microbeПроблемы особо опасных инфекцийProblems of Particularly Dangerous Infections0370-10692658-719XRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”10.21055/0370-1069-2015-2-92-94microbe-235Research ArticleБИОТЕХНОЛОГИЯ, ИММУНОЛОГИЯBIOTECHNOLOGY, IMMUNOLOGYПолучение гибридом-продуцентов моноклональных антител к антигенам возбудителя туляремииManufacturing of Hybridomas-Producers of Monoclonal Anti-Bodies to Tularemia Agent AntigensФоменковО. О.FomenkovO. O.noemail@neicon.ruЕлагинГ. Д.ElaginG. D.noemail@neicon.ruКуклинаГ. В.KuklinaG. V.noemail@neicon.ruПеченкинД. В.PechenkinD. V.noemail@neicon.ruКрупинВ. В.KrupinV. V.noemail@neicon.ruБогачеваН. В.BogachevaN. V.noemail@neicon.ruКытмановА. А.KytmanovA. A.noemail@neicon.ruЕремкинА. В.EremkinA. V.noemail@neicon.ruТихвинскаяО. В.TikhvinskayaO. V.noemail@neicon.ruВахновЕ. Ю.VakhnovE. Yu.noemail@neicon.ruФилиал ФГБУ «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороныРоссияFilial Brunch of the 48th Central Research Institute of the Ministry of Defense of the Russian FederationRussian Federation201520062015029294Copyright © Фоменков О.О., Елагин Г.Д., Куклина Г.В., Печенкин Д.В., Крупин В.В., Богачева Н.В., Кытманов А.А., Еремкин А.В., Тихвинская О.В., Вахнов Е.Ю., 20152015Фоменков О.О., Елагин Г.Д., Куклина Г.В., Печенкин Д.В., Крупин В.В., Богачева Н.В., Кытманов А.А., Еремкин А.В., Тихвинская О.В., Вахнов Е.Ю.Fomenkov O.O., Elagin G.D., Kuklina G.V., Pechenkin D.V., Krupin V.V., Bogacheva N.V., Kytmanov A.A., Eremkin A.V., Tikhvinskaya O.V., Vakhnov E.Y.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.microbe.ru/jour/article/view/235

В ходе исследований было проведено два эксперимента по гибридизации клеток мышиной миеломы и лимфоцитов мышей линии ВALB/с, иммунизированных инактивированными микробными культурами Francisella tularensis . В результате были получены гибридомы-продуценты моноклональных антител (МКА), специфичных к антигенам возбудителя туляремии. Оценена перспективность применения их для выявления данного возбудителя методом иммуноферментного анализа. Установлено, что моноклональные антитела, продуцируемые гибридомами 31G1F10, 32E5D3, 35B11C8, 36C2F11, позволяют выявлять микробные клетки различных штаммов возбудителя туляремии в концентрации 0,5·106 м.к./см3 и не взаимодействуют с культурами гетерологичных микроорганизмов в концентрациях 1,0·108 м.к./см3, что свидетельствует об их специфичности. Планируется использовать полученные МКА в работе по созданию иммуноферментных и иммунохроматографических тест-систем, предназначенных для обнаружения возбудителя туляремии.

Carried out have been two experimental studies on hybridization of mouse myeloma cells and lymphocytes of BALB/c mice immunized with inactivated microbe Francisella tularensis cultures. As a result obtained have been hybridomas-producers of monoclonal antibodies (MAb) specific to the antigens of tularemia agent. Evaluated have been the prospects of its application for the detection of the agent under discussion using enzyme-linked immunoassay. Established is the fact that monoclonal antibodies produced by 31G1F10, 32E5D3, 35B11C8, 36C2F11 hybridomas make it possible to identify microbe cells of various tularemia agent strains when concentrated up to 0.5·106 mc/sm3, and do not interact with cultures of heterologous microorganisms when concentrated to 1.0·108 mc/sm3, which testifies to their specificity. These MAb are planned to be used for the construction of immune-enzyme and immune-chromatographic test-systems designed for tularemia agent detection.

туляремиямоноклональные антителаиммуноферментный анализиммунодиагностикаtularemiamonoclonal antibodiesenzyme-linked immunoassayimmune-diagnosticsReferencesБезсмертный В.Е., Горшенко В.В., Попов В.П. К оценке эпидемической и эпизоотической ситуации по туляремии в Российской Федерации. Пробл. особо опасных инф. 2008; 2(96):8-12.Bezsmertny V.E., Gorshenko V.V., Popov V.P. [On the assessment of tularemia epidemic and epizootic situation in the Russian Federation]. Probl. Osobo Opasn. Infek. 2008; 2(96):8–12.Никифоров В.В., Кареткина Г.Н. Туляремия: от открытия до наших дней. Инф. болезни. 2007; 5(1):67-76.Nikiforov V.V., Karetkina G.N. [Tularemia: since the discovery to the present day]. Infek. Bol. 2007; 5(1):67–76.Сырова Н.А., Терешкина Н.Е., Девдариани З.Л. Современное состояние иммунодиагностики туляремии. Пробл. особо опасных инф. 2008; 3(97):12-5.Syrova N.A., Tereshkina N.E., Devdariani Z.L. [Current state of tularemia immuno-diagnostics]. Probl. Osobo Opasn. Infek. 2008; 3(97):12–5.Терешкина Н.Е., Терехова И.В., Сырова Н.А., Девдариани З.Л., Ляшова О.Ю., Григорьева Г.В., Любовикова О.А., Шульгина И.В., Иваненко И.Л., Захарова Н.Б., Безрукова Г.А., Спирин В.Ф. Конструирование и медицинские испытания моноклональной дот-иммуноферментной тест-системы для детекции туляремийного микроба «ДИАТул-М». Пробл. особо опасных инф. 2013; 2:42-5.Tereshkina N.E., Terekhova I.V., Syrova N.A., Devdariani Z.L., Lyashova O.Yu., Grigor’eva G.V., Lobovikova O.A., Shul’gina I.V., Ivanenko I.L., Zakharova N.B., Bezrukova G.A., Spirin V.F. [Constructing and medical trials of a monoclonal dot-immuno-enzyme test-system “DIATul-M” for tularemia microbe detection]. Probl. Osobo Opasn. Infek. 2013; 2:42–5.Fazekas De St., Groth S., Scheidegger D. Production of monoclonal antibodies: strategy and tactics. J. Immunol. Meth. 1980; 35:1-21.Fazekas De St., Groth S., Scheidegger D. Production of monoclonal antibodies: strategy and tactics. J. Immunol. Meth. 1980; 35:1–21.Hauri A.M., Hofstetter I.,Seibold E., Kaysser P., Eckert J., Neubauer H., Splettstoesser W.D., Investigating an airborne tularemia outbreak, Germany. Emerg. Infect. Dis. 2010; 16:238-43.Hauri A.M., Hofstetter I.,Seibold E., Kaysser P., Eckert J., Neubauer H., Splettstoesser W.D., Investigating an airborne tularemia outbreak, Germany. Emerg. Infect. Dis. 2010; 16:238–43.Kohler G., Milstein C. Continuous culture of fused cells secreting antibody of predefined specificity. Nature. 1975; 256(5517):495-7.Kohler G., Milstein C. Continuous culture of fused cells secreting antibody of predefined specificity. Nature. 1975; 256(5517):495–7.Willke A., Meric M., Granow R., Sayan M. An outbreak of oropharyngeal tularaemia linked to natural spring water. J. Med. Microbiol. 2009; 1:112-16.Willke A., Meric M., Granow R., Sayan M. An outbreak of oropharyngeal tularaemia linked to natural spring water. J. Med. Microbiol. 2009; 1:112–16.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.