbe.ru/jour/article/view/231

Изучено состояние ядрышкового аппарата лимфоцитов периферических лимфоидных органов лабораторных животных, иммунизированных против чумы и туляремии, для оценки прогностических возможностей применения этого параметра на этапах доклинической характеристики разрабатываемых вакцин против особо опасных инфекций. Для выявления активности аффинных к серебру белков в области ядрышкового организатора (AgNOR) полутонкие парафиновые срезы лимфоидных органов иммунизированных мышей линии BALB/c окрашивали по методу W.M.Howell и D.A.Black [10] с использованием готового набора реактивов фирмы BioVitrum. Установлено увеличение доли клеток с тремя и более AgNOR-позитивными ядрышками в ядрах лимфоцитов периферических органов иммунной системы биомоделей при оценке функционального состояния органов иммуногенеза у иммунизированных против чумы и туляремии животных, что косвенно отражает пролиферативный потенциал в клеточном звене иммунитета. Информативность количественной оценки пролиферативной активности клеток по изменению состояния AgNOR в ядрах лимфоцитов органов иммуногенеза позволяет рассматривать возможность включения этого метода в существующую схему морфологической оценки качества вакцин на доклиническом этапе.

Studied has been the state of the nucleolar apparatus in lymphocytes of periphery lymphoid organs in laboratory animals vaccinated against plague and tularemia in order to evaluate predictive capability of the parameter in the context of pre-clinical evaluation of the vaccines under development, against particularly dangerous infections. For the detection of silver adjoining proteins, contained in the nucleolar organizer region (AgNOR), W.M.Howell and D.A.Black staining of semi-thin paraffin sections of lymphoid organs of the immunized BALB/c mice has been performed. For this purpose, ready-assembled panel, manufactured at BioVirtum, has been deployed. Under assessment of the functional state of immunogenesis organs in vaccinated against plague and tularemia animals revealed has been the increase in numbers of cells with three and more AgNOR-positive nucleoli in the nucleus of the lymphocytes of periphery organs of the biomodels’ immune system. It indirectly manifests proliferative capacity of immune system cellular component. Informativity of the quantitative evaluation of the cell proliferative activity by the reference to the status changes of AgNOR in the nuclei of immunogenesis organs’ lymphocytes makes it possible to entertain the possibility of introducing this method into the existing morphological vaccine quality assessment scheme at the stage of the pre-clinical trials.

