microbeПроблемы особо опасных инфекцийProblems of Particularly Dangerous Infections0370-10692658-719XRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”10.21055/0370-1069-2010-3(105)-42-45microbe-543Research ArticleМИКРОБИОЛОГИЯ, ИММУНОЛОГИЯ, ДИАГНОСТИКАMICROBIOLOGY, IMMUNOLOGY, DIAGNOSTICSОбнаружение антител к протективному антигену Bacillus anthracis с использованием реакции непрямой гемагглютинации и твердофазного иммуноферментного методаDetection of Antibodies to Protective Antigen of Bacillus anthracis Using Indirect Hemagglutination Test and Enzime-Linked Immunosorbent AssayБарковА. М.BarkovA. M.vari2@sprint-v.com.ruБарковаИ. А.BarkovaI. A.noemail@neicon.ruАлексеевВ. В.AlekseevV. V.noemail@neicon.ruЛипницкийА. В.LipnitskiyA. V.noemail@neicon.ruКулаковМ. Я.KulakovM. Ya.noemail@neicon.ruВолгоградский научно-исследовательский противочумный институтРоссияVolgograd Research Anti-Plague InstituteRussian Federation20102006201003(105)4245Copyright © Барков А.М., Баркова И.А., Алексеев В.В., Липницкий А.В., Кулаков М.Я., 20102010Барков А.М., Баркова И.А., Алексеев В.В., Липницкий А.В., Кулаков М.Я.Barkov A.M., Barkova I.A., Alekseev V.V., Lipnitskiy A.V., Kulakov M.Y.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.microbe.ru/jour/article/view/543

Протективный антиген, выделенный гель-хроматографией с помощью сефакрила S-300 из КФ штамма B. anthracis СТИ, использован для обнаружения антител. Чувствительность РНГА и ТИФМ с гипериммунной сывороткой к ПА соответствовала титрам 1:128000 - 1:256000. Специфическая активность РНГА c сыворотками 22 морских свинок, выживших после заражения B. anthracis 81/1, была в титре 1:40 - 1:81920, ТИФМ - 1:160 - 1:81920. В сыворотках больных сибирской язвой титры антител обнаружены в РНГА в титрах 1:20 - 1:20480, в ТИФМ - 1:800 - 1:12800. Отмечено нарастание титра антител в парных сыворотках в зависимости от срока заболевания. Специфичность РНГА подтверждена РТНГА с ПА. Оба метода равнозначны для диагностики заболевания, однако преимущество РНГА в простоте, скорости постановки и учета результатов.

Protective antigen, isolated by gel chromatography with the help of sephacril S-300 from the cultural filtrate of B. anthracis strain STI, was used to detect antibodies. Sensitivity of IHA and ELISA with hyperimmune serum to PA corresponded to the titers 1:128000 - 1:256000. Specific activity of IHA with sera of 22 guinea-pigs survived after challenging with B. anthracis 81/1, was in titers 1:40 - 1:81920, that of the ELISA - 1:160 - 1:81920. In the sera of anthrax patients antibodies were detected in IHA in titers of 1:20 - 1:20480, in ELISA - 1:800 - 1:12800. The titers of antibodies in paired sera were demonstrated to increase depending on the period of the disease. Specificity of IHA was confirmed by IHIA with PA. Both methods are equally applicable for anthrax diagnosis, however IHA possesses some benefits, i.e. simplicity, rapid performance and registration of the results.

протективный антиген (ПА)эритроцитарный диагностикумреакция непрямой гемагглютинации (РНГА)реакция торможения непрямой гемагглютинации (РТНГА)твердофазный иммуноферментый метод (ТИФМ)protective antigen (PA)erythrocyte diagnosticumindirect hemagglutination assay (IHA)indirect hemagglutination inhibition assay (IHIA)solid phase enzyme-linked immunoassay (SPELIA)ReferencesАбалакин В.А., Сергеева Л.В., Черкасский Б.Л. Выявление специфических антигенов при экспериментальной сибирской язве. Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1989; 12:63-7.Абалакин В.А., Сергеева Л.В., Черкасский Б.Л. Выявление специфических антигенов при экспериментальной сибирской язве. Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1989; 12:63-7.Баркова И.А., Липницкий А.В., Барков А.М., Евтеева Е.В. Использование иммуноглобулинов к отдельным внеклеточным антигенам Bacillus anthracis СТИ для идентификации сибиреязвенного микроба. Биотехнология. 2005; 2: 91-5.Баркова И.А., Липницкий А.В., Барков А.М., Евтеева Е.В. Использование иммуноглобулинов к отдельным внеклеточным антигенам Bacillus anthracis СТИ для идентификации сибиреязвенного микроба. Биотехнология. 2005; 2: 91-5.Баркова И.А., Алексеев В.В., Липницкий А.В., Барков А.М., Буханцова Л.В. Продукция белков S-слоя разными штаммами Bacillus anthracis. Пробл. особо опасных инф. 2008;. 4(98):29-32.Баркова И.А., Алексеев В.В., Липницкий А.В., Барков А.М., Буханцова Л.В. Продукция белков S-слоя разными штаммами Bacillus anthracis. Пробл. особо опасных инф. 2008;. 4(98):29-32.Баркова И.А., Липницкий А.В., Барков А.М. Способ получения иммунной сыворотки к антигенам вирулентного штамма Bacillus antracis. Патент № 2252031, опубл. 20.05.2005. Бюл. № 14.Баркова И.А., Липницкий А.В., Барков А.М. Способ получения иммунной сыворотки к антигенам вирулентного штамма Bacillus antracis. Патент № 2252031, опубл. 20.05.2005. Бюл. № 14.Бахтеева И.В., Титарева Г.М., Кравченко Т.Б. и др. Сибирская язва: ранние этапы внутриклеточной стадии развития инфекции. Мол. генет., микробиол. и вирусол. 2005; 4:3-8.Бахтеева И.В., Титарева Г.М., Кравченко Т.Б. и др. Сибирская язва: ранние этапы внутриклеточной стадии развития инфекции. Мол. генет., микробиол. и вирусол. 2005; 4:3-8.Дубровина В.И., Голубинский Е.П., Колесникова О.Б. Показатели неспецифической резистентности морских свинок, иммунизированных Bacillus anthracis СТИ-1 и комплексом его антигенов. Бюл. ВСНЦ СО РАМН. 2004; 1(2):73-6.Дубровина В.И., Голубинский Е.П., Колесникова О.Б. Показатели неспецифической резистентности морских свинок, иммунизированных Bacillus anthracis СТИ-1 и комплексом его антигенов. Бюл. ВСНЦ СО РАМН. 2004; 1(2):73-6.Леви М.И., Езепчук Ю.В., Неменова М.А. Применение протективного антигена для реакции пассивной гемагглютинации при сибирской язве. Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1968; 10:132-4.Леви М.И., Езепчук Ю.В., Неменова М.А. Применение протективного антигена для реакции пассивной гемагглютинации при сибирской язве. Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1968; 10:132-4.Ермакова И.А., Липницкий А.В., Барков А.М. Способ выделения высокомолекулярного соматического сибиреязвенного антигена. Патент № 2230570, опубл. 20.06.2004. Бюл. № 17.Ермакова И.А., Липницкий А.В., Барков А.М. Способ выделения высокомолекулярного соматического сибиреязвенного антигена. Патент № 2230570, опубл. 20.06.2004. Бюл. № 17.Меньшов П.И., Шмутер М.Ф. Подбор оптимальных методов формализации эритроцитов для приготовления стойких диагностикумов для чумы и бруцеллеза. Пробл. особо опасных инф. 1969; 6:231-2.Меньшов П.И., Шмутер М.Ф. Подбор оптимальных методов формализации эритроцитов для приготовления стойких диагностикумов для чумы и бруцеллеза. Пробл. особо опасных инф. 1969; 6:231-2.Онищенко Г.Г., Кутырев В.В., редакторы. Лабораторная диагностика опасных инфекционных болезней. М.: Медицина; 2009. 472 с.Онищенко Г.Г., Кутырев В.В., редакторы. Лабораторная диагностика опасных инфекционных болезней. М.: Медицина; 2009. 472 с.Фримель Г., редактор. Иммунологические методы. М.: Медицина; 1987. 472 с.Фримель Г., редактор. Иммунологические методы. М.: Медицина; 1987. 472 с.Buchanan T.M., Feeley J.C., Haues P.S., Brachman P.S. Anthrax in direct hemagglutination test. J. Immunol. 1971; 107:1631-6.Buchanan T.M., Feeley J.C., Haues P.S., Brachman P.S. Anthrax in direct hemagglutination test. J. Immunol. 1971; 107:1631-6.Ivins B.E., Ezzell J.W., Jemski J. et al. Immunization Studies with Attenuated Strains of Bacillus anthracis. Infect. Immun. 1986; 52:454-8.Ivins B.E., Ezzell J.W., Jemski J. et al. Immunization Studies with Attenuated Strains of Bacillus anthracis. Infect. Immun. 1986; 52:454-8.Jernigan D.B., Raghunathan P.L., Bell B.P. et al. Investigation of biotrrorism-related anthrax, United States, 2001: epidemiologic findings. J. Emer. Infect. Dis. 2002; 8(10):1019-29.Jernigan D.B., Raghunathan P.L., Bell B.P. et al. Investigation of biotrrorism-related anthrax, United States, 2001: epidemiologic findings. J. Emer. Infect. Dis. 2002; 8(10):1019-29.Johnson-Winegar A. Comparison of enzyme-linked immunosorbend and indirect hemagglution assays for determining anthrax antibodies. J. Clinic. Microbiol. 1984; 20(3):357-61.Johnson-Winegar A. Comparison of enzyme-linked immunosorbend and indirect hemagglution assays for determining anthrax antibodies. J. Clinic. Microbiol. 1984; 20(3):357-61.Little S.F, Knudson G.B. Comparative Efficacy of Bacillus anthracis Live Spore Vaccine and Protective Antigen Vaccine against Anthrax in the Guinea Pig. Infect. Immun. 1986; 52:509-12.Little S.F, Knudson G.B. Comparative Efficacy of Bacillus anthracis Live Spore Vaccine and Protective Antigen Vaccine against Anthrax in the Guinea Pig. Infect. Immun. 1986; 52:509-12.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.