microbeПроблемы особо опасных инфекцийProblems of Particularly Dangerous Infections0370-10692658-719XRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”10.21055/0370-1069-2010-3(105)-46-49microbe-544Research ArticleМИКРОБИОЛОГИЯ, ИММУНОЛОГИЯ, ДИАГНОСТИКАMICROBIOLOGY, IMMUNOLOGY, DIAGNOSTICSПолучение поликлональных антител к белкам S-слоя B. anthracis и изучение их специфичности в иммуноферментном анализеObtaining of Polyclonal Antibodies against B. anthracis S-layer Proteins and Study of their Specificity in Enzyme ImmunoassayГончароваА. Ю.GoncharovaA. Yu.microbe@san.ruМикшисН. И.MikshisN. I.noemail@neicon.ruКудрявцеваО. М.KudryavtsevaO. M.noemail@neicon.ruБолотниковаМ. Ф.BolotnikovaM. F.noemail@neicon.ruНовиковаЛ. В.NovikovaL. V.noemail@neicon.ruКрасичковГ. Г.KrasichkovG. G.noemail@neicon.ruАленкинаТ. В.AlenkinaT. V.noemail@neicon.ruПоповЮ. А.PopovYu. A.noemail@neicon.ruРоссийский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»РоссияRussian Research Anti-Plague Institute MicrobeRussian Federation20102006201003(105)4649Copyright © Гончарова А.Ю., Микшис Н.И., Кудрявцева О.М., Болотникова М.Ф., Новикова Л.В., Красичков Г.Г., Аленкина Т.В., Попов Ю.А., 20102010Гончарова А.Ю., Микшис Н.И., Кудрявцева О.М., Болотникова М.Ф., Новикова Л.В., Красичков Г.Г., Аленкина Т.В., Попов Ю.А.Goncharova A.Y., Mikshis N.I., Kudryavtseva O.M., Bolotnikova M.F., Novikova L.V., Krasichkov G.G., Alenkina T.V., Popov Y.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.microbe.ru/jour/article/view/544

Получены очищенные препараты белков S-слоя возбудителя сибирской язвы - Sap и EA1. разработана схема иммунизации лабораторных животных, позволившая получить поликлональные кроличьи антитела к белкам Sap и ЕА1 в высоком титре. В твердофазном иммуноферментном анализе и дот-иммуноанализе с использованием поликлональных анти-Sap и анти-ЕА1 антител протестировано 12 штаммов сибиреязвенного микроба, 53 штамма близкородственных бацилл и 4 штамма других гетерогенных бактерий. При изучении специфичности полученных антител выявлены перекрестные взаимодействия с отдельными штаммами B. cereus, B. subtilis, B. mycoides и B. megaterium. Специфичность поликлональных анти-ЕА1 и анти-Sap антител составила 75 и 83 % соответственно. Чувствительность реакции при использовании поликлональных антител к белкам S-слоя B. anthracis составила 105-106 м.кл.

Purified preparations of B. anthracis S-layer proteins - Sap and EA1 were obtained. Developed was the scheme of laboratory animals` immunization, that enabled to receive rabbits' polyclonal antibodies against Sap and EA1 proteins in high titer. 12 strains of B. anthracis, 53 strains of closely-related bacilli and 4 strains of other heterogeneous bacteria were tested in enzyme-linked immunosorbent assay and DOT-immunoassay with the use of polyclonal anti-Sap and anti-EA1 antibodies. Analysis of specificity of the obtained antibodies revealed cross-reactions with B. cereus, B. subtilis, B. mycoides and B. megaterium. The specificity of polyclonal anti-EA1 and anti-Sap antibodies was 75 and 83 % respectively. Sensitivity of reaction was 105 and106 m.c. in applying polyclonal antibodies against B. anthracis S-layer proteins

B. anthracisполиклональные антителаS-слойбелки Sap и EA1иммуноферментный анализB. anthracispolyclonal antibodiesS-layerSap and EA1 proteinsenzyme immunoassayReferencesБондарев В.П., Филиппов А.В., Дармов И.В. и др. Разработка иммуноферментной моноклональной тест-системы для обнаружения протективного антигена Bacillus anthracis. Пробл. особо опасных инф. 2007; 1 (93):66-69.Бондарев В.П., Филиппов А.В., Дармов И.В. и др. Разработка иммуноферментной моноклональной тест-системы для обнаружения протективного антигена Bacillus anthracis. Пробл. особо опасных инф. 2007; 1 (93):66-69.Микшис Н.И., Корсакова А.Ю., Болотникова М.Ф. и др. Продукция белков S-слоя штаммами Bacillus anthracis. Биотехнология. 2004; 5:22-33.Микшис Н.И., Корсакова А.Ю., Болотникова М.Ф. и др. Продукция белков S-слоя штаммами Bacillus anthracis. Биотехнология. 2004; 5:22-33.Ezzell J., Abshire T. Immunological analysis of cell-associated antigens of Bacillus anthracis. Infect. Immun. 1988; 56(2):349-356.Ezzell J., Abshire T. Immunological analysis of cell-associated antigens of Bacillus anthracis. Infect. Immun. 1988; 56(2):349-356.Farchaus J., Ribot W., Downs M., Ezzell J. Purification and characterization of the major surface array protein from the avirulent Bacillus anthracis Delta Sterne-1. J. Bacteriol. 1995; 177(9):2481-2489.Farchaus J., Ribot W., Downs M., Ezzell J. Purification and characterization of the major surface array protein from the avirulent Bacillus anthracis Delta Sterne-1. J. Bacteriol. 1995; 177(9):2481-2489.Gat O., Grosfeld H., Ariel N. Search for Bacillus anthracis potential vaccine candidates by a functional genomic-serologic screen. Infect. Immun. 2006; 74 (7):3987-4001.Gat O., Grosfeld H., Ariel N. Search for Bacillus anthracis potential vaccine candidates by a functional genomic-serologic screen. Infect. Immun. 2006; 74 (7):3987-4001.Mabry R., Brasky K., Geiger R. et al. Detection of anthrax toxin in the serum of animals infected with Bacillus anthracis by using engineered immunoassays. Clin. Vaccine Immunol. 2006; 13(6):671-677.Mabry R., Brasky K., Geiger R. et al. Detection of anthrax toxin in the serum of animals infected with Bacillus anthracis by using engineered immunoassays. Clin. Vaccine Immunol. 2006; 13(6):671-677.Mesnage S., Tosi-Couture E., Mock M. et al. Molecular characterization of the Bacillus anthracis main S-layer component: evidence that it is the major cell-associated antigen. Mol. Microbiol. 1997; 23:1147-1155.Mesnage S., Tosi-Couture E., Mock M. et al. Molecular characterization of the Bacillus anthracis main S-layer component: evidence that it is the major cell-associated antigen. Mol. Microbiol. 1997; 23:1147-1155.Mock M., Fouet A. Anthrax. Microbiol. Rev. 2001; 55:647-671.Mock M., Fouet A. Anthrax. Microbiol. Rev. 2001; 55:647-671.Sastry K., Tuteja U., Batra H. Generation and characterization of monoclonal antibodies to protective antigen of Bacillus anthracis. Indian. J. Exp. Biol. 2003; 41:123-128.Sastry K., Tuteja U., Batra H. Generation and characterization of monoclonal antibodies to protective antigen of Bacillus anthracis. Indian. J. Exp. Biol. 2003; 41:123-128.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.