microbeПроблемы особо опасных инфекцийProblems of Particularly Dangerous Infections0370-10692658-719XRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”10.21055/0370-1069-2016-3-85-89microbe-333Research ArticleБИОТЕХНОЛОГИЯ, ИММУНОЛОГИЯBIOTECHNOLOGY, IMMUNOLOGYКонструирование и медицинские испытания моноклональной иммуноферментной тест-системы для выявления капсулосодержащих штаммов чумного микроба «ИФА ПестФ1-М»Construction and Medical Trials of Monoclonal Immuno-Enzyme Test-System for the Detection of Encapsulated Plague Agent Strains, “EIAPESTF1-M”ДевдарианиЗ. Л.DevdarianiZ. L.

Российская Федерация, 410005, Саратов, ул. У ниверситетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005, Russian Federation

rusrapi@microbe.ruСыроваН. А.SyrovaN. A.

Российская Федерация, 410005, Саратов, ул. У ниверситетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005, Russian Federation

МихееваЕ. А.MikheevaE. A.

Российская Федерация, 410005, Саратов, ул. У ниверситетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005, Russian Federation

ТереховаИ. В.TerekhovaI. V.

Российская Федерация, 410005, Саратов, ул. У ниверситетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005, Russian Federation

ЕрмаковН. М.ErmakovN. M.

Российская Федерация, 410005, Саратов, ул. У ниверситетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005, Russian Federation

ГригорьеваГ. В.Grigor’evaG. V.

Российская Федерация, 410005, Саратов, ул. У ниверситетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005, Russian Federation

ЛобовиковаО. А.LobovikovaO. A.

Российская Федерация, 410005, Саратов, ул. У ниверситетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005, Russian Federation

ШульгинаИ. В.Shul’ginaI. V.

Российская Федерация, 410005, Саратов, ул. У ниверситетская, 46

46, Universitetskaya St., Saratov, 410005, Russian Federation

Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»РоссияRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”Russian Federation201620092016038589Copyright © Девдариани З.Л., Сырова Н.А., Михеева Е.А., Терехова И.В., Ермаков Н.М., Григорьева Г.В., Лобовикова О.А., Шульгина И.В., 20162016Девдариани З.Л., Сырова Н.А., Михеева Е.А., Терехова И.В., Ермаков Н.М., Григорьева Г.В., Лобовикова О.А., Шульгина И.В.Devdariani Z.L., Syrova N.A., Mikheeva E.A., Terekhova I.V., Ermakov N.M., Grigor’eva G.V., Lobovikova O.A., Shul’gina I.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.microbe.ru/jour/article/view/333Цель исследований

Цель исследований. Разработка и медицинские испытания «Тест-системы иммуноферментной для детекции чумного микроба моноклональной (ИФАП естФ1-М)».

Материалы и методы

Материалы и методы. В работе использованы материалы для постановки сэндвич-варианта ИФА. В качестве диагностического иммунореагента применяли МКА 1В3 к FI Y. pestis. Для определения чувствительности и специфичности сконструированной иммуноферментной тест-системы исследованы образцы 24 природных и генетически модифицированных pFra+ и pFra– штаммов Y. pestis и 56 штаммов гетерологичных бактерий семейства Enterobacteriaceae.

Результаты и выводы

Результаты и выводы. На основе моноклональных антител к капсульному антигену Yersinia pestis разработана «Тест-система иммуноферментная для детекции чумного микроба моноклональная (ИФАП естФ1-М)», которая характеризуется высокой специфичностью и позволяет выявлять капсулосодержащие штаммы возбудителя чумы в образцах биологического материала и проводить идентификацию чистых культур с чувствительностью 5·105–1·106 м.к./мл. Она не уступает по основным параметрам препарату сравнения «Иммуноглобулинам диагностическим чумным флуоресцирующим адсорбированным лошадиным», лиофилизату для диагностических целей, производства ФКУЗ РосНИПЧИ «Микроб», обладая при этом такими преимуществами, как объективный учет результатов анализа и возможность их документирования. Диагностическая моноклональная тест-система (ИФАП естФ1–М) зарегистрирована в Росздравнадзоре № РЗН 2013/711 от 31.05.2013 г. в соответствии с приказом № 2161-Пр. 113 от 31.05.2013 г. и допущена к обращению на территории Российской Федерации.

Objective of the study was to develop and then conduct medical trials of the “Monoclonal immune-enzyme test-system for the detection of plague agent (“EIAPESTF1-M”).

Materials and methods

Materials and methods. Utilized were materials for carrying out sandwich EIA. MCA 1B3 to Y. pestis F1 served as diagnostic immune-reagent. To determine sensitivity and specificity of the designed immune-enzyme test-system, investigated were samples of 24 natural and genetically modified pFra+ and pFra– Y. pestis strains and 56 strains of heterologous bacteria Enterobacteriaceae family.

Results and conclusions

Results and conclusions. Based on monoclonal antibodies to Yersinia pestis capsular antigen, constructed was “Monoclonal immune-enzyme test-system for the detection of plague agent (“EIAPESTF1-M”), which is characterized by high specificity and allows for the detection of encapsulated plague agent strains in biological samples and for identification of pure cultures with sensitivity of 5·105 – 1·106 mc/ml. It is highly competitive with comparator drug – “Diagnostic fluorescent absorbed equine plague immunoglobulins”, lyophilizate for diagnostic purposes, by RusRAPI “Microbe”. It possesses such advantages as objective result recording and capability of result documentation. “EIAPESTF1-M” is registered in the RF Federal Service for Surveillance in the Sphere of Healthcare and Social Development, reference No 2013/711, dated 31.05.2013 and approved for use in the territory of the Russian Federation.

Yersinia pestisкапсульный антиген Ф1моноклональные антителадиагностическая тест-системаиммуноферментный анализиммунодиагностикаYersinia pestiscapsular antigen F1monoclonal antibodiesdiagnostic test-systemenzyme immune-assayimmunodiagnosticsReferencesБ езопасность работы с микроорганизмами I–II групп патогенности (опасности). СП 1.3.3118-13. М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора; 2014. 195 с.[Safety of work with microorganisms of the I-II groups of pathogenicity (hazard)]. SR 1.3.3118-13. M.: Federal Center of Hygiene and Epidemiology of the Rospotrebnadzor; 2014. 195 p.Б урделов Л.А., редактор. Атлас распространения особо опасных инфекций в Республике Казахстан. Алматы; 2012. 232 с.Burdelov L.A., editor. [Atlas of Dissemination of Particularly Dangerous Infections in the Republic of Kazakhstan]. Amaty; 2012. 232 p.К утырев В.В., Попова А.Ю., Ежлова Е.Б., Демина Ю.В., Пакскина Н.Д., Щучинов Л.В., Михайлов Е.П., Мищенко А.И., Рождественский Е.Н., Базарова Г.Х., Денисов А.В., Шарова И.Н., Попов Н.В., Кузнецов А.А. Заболевание человека чумой в Горно- Алтайском высокогорном природном очаге в 2014 г. Сообщение 1. Эпидемиологические и эпизоотологические особенности проявлений чумы в в Горно- Алтайском высокогорном природном очаге чумы. Пробл. особо опасных инф. 2014; 4:9–16.Kutyrev V.V., Popova A.Yu., Ezhlova E.B., Demina Yu.V., Pakskina N.D., Shchuchinov L.V., Mikhailov E.P., Mishchenko A.I., Rozhdestvensky E.N., Bazarova G.Kh., Denisov A.V., Sharova I.N., Popov N.V., Kuznetsov A.A. [Infection of an individual with plague in the Gorno-Altaisk highmountain natural focus in 2014. Communication 1. Epidemiological and epizootiological peculiarities of plague manifestations in the Gorno-Altaisk high-mountain (Sailyugemsky) natural plague focus]. Probl. Osobo Opasn. Infek. 2014; 4:9–16.О нищенко Г.Г., Кутырев В.В., редакторы. Природные очаги чумы Кавказа, Прикаспия, Средней Азии и Сибири. М.: ОАО «Издательство «Медицина»; 2004. 192 с.Onishchenko G.G., Kutyrev V.V., editors. [Natural Plague Foci in the territory of the Caucasus, Caspian-Sea Region, Central Asia and Siberia]. M.: Meditsina; 2004. 192 p.О нищенко Г.Г., Кутырев В.В., редакторы. Лабораторная диагностика опасных инфекционных болезней. М.: ЗАО «Шико»; 2013. 560 с.Onishchenko G.G., Kutyrev V.V., editors. [Laboratory Diagnostics of Dangerous Infectious Diseases]. M.: “Shiko”; 2013. 560 p.П опов Н.В., Безсмертный В.Е., Матросов А.Н., Князева Т.В., Кузнецов А.А., Федоров Ю.М., Попов В.П., Вержуцкий Д.Б., Корзун В.М., Чипанин Е.В., Дубянский В.М., Малецкая О.В., Григорьев М.П., Балахонов С.В., Куличенко А.Н., Кутырев В.В. Эпизоотическая активность природных очагов чумы РФ в 2014 г. и прогноз на 2015 г. Пробл. особо опасных инф. 2015; 1:10–7.Popov N.V., Bezsmertny V.E., Matrosov A.N., Knyazeva T.V., Kuznetsov A.A., Fedorov Yu.M., Popov V.P., Verzhutsky D.B., Korzun V.M., Chipanin E.V., Dubyansky V.M., Maletskaya O.V., Grigor’ev M.P., Balakhonov S.V., Kulichenko A.N., Kutyrev V.V. [Epizootic activity of natural plague foci in the territory of the Russian Federation in 2014 and prognosis for 2015]. Probl. Osobo Opasn. Infek. 2015; 1:10–7.Т ерешкина Н.Е., Терехова И.В., Сырова Н.А., Девдариани З.Л., Ляшова О.Ю., Григорьева Г.В., Лобовикова О.А., Шульгина И.В., Иваненко И.Л., Захарова Н.Б., Безрукова Г.А., Спирин В.Ф. Конструирование и медицинские испытания моноклональной дот-иммуноферментной тест-системы для детекции туляремийного микроба «ДИАТ ул-М». Пробл. особо опасных инф. 2013; 2:42–5.Tereshkina N.E., Terekhova I.V., Syrova N.A., Devdariani Z.L., Lyashova O.Yu., Grigor’eva G.V., Lobovikova O.A., Shul’gina I.V., Ivanenko I.L., Zakharova N.B., Bezrukova G.A., Spirin V.F. [Constructing and medical trials of a monoclonal dot- immuno-enzyme test-system “DIATul-M” for tularemia microbe detection]. Probl. Osobo Opasn. Infek. 2013; 2:42–5.Фримель Г., редактор. Иммунологические методы. М.: Медицина; 1987. 472 с.Frimel G., editor. [Immunological Methods]. M.: Meditsina; 1987. 472 p.Abdul-Fattah A.M., Kalonia D.S., Pikal M.J. The Challenge of drying method selection for protein pharmaceuticals: product quality implication. J. Pharm. Sci. 2007; 96(8):1886–916. DOI: 10.1002/ jps.20842.Abdul-Fattah A.M., Kalonia D.S., Pikal M.J. The Challenge of drying method selection for protein pharmaceuticals: product quality implication. J. Pharm. Sci. 2007; 96(8):1886–916. DOI: 10.1002/jps.20842.Butler T. Plague into the 21st century. Clin. Infect. Dis. 2009; 49(5):736–42. DOI: 10.1086/604718.Butler T. Plague into the 21st century. Clin. Infect. Dis. 2009; 49(5):736–42. DOI: 10.1086/604718.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.