microbeПроблемы особо опасных инфекцийProblems of Particularly Dangerous Infections0370-10692658-719XRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”10.21055/0370-1069-2012-1(111)-62-65microbe-772Research ArticleМИКРОБИОЛОГИЯMICROBIOLOGYИзучение биологического действия цитотонического фактора CEF холерных вибрионов на моделях in vitro и in vivoStudy of Biological Effect of CHO-Cell Elongating Factor of Vibrio cholerae on Models in vitro and in vivoМонаховаЕ. В.MonakhovaE. V.plague@aaanet.ruФедоренкоГ. М.FedorenkoG. M.noemail@neicon.ruМазрухоА. Б.MazrukhoA. B.noemail@neicon.ruПисановР. В.PisanovR. V.noemail@neicon.ruКругликовВ. Д.KruglikovV. D.noemail@neicon.ruМаркинаО. В.MarkinaO. V.noemail@neicon.ruАлексееваЛ. П.AlekseevaL. P.noemail@neicon.ruРостовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институтРоссияRostov-on-Don Research Anti-Plague InstituteRussian FederationЮжный Научный Центр РАНРоссияSouthern Scientific Centre of Russian Academy of SciencesRussian Federation20122002201201(111)6265Copyright © Монахова Е.В., Федоренко Г.М., Мазрухо А.Б., Писанов Р.В., Кругликов В.Д., Маркина О.В., Алексеева Л.П., 20122012Монахова Е.В., Федоренко Г.М., Мазрухо А.Б., Писанов Р.В., Кругликов В.Д., Маркина О.В., Алексеева Л.П.Monakhova E.V., Fedorenko G.M., Mazrukho A.B., Pisanov R.V., Kruglikov V.D., Markina O.V., Alekseeva L.P.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.microbe.ru/jour/article/view/772

Изучены морфологические, физиологические и ультраструктурные изменения в культуре клеток L-929 и кишечнике мышей-сосунков под действием препарата Cef (CHO cell elongating factor) холерных вибрионов. В культуре происходило удлинение клеток, вакуолизация их цитоплазмы, увеличение числа лизосом, ретракция и деформация ядер. In vivo Cef вызывал статистически достоверное накопление жидкости. При электронно-микроскопическом исследовании эпителиоцитов тонкого кишечника наблюдалось образование вакуолей и миелиноподобных структур в цитоплазме и ядрах, набухание митохондрий, просветление их матрикса и деструкция крист. В криптах отмечалось скопление слизи. Вовлечение в процесс тучных клеток приводило к усугубляющему дегидратацию повышению проницаемости капилляров. Эти изменения свидетельствуют об участии Cef в проявлении холерными вибрионами патогенных свойств.

Studied were morphological, physiological and ultrastructural changes in the cell culture L-929 and in the intestine of suckling mice in the presence of Cef (CHO cell elongating factor) of Vibrio cholerae. Registered were cellular elongation, cytoplasm vacuolization, an increase in the number of lysosomes, retraction and nuclei deformation in the L-929 cell culture. Statistical significance test confirmed that in vivo Cef caused the accumulation of fluid in suckling mice. Electron microscopy of the epithelial cells of small intestine revealed vacuolization and myelin-like structures formation in cytoplasm and nuclei, swelling of mitochondria, clarification of their matrix and destruction of cristae. Cristae were filled with mucus. The involvement of mast cells caused the increasing of capillary permeability which enhanced dehydration. These changes confirmed Cef participation in manifestation of Vibrio cholerae pathogenic properties.

CHO cell elongating factorхолерный вибрионкультура клетоктонкая кишкаультраструктураCHO cell elongating factorVibrio choleraecell culturesmall intestineultrastructureReferencesВласов В.П., Харланова Н.Г., Монахова Е.В, Винокур Н.И., Бардахчьян Э.А. Ультраструктурные изменения в тонкой кишке, вызванные холерогенным и нехолерогенным штаммами вибрионов. Доклады АН. 1997; 352:278-80.VlasovV.P., Kharlanova N.G., Monakhova E.V., Vinokur N.I., Bardakhch’yan E.A. [Ultrasructural changes in the large intestine, caused by choleragenic and non-choleragenic vibrio strains]. Doklady AN. 1997; 352:278–80.Монахова Е.В., Ломов Ю.М., Писанов Р.В., Алексеева Л.П., Маркина О.В., Миронова А.В. и др. Клонирование гена цитотонического фактора Cef (CHO-cell elongating factor) Vibrio cholerae в Escherichia coli и его экспрессия под контролем PBAD-промотора. Биотехнология. 2006; 5:12-8.Monakhova E.V., Lomov Yu. M., Pisanov R.V., Alekseeva L.P., Markina O.V., Mironova A.V. et al. [Cloning of the gene of Vibrio cholerae CHO-cell elongating factor and its expression under control of PBAD promot- er]. Biotekhnologia. 2006; 5:12–8.Монахова Е.В., Ломов Ю.М., Писанов Р.В., Алексеева Л.П., Маркина О.В., Веркина Л.М., Миронова А.В. Рекомбинантная плазмида, экспрессирующая клонированный ген cef (CHO cell elongating factor) Vibrio cholerae (варианты) и штамм Escherichia coli - продуцент сef (CHO cell elongating factor) Vibrio cholerae (варианты). Патент РФ 2313577, опубл. 27.12.07. Бюл. 36.Monakhova E.V., Lomov Yu. M., Pisanov R.V., Alekseeva L.P., Markina O.V., Verkina L.M., Mironova A.V. [ Recombinant plasmid, express- ing the cloned cef (CHO cell elongating factor) of Vibrio cholerae (variants) and Escherichia coli strain – producer of cef (CHO cell elongating factor) of Vibrio cholerae (variants)]. RF Patent № 2313577.McCardell B.A., Kothary M.H., Hall R.N., Sathyamoorthy V. Identification of a CHO-elongating factor produced by Vibrio cholerae O1. Microb. Pathogen. 2000; 29(1):1-8.McCardell B.A., Kothary M.H., Hall R.N., Sathyamoorthy V. Identification of a CHO-elongating factor produced by Vibrio cholerae O1. Microb. Pathogen. 2000; 29(1):1-8.McCardell B.A., Sathyamoorthy V., Michalski J., Lavu S., Kothary M., Livezey J. et al. Cloning, expression and characterization of the CHO cell elongating factor (Cef) from Vibrio cholerae O1. Microb. Pathog. 2002; 32:165-72.McCardell B.A., Sathyamoorthy V., Michalski J., Lavu S., Kothary M., Livezey J. et al. Cloning, expression and characterization of the CHO cell elongating factor (Cef) from Vibrio cholerae O1. Microb. Pathog. 2002; 32:165-72.Sathyamoorthy V., Hall R.H., McCardell B.A., Kothary M., Ahn S.J., Ratnayake S. Purification and characterization of a cytotonic protein expressed in vitro by the live cholera vaccine candidate CVD 103-HgR. Infect. Immun. 2000; 68:6062-5.Sathyamoorthy V., Hall R.H., McCardell B.A., Kothary M., Ahn S.J., Ratnayake S. Purification and characterization of a cytotonic protein expressed in vitro by the live cholera vaccine candidate CVD 103-HgR. Infect. Immun. 2000; 68:6062-5.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.