периферические лимфоидные органылимфоцитывакцинные штаммыAgNORособо опасные инфекцииperiphery lymphoid organslymphocytesvaccine strainsparticularly dangerous infectionsReferencesБобров И.П., Авдалян А.М., Лазарев А.Ф., Климачев В.В., Климачева Т.Б., Мищенко Е.В. Морфофункциональная характеристика белков областей ядрышковых организаторов при гладкомышечных опухолях матки. Арх. патол. 2008; 70(3):18-23.Bobrov I.P., Avdalyan A.M., Lazarev A.F., Klimachev V.V., Klimacheva T.B., Mishchenko E.V. [Morphological-functional characteristics of nucleolar organizer region proteins in case of smooth muscle tumors of uterus]. Arkh. Patol. 2008; 70(3):18–23.Брюхин Г.В., Пашнина Е.Н. Готовность к пролиферации лимфоцитов селезенки потомства крыс при хронической патологии печени матери. Морфология. 2005; 2:56-61.Bryukhin G.V., Pashnina E.N. [Preparedness to splenic lymphocytes proliferation in the brood of female rat with chronic liver pathology]. Morfologiya. 2005; 2:56–61.Брюхин Г.В., Федосов А.А. Характеристика пролиферативной активности тимоцитов и лимфоцитов периферической крови потомства самок с хроническим экспериментальным поражением печени различной этиологии. Морфология. 2006; 129(1):57-9.Bryukhin G.V., Fedosov A.A. [Characteristics of proliferative activity of thymocytes and lymphocytes contained in periphery blood of brood from females with chronic experimental liver disorder of various etiology]. Morfologiya. 2006; 129(1):57–9.Коржевский Д.Э., Гиляров А.В. Основы гистологической техники. СПб.: ООО «Издательство СпецЛит»; 2010. 96 с.Korzhevsky D.E., Gilyarov A.V. [Fundamentals Principles of Histological Technique]. St. Petersburg: “SpetsLit Publishing House” Ltd.; 2010. 96 p.Попков П.Н., Чепайкина А.М., Рябинин В.Е. Состояние активности ядрышковых организаторов в гепатоцитах крыс после индукции цирроза печени четыреххлористым углеродом и в динамике его лечения. Мед. наука и образование Урала. 2008; 2:66-8.Popkov P.N., Chepaikina A.M., Ryabinin V.E. [The state of nucleolar organizers’ activity in hepatocytes of rats after liver cirrhosis induction using carbon tetrachloride and with the treatment progression]. Med. Nauka i Obrazovanie Urala. 2008; 2:66–8.Райхлин Н.Т., Букаева И.А., Пробатова Н.А., Смирнова Е.А. Аргирофильные белки областей ядрышковых организаторов - маркеры скорости клеточной пролиферации. Арх. патол. 2006; 68(3):47-51.Raikhlin N.T., Bukaeva I.A., Probatova N.A., Smirnova E.A. [Argyrophilic proteins of nucleolar organizer regions – markers of cell proliferation rate]. Arkh. Patol. 2006; 68(3):47–51.Хаитов Р.М. Иммунология. М.: ГЭОТАР-Медицина; 2006.311 с.Khaitov R.M. [Immunology]. M.: GZOTAR-Meditsina; 2006. 311 p.Чучкова Н.Н., Кормилина Н.В. Активность AgNOR’s лимфоцитов лимфатических узлов при формировании атеросклероза у крыс. Морфологические ведомости. 2010; 4:74-8.Chuchkova N.N., Kormilina N.V. [Activity of AgNOR’s lymphocytes of lymphatic glands in case of atherosclerosis development in rats]. Morfologich. Vedomosti. 2010; 4:74–8.Crocker J., Nar P. Nucleolar organizer regions in lymphomas. J. Pathol. 1987; 151:111-8.Crocker J., Nar P. Nucleolar organizer regions in lymphomas. J. Pathol. 1987; 151:111–8.Howell W.M., Black D.A. Controlled silver staining of nucleolus organizer regions with a protective colloidal developer: a one-step method. Experientia. 1980; 36:1014-5.Howell W.M., Black D.A. Controlled silver staining of nucleolus organizer regions with a protective colloidal developer: a one-step method. Experientia. 1980; 36:1014–5.Karki S., Jha A., Sayami G. The Role of Argyrophilic Nucleolar Organizer Region (AgNOR) Study in Cytological Evaluation of Fluids, Especially for Detection of Malignancy. Kathmandu Univ. Med. J. 2012; 10(37):44-7.Karki S., Jha A., Sayami G. The Role of Argyrophilic Nucleolar Organizer Region (AgNOR) Study in Cytological Evaluation of Fluids, Especially for Detection of Malignancy. Kathmandu Univ. Med. J. 2012; 10(37):44–7.Verсosa B.L.A., Borges A.C.J., Mendes F.J.M., Costa M.L.S., Pereira N.B., Melo M.N., Mendonсa I.L., Costa F.A.L., Vasconcelos A.C. Inflammatory response, parasite load and AgNOR expression in ear skin of symptomatic and asymptomatic Leishmania (Leishmania) chagasi infected dogs. J. Venom. Anim. Toxins incl. Trop. Dis. 2011; 17(3):308-17.Verсosa B.L.A., Borges A.C.J., Mendes F.J.M., Costa M.L.S., Pereira N.B., Melo M.N., Mendonсa I.L., Costa F.A.L., Vasconcelos A.C. Inflammatory response, parasite load and AgNOR expression in ear skin of symptomatic and asymptomatic Leishmania (Leishmania) chagasi infected dogs. J. Venom. Anim. Toxins incl. Trop. Dis. 2011; 17(3):308–17.Voit R., Schnapp A., Kuhn A., Rosenbauer H., Hirschmann P., Stunnenberg H.G., Grummt I. The nucleolar transcription factor mUBF is phosphorylated by casein kinase II in the C-terminal hyperacidic tail which is essential for transactivation. EMBO J. 1992; 11:2211-18.Voit R., Schnapp A., Kuhn A., Rosenbauer H., Hirschmann P., Stunnenberg H.G., Grummt I. The nucleolar transcription factor mUBF is phosphorylated by casein kinase II in the C-terminal hyperacidic tail which is essential for transactivation. EMBO J. 1992; 11:2211–18.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.