microbeПроблемы особо опасных инфекцийProblems of Particularly Dangerous Infections0370-10692658-719XRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”10.21055/0370-1069-2010-1(103)-70-74microbe-514Research ArticleБИОТЕХНОЛОГИЯBIOTECHNOLOGYИзучение биокинетических особенностей и оптимизация условий культивирования рекомбинантного аспорогенного штамма-продуцента протективного антигена сибиреязвенного микробаStudy of Biokinetic Properties and Optimization of the Conditions of Propagation of Recombinant Asporogenic Strain Producing Anthrax Agent Protective AntigenЕреминС. А.EreminS. A.microbe@san.ruМикшисН. И.MikshisN. I.noemail@neicon.ruВолохО. А.VolokhO. A.noemail@neicon.ruКудрявцеваО. М.KudryavtsevaO. M.noemail@neicon.ruШепелевИ. А.ShepelevI. A.noemail@neicon.ruГончароваА. Ю.GoncharovaA. Yu.noemail@neicon.ruПоповЮ. А.PopovYu. A.noemail@neicon.ruНикифоровА. К.NikiforovA. K.noemail@neicon.ruРоссийский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»РоссияRussian Research Anti-Plague Institute MicrobeRussian Federation20102002201001(103)7074Copyright © Еремин С.А., Микшис Н.И., Волох О.А., Кудрявцева О.М., Шепелев И.А., Гончарова А.Ю., Попов Ю.А., Никифоров А.К., 20102010Еремин С.А., Микшис Н.И., Волох О.А., Кудрявцева О.М., Шепелев И.А., Гончарова А.Ю., Попов Ю.А., Никифоров А.К.Eremin S.A., Mikshis N.I., Volokh O.A., Kudryavtseva O.M., Shepelev I.A., Goncharova A.Y., Popov Y.A., Nikiforov A.K.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.microbe.ru/jour/article/view/514

Рекомбинантный штамм Bacillus anthracis 55ΔТПА-1Spo- при пассировании in vitro сохраняет свойство аспорогенности и способность к репликации гибридной плазмиды. Синтез иммуногенного белка генно-инженерным продуцентом не зависит от содержания в атмосфере СО2. Определены условия культивирования аспорогенного штамма для увеличения продукции протективного антигена. Использование в технологическом процессе не образующего спор штамма B. anthracis позволит обеспечить безопасность и экологичность процедуры получения основного компонента химической сибиреязвенной вакцины.

Recombinant Bacillus anthracis strain 55∆ ТПА-1Spo- passed in vitro preserved its asporogenic property and ability to replicate recombinant plasmid. Synthesis of immunogenic protein by genetically engineered producer did not depend on CO2 content in the atmosphere. Determined were the conditions of propagation of asporogenic strain to increase the production of protective antigen. Using Bacillus anthracis asporogenic strain in technological process will provide the safe and ecological procedure of obtaining the major component of chemical anthrax vaccine.

