microbeПроблемы особо опасных инфекцийProblems of Particularly Dangerous Infections0370-10692658-719XRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”10.21055/0370-1069-2009-3(101)-54-58microbe-943Research ArticleДИАГНОСТИКАDIAGNOSTICSИммуночип на основе микропланшетной технологии ФОСФАН для определения иммуноглобулинов G к вирусам Западного Нила, Крымской-Конго геморрагической лихорадки и клещевого энцефалитаPHOSPHAN Microplate Technology-Based Microarray For Detection of IgG Antibodies against West Nile, Crimean Congo Hemorrhagic Fever and Tick-Borne Encephalitis VirusesПомеловаВ. Г.PomelovaV. G.v.pomelova@immunoscreen.ruБыченковаТ. А.BychenkovaT. A.noemail@neicon.ruОсинН. С.OssinN. S.noemail@neicon.ruГосударственный научно-исследовательский институт биологического приборостроенияРоссияResearch Institute of Biological EngineeringRussian FederationЗАО «ИММУНОСКРИН»РоссияCJSC ImmunoscreenRussian Federation20092006200903(101)5458Copyright © Помелова В.Г., Быченкова Т.А., Осин Н.С., 20092009Помелова В.Г., Быченкова Т.А., Осин Н.С.Pomelova V.G., Bychenkova T.A., Ossin N.S.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.microbe.ru/jour/article/view/943

Продемонстрирована возможность использования микропланшетной технологии ФОСФАН для одновременного обследования сывороток крови человека и выявления в них специфических IgG антител к трем арбовирусам: Западного Нила (ЗН), Крымской-Конго геморрагической лихорадки (ККГЛ) и клещевого энцефалита (КЭ). Чувствительность и специфичность анализа с помощью иммуночипа были сопоставимы с показателями ИФА при раздельном тестировании проб. На основе не менее чем 2-кратного превышения значения P/N с гомологичным антигеном над гетерологичным удалось дифференцировать группоспецифические антитела к флавивирусам КЭ и ЗН примерно в 60 % перекрестно-реагирующих сывороток. Преимущества ФОСФАН связаны с миниатюризацией формата иммуноанализа и повышением его мультиплексности, что может способствовать снижению стоимости обследования клинических образцов.

Demonstrated was the possibility to use PHOSPHAN microplate technology to examine human sera and detect simultaneously specific IgG antibodies to three arboviruses, including the West Nile virus (WNV), Crimean Congo Hemorrhagic Fever virus (CCHFV), and Tick-borne encephalitis virus (TBEV). Both sensitivity and specificity of microarray immunoassay approach were similar to those of ELISA tests (when serum specimens were investigated separately). Using the criterion of 2-fold or stronger reaction of the examined serum specimen with homologous antigen than with heterologous one, we succeeded in differentiation of group specific anti WNV and anti TBEV IgG antibodies in about 60% of cross reactive sera. From the economical standpoint, the PHOSPAN technology may have advantages as compared with currently used ELISAs due to miniaturization of immunoassay format and ability to multiplex.

вирус Западного Нилавирус Крымской-Конго геморрагической лихорадкивирус клещевого энцефалитаиммуночипфосфоресцентный иммуноанализФОСФАНсеродиагностикаWest Nile virusCrimean-Congo Hemorrhagic Fever virusTick-borne encephalitis virusantigen microarrayPhosphorescence AssayPHOSPHANserodiagnosisReferencesАзарян А.Р., Гришанова А.П., Бутенко А.М. и др. Серологическая диагностика арбовирусных инфекций в Астраханской области. В кн.: Арбовирусы и арбовирусные инфекции: Матер. расширенного пленума проблемной комиссии «Арбовирусы» и науч.-практич. конф. «Арбовирусы и арбовирусные инфекции»; 17-20 октября 2006; Астрахань. Москва; 2007. С. 115-9.Азарян А.Р., Гришанова А.П., Бутенко А.М. и др. Серологическая диагностика арбовирусных инфекций в Астраханской области. В кн.: Арбовирусы и арбовирусные инфекции: Матер. расширенного пленума проблемной комиссии «Арбовирусы» и науч.-практич. конф. «Арбовирусы и арбовирусные инфекции»; 17-20 октября 2006; Астрахань. Москва; 2007. С. 115-9.Гайдамович С.Я., Мельникова Е.Э., Шуткова Т.М. и др. Характеристика моноклональных антител, индуцированных вирусом Крымской геморрагической лихорадки. Вопр. вирусол. 1989; 3: 201-4.Гайдамович С.Я., Мельникова Е.Э., Шуткова Т.М. и др. Характеристика моноклональных антител, индуцированных вирусом Крымской геморрагической лихорадки. Вопр. вирусол. 1989; 3: 201-4.Гайдамович С.Я., Мельникова Е.Э., Gresikova M. Два типа моноклональных антител против вируса клещевого энцефалита. Acta virol. 1986; 206-12.Гайдамович С.Я., Мельникова Е.Э., Gresikova M. Два типа моноклональных антител против вируса клещевого энцефалита. Acta virol. 1986; 206-12.Gaidamovich S.Ya., Melnikova Ye.E., Gresнkovб M., Sekeyovб M., Novokhatsky A.S., Kushch A.A., Novбk M., Sveshnikova N.A., Mikheeva T.G., Krasnobayeