microbeПроблемы особо опасных инфекцийProblems of Particularly Dangerous Infections0370-10692658-719XRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”10.21055/0370-1069-2012-2(112)-62-64microbe-798Research ArticleДИАГНОСТИКАDIAGNOSTICSРазработка методических подходов изучения возбудителей особо опасных инфекционных болезней методом атомно-силовой микроскопииDevelopment of Methodological Approaches for Examination of Particularly Dangerous Infectious Diseases Agents by Means of Atomic Power MicroscopyУткинД. В.UtkinD. V.rusrapi@microbe.ruКузнецовО. С.KuznetsovO. S.rusrapi@microbe.ruЕрохинП. С.ErokhinP. S.rusrapi@microbe.ruСпицынА. Н.SpitsynA. N.rusrapi@microbe.ruВолохО. А.VolokhO. A.rusrapi@microbe.ruОсинаН. А.OsinaN. A.rusrapi@microbe.ruРоссийский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»РоссияRussian Research Anti-Plague Institute MicrobeRussian Federation20122004201202(112)6264Copyright © Уткин Д.В., Кузнецов О.С., Ерохин П.С., Спицын А.Н., Волох О.А., Осина Н.А., 20122012Уткин Д.В., Кузнецов О.С., Ерохин П.С., Спицын А.Н., Волох О.А., Осина Н.А.Utkin D.V., Kuznetsov O.S., Erokhin P.S., Spitsyn A.N., Volokh O.A., Osina N.A.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.microbe.ru/jour/article/view/798

Одним из методов изучения поверхностной структуры клеток возбудителей особо опасных инфекционных болезней и проведения морфометрического анализа является атомно-силовая микроскопия. Атомно-силовая микроскопия по получаемым результатам приближена к сканирующей электронной микроскопии, однако позволяет избежать трудоемкие и длительные процедуры подготовки образцов к исследованию, связанные с фиксацией, обезвоживанием и напылением проводящего слоя. Нами был разработан методический подход подготовки и анализа образцов возбудителей особо опасных инфекционных болезней с использованием методов атомно-силовой микроскопии, включающий выбор оптимальной подложки, режима обеззараживания и сканирования образцов.

The atomic power microscopy (APM) is used to study the cell surface structure of particularly dangerous infectious diseases agents and to carry out the morphometric analysis. APM shows similar results with scanning electron microscopy. However, its application makes it possible to avoid time-consuming and labour-intensive procedures of samples preparing for testing by fixation, dehydration and sputtering of conducting layer. Methodological approach has been elaborated for preparing and analysis of samples of agents of particularly dangerous infectious diseases by means of APM. This approach includes a selection of optimal substrate, mode of disinfection and scanning of samples.

атомно-силовая микроскопияособо опасные инфекционные болезниморфометрический анализatomic power microscopy (APM)particularly dangerous infectious diseasesmorphometric analysisReferencesАрчаков А.И., Згода В.Г., Иванов Ю.Д., Кайшева А.Л., Крохин Н.В., Плешакова Т.О. и др. Визуализация и идентификация вирусных частиц гепатита при помощи атомно-силовой микроскопии, сопряженной с МС/МС анализом. Биомедицинская химия. 2010; 1:26-39.Archakov A.I., Zgoda V.G., Ivanova Yu.D., Kaisheva A.L., Krokin N.V., Pleshakova T.O. et al. [Visualization and identification of hepatitis C viral particles by atomic force microscopy combined with MS/MS analysis]. Biomeditsin. Khim. 2010; 1:26–39.Миронов В.Л. Основы сканирующей зондовой микроскопии. Нижний Новгород; 2004. 114 с.Mironov V.L. [Fundamentals of Scanning Probe Microscopy]. Nizhniy Novgorod; 2004. 114 p.Хоулт Дж., редактор. Определитель бактерий Берджи. М.; 1997. 432 с.Holt J., editor. [Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology]. M.; 1997. 432 p.Санитарно-эпидемиологические правила «Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности). СП 1.3.1285-03». М.; 2003.Sanitary and Epidemiological Rules. [Safety Work with Microorganisms of I–II Groups of Pathogenicity (Danger). SP 1.3.1285-03]. M.; 2003.Федорова Л.И., Арефьева Л.С., Путинцева Н.А., Веремкович Н.А. Современные средства дезинфекции и дезинсекции. Характеристика, назначение, перспективы. М.; 1991. 51 с.Fedorova L.I., Aref’eva L.S., Putintseva N.A., Veremkovich N.A. [Modern Techniques of Disinfection and Desinsection. Characteristic, Application and Prospects]. M.; 1991. 51 p.Chada V.G.R., Sanstad E.A., Wang R., Driks A. Morphogenesis of Bacillus Spore Surfaces. J. Bacteriol. 2003; 185(21):6255-61.Chada V.G.R., Sanstad E.A., Wang R., Driks A. Morphogenesis of Bacillus Spore Surfaces. J. Bacteriol. 2003; 185(21):6255-61.Dufrene Y.F. Application of atomic force microscopy to microbial surfaces: from reconstituted cell surface layers to living cells. Micron. 2001; 32:153.Dufrene Y.F. Application of atomic force microscopy to microbial surfaces: from reconstituted cell surface layers to living cells. Micron. 2001; 32:153.Razatos A., Ong Y.-L., Sharma M.M., Georgiou G. Molecular determinants of bacterial adhesion monitored by atomic force microscopy. Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1998; 95(19):11059-64.Razatos A., Ong Y.-L., Sharma M.M., Georgiou G. Molecular determinants of bacterial adhesion monitored by atomic force microscopy. Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1998; 95(19):11059-64.Stukalov O., Korenevsky A., Beveridge T.J., Dutcher J.R. Use of atomic microscopy and transmission electron microscopy for correlative studies of bacterial capsules. Appl. Environ. Microbiol. 2008; 74(17):5457-65.Stukalov O., Korenevsky A., Beveridge T.J., Dutcher J.R. Use of atomic microscopy and transmission electron microscopy for correlative studies of bacterial capsules. Appl. Environ. Microbiol. 2008; 74(17):5457-65.Vadillo-Rodriguez V., Beveridge T.J., Dutcher J.R. Surface viscoelasticity of individual gram-negative bacterial cells measured using atomic force microscopy. J. Bacteriol. 2008; 190(12):4225-32.Vadillo-Rodriguez V., Beveridge T.J., Dutcher J.R. Surface viscoelasticity of individual gram-negative bacterial cells measured using atomic force microscopy. J. Bacteriol. 2008; 190(12):4225-32.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.