культивированиеBacillus anthracisпротективный антигенpropagationBacillus anthracisprotective antigenReferencesМикшис Н.И., Болотникова М.Ф., Новикова Л.В. и др. Получение аспорогенных штаммов Bacillus anthracis. Биотехнология. 2003; 1:3-11.Микшис Н.И., Болотникова М.Ф., Новикова Л.В. и др. Получение аспорогенных штаммов Bacillus anthracis. Биотехнология. 2003; 1:3-11.Микшис Н.И., Кудрявцева О.М., Болотникова М.Ф. и др. Иммуногенность рекомбинантных бациллярных штаммов с клонированным геном синтеза протективного антигена Bacillus anthracis. Мол. генет., микробиол. и вирусол. 2007; 3:15-21.Микшис Н.И., Кудрявцева О.М., Болотникова М.Ф. и др. Иммуногенность рекомбинантных бациллярных штаммов с клонированным геном синтеза протективного антигена Bacillus anthracis. Мол. генет., микробиол. и вирусол. 2007; 3:15-21.О санитарно-эпидемиологической обстановке в Российской Федерации в 2007 году: Государственный доклад. М., Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора; 2008.О санитарно-эпидемиологической обстановке в Российской Федерации в 2007 году: Государственный доклад. М., Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора; 2008.Farchaus J., Ribot W., Downs M., Ezzell J. Purification and characterization of the major surface array protein from the avirulent Bacillus anthracis delta Sterne-1. J. Bacteriol. 1995; 177(9):2481-9.Farchaus J., Ribot W., Downs M., Ezzell J. Purification and characterization of the major surface array protein from the avirulent Bacillus anthracis delta Sterne-1. J. Bacteriol. 1995; 177(9):2481-9.Gladstone G. Immunity of anthrax: protective antigen present in cell-free culture filtrates. Brit. J. Exp. Pathol. 1946; 27:393-410.Gladstone G. Immunity of anthrax: protective antigen present in cell-free culture filtrates. Brit. J. Exp. Pathol. 1946; 27:393-410.Hoffmaster A., Koehler T. The anthrax toxin activator gene atxA is associated with CO2-enhanced non-toxin gene expression in Bacillus anthracis. Infect. Immun. 1997; 65:3091-9.Hoffmaster A., Koehler T. The anthrax toxin activator gene atxA is associated with CO2-enhanced non-toxin gene expression in Bacillus anthracis. Infect. Immun. 1997; 65:3091-9.Koehler T., Dai Z., Kaufman-Yarbray M. Regulation of the Bacillus anthracis protective antigen gene: CO2 and a trans-acting element activate transcription from one of two promoters. J. Bacteriol. 1994; 176:586-95.Koehler T., Dai Z., Kaufman-Yarbray M. Regulation of the Bacillus anthracis protective antigen gene: CO2 and a trans-acting element activate transcription from one of two promoters. J. Bacteriol. 1994; 176:586-95.Laemmli U. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970; 227:680-5.Laemmli U. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970; 227:680-5.Lowry O., Risebrough N., Farr A., Randall R. Protein measurement with the Folin phenol reagent. J. Biol. Chem. 1951; 193:265.Lowry O., Risebrough N., Farr A., Randall R. Protein measurement with the Folin phenol reagent. J. Biol. Chem. 1951; 193:265.Mignot T., Mock M., Fouet A. A plasmid encoded regulator couples the synthesis of toxins and surface structures in Bacillus anthracis. Mol. Microbiol. 2003; 47:917-27.Mignot T., Mock M., Fouet A. A plasmid encoded regulator couples the synthesis of toxins and surface structures in Bacillus anthracis. Mol. Microbiol. 2003; 47:917-27.Pittman P., Kim-Ahn G., Pifat D. et al. Anthrax vaccine: safety and immunogenicity of a dose-reduction, route comparison study in humans. Vaccine. 2002; 20:1412-20.Pittman P., Kim-Ahn G., Pifat D. et al. Anthrax vaccine: safety and immunogenicity of a dose-reduction, route comparison study in humans. Vaccine. 2002; 20:1412-20.Spencer R., Wilcox M. Agents of biological warfare. Rev. Med. Microbiol. 1993; 4:138-43.Spencer R., Wilcox M. Agents of biological warfare. Rev. Med. Microbiol. 1993; 4:138-43.Towbin H., Stacbelin T., Gordon J. Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1979; 76:4350-4.Towbin H., Stacbelin T., Gordon J. Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1979; 76:4350-4.Turnbull P. Anthrax vaccines: past, present and future. Vaccine. 1991; 9:533-9.Turnbull P. Anthrax vaccines: past, present and future. Vaccine. 1991; 9:533-9.Wright G., Green T., Kanode R. Studies on immunity in anthrax. Immunizing activity of alumprecipitated protective antigen. J. Immunol. 1954; 73(6):387-91.Wright G., Green T., Kanode R. Studies on immunity in anthrax. Immunizing activity of alumprecipitated protective antigen. J. Immunol. 1954; 73(6):387-91.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.