microbeПроблемы особо опасных инфекцийProblems of Particularly Dangerous Infections0370-10692658-719XRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”10.21055/0370-1069-2015-4-91-95microbe-273Research ArticleМИКРОБИОЛОГИЯMICROBIOLOGYХарактеристика фенотипических и генетических свойств вакцинного штамма Francisella tularensis 15 НИИЭГ с длительными сроками храненияCharacteristics of Phenotypic and Genetic Properties of Francisella tularensis 15 NIIEG Vaccine Strain with an Extended Storage PeriodСоловьевЕ. А.Solov’EvE. A.Sayapina@xpmed.ruСаяпинаЛ. В.SayapinaL. V.Sayapina@xpmed.ruОсинаН. А.OsinaN. A.rusrapi@microbe.ruДавыдовД. С.DavydovD. S.Sayapina@xpmed.ruБондаревВ. П.BondarevV. P.Sayapina@xpmed.ruНаучный центр экспертизы средств медицинского примененияРоссияScientific Center on Expertise of Medical Application ProductsRussian FederationРоссийский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»РоссияRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”Russian Federation201520122015049195Copyright © Соловьев Е.А., Саяпина Л.В., Осина Н.А., Давыдов Д.С., Бондарев В.П., 20152015Соловьев Е.А., Саяпина Л.В., Осина Н.А., Давыдов Д.С., Бондарев В.П.Solov’Ev E.A., Sayapina L.V., Osina N.A., Davydov D.S., Bondarev V.P.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.microbe.ru/jour/article/view/273

Изучены культурально-морфологические, биохимические и генетические свойства лиофилизированных культур вакцинного штамма F. tularensis 15 НИИЭГ, наработанных в течение 60 лет и депонированых в Государственной коллекции патогенных микроорганизмов ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России. Проведенные исследования показали, что хранение штаммов в лиофилизированном состоянии при пониженной температуре не в полной мере предохраняет их от изменения генетических и фенотипических свойств. Установлено, что штамм F. tularensis 15 НИИЭГ1953, 1966, 1969, 2003 и 2012 гг. высушивания при культивировании на питательной среде Ft-агар с добавлением крови и без нее по степени диссоциации (87-99 %) SR-колоний сохранял свои иммуногенные свойства. При этом штамм 1990 г. содержал нормированное количество (не менее 80 %) иммуногенных колоний на питательной среде с добавлением крови и не соответствовал требованиям без крови. Выявленное снижение от 70 до 75 % SR-колоний у штамма 1987 г. при культивировании с добавлением крови и без нее свидетельствует о снижении его иммуногенных свойств. По данным RAPD и ERIC типирования, показана высокая стабильность генома лиофилизированных в разные годы культур F. tularensis 15 НИИЭГ. Вакцинный штамм туляремийного микроба имеет уникальные RAPD и ERIC профили, незначительное изменение которых отмечено при хранении субкультуры патогена в высушенном состоянии.

Investigated have been cultural-morphological, biochemical and genetic properties of lyophilized cultures of F. tularensis 15 NIIEG vaccine strain, accumulated within 60-years term and deposited at the State Collection of Pathogenic Microorganisms of Scientific Center on Expertise of Medical Application Products. The studies undertaken have demonstrated that storing of the strains in such a form at low temperatures, does not prevent changes of their genetic and phenotypic properties to the full extent. It is established that F. tularensis 15 NIIEG strain lyophilized in 1953, 1966, 1969, 2003 and 2012 maintains its immunogenic properties when cultivated on nutrient media Ft-agar with or without addition of blood, based on dissociation rates (87-99 %) of SR-colonies. While F. tularensis 15 NIIEG strain 1990 contains specified amounts (not less than 80 %) of immunogenic colonies if cultivated on nutrient media with the addition of blood, and fails to meet the requirements - if cultivated without. Identified in F. tularensis 15 NIIEG strain 1987 SR-colony decrement of 70-75 % in case of cultivation with or without addition of blood testifies to the deterioration of its immunogenic properties. RAPD and ERIC typing has showed high stability of the genome of F. tularensis 15 NIIEG cultures lyophilized at different times. Tularemia microbe vaccine strain has unique RAPD and ERIC profiles, insignificant alteration of which is observed upon storage of pathogen subculture in the dried from.

вакцинный штамм Francisella tularensis 15 НИИЭГкультурально-морфологическиебиохимические и генетические свойствадиссоциацияF tularensis 15 NIIEG vaccine straincultural-morphologicalbiochemical and genetic propertiesdissociationReferencesКисличкин Н.Н., Кисличкина О.И. Живая туляремийная вакцина Nik-sp. Francisella tularensis. Патент РФ № 2308969, опубл. 27.10.2007.Kislichkin N.N., Kislichkina O.I. [Live tularemia vaccine Nik-sp. Francisella tularensis]. RF Patent 2308969. 27.10.2007.Мещерякова И.С. Туляремия: современная эпидемиология и вакцинопрофилактика (к 80-летию создания первой туляремийной лаборатории в России. Эпидемиол. и вакцинопрофилакт. 2010; 2:17-22.Meshcheryakova I.S. [Tularemia: modern epidemiology and preventive vaccination (To the 80th Anniversary since the first tularemia laboratory foundation in Russia]. Epidemiol. Vaktsinoprof. 2010; 2:17–22.Никифоров В.В., Кареткина Г.Н. Туляремия: от открытия до наших дней. Инф. бол. 2007:5(1):67-76.Nikiforov V.V., Karetkina G.N. [Tularemia: since the discovery up to the present day]. Infek. Bol. 2007; 5(1):67–76.Олсуфьев Н.Г. Туляремия. М.; 1960. 459 с.Olsuf’ev N.G. [Tularemia]. M.; 1960. 459 p.Саяпина Л.В., Соловьев Е.А., Горяев А.А., Бондарев В.П. Изучение иммунобиологических свойств вакцинного штамма Francisella tularensis 15 НИИЭГ в условиях длительного хранения. Пробл. особо опасных инф. 2015; 2:87-91.Sayapina L.V., Solov’ev E.A., Goryaev A.A., Bondarev V.P. [Studies of immunobiological properties in Francisella tularensis vaccine strain 15 NIIEG under extended storage conditions]. Probl. Osobo Opasn. Infek. 2015; 2:87–91.Сиротюк Л.В. Биологические свойства туляремийных вакцинных штаммов НИИЭГ. Журн. микробиол., эпидемиол и иммунобиол. 1964; 10:116-20.Sirotyuk L.V. [Biological properties of tularemia vaccine strains NIIEG]. Zh. Mikrobiol. Epidemiol. Immunobiol. 1964; 10:116–20.Транквилевский Д.В., Удовиков А.И., Попов В.П., Захаров К.С., Попов Н.В., Безсмертный В.Е. Состояние численности грызунов и эпидемиологическая обстановка по туляремии на территории Российской Федерации во втором полугодии 2014 г. и прогноз на 2015 г. Пробл. особо опасных инф. 2015: 1:30-5.Trankvilevsky D.V., Udovikov A.I., Popov V.P., Zakharov K.S., Popov N.V., Bezsmertny V.E. [Situation on rodents abundance and epidemiological situation on tularemia in the territory of the Russian Federation in the second half of 2014, and prognosis for 2015]. Probl. Osobo Opasn. Infek. 2015; 1:30–5.Ellis J., Oyston P.C.F., Green M., Titball R.W. Tularemia. Clin. Microbiol. Rev. 2002; 15(40):631-46.Ellis J., Oyston P.C.F., Green M., Titball R.W. Tularemia. Clin. Microbiol. Rev. 2002; 15(40):631–46.Cole L.E., Elkins K.L., Michalek S.M., Qureshi N., Eaton L.J., Rallabhandi P., Cuesta N., Vogel, S.N. Immunologic consequences of Francisella tularensis live vaccine strain infection: role of the innate immune response in infection and immunity. J. Immunol. 2006; 176:6888-99.Cole L.E., Elkins K.L., Michalek S.M., Qureshi N., Eaton L.J., Rallabhandi P., Cuesta N., Vogel, S.N. Immunologic consequences of Francisella tularensis live vaccine strain infection: role of the innate immune response in infection and immunity. J. Immunol. 2006; 176:6888–99.de la Puente-Redondo V.A., del Blanco N.G., Gutiérrez-Martín C.B., García-Peña F.J., Rodríguez Ferri E.F. Comparison of different PCR approaches for typing of Francisella tularensis strains. J. Clin. Microbiol. 2000; 38(3):1016-22.de la Puente-Redondo V.A., del Blanco N.G., Gutiérrez-Martín C.B., García-Peña F.J., Rodríguez Ferri E.F. Comparison of different PCR approaches for typing of Francisella tularensis strains. J. Clin. Microbiol. 2000; 38(3):1016–22.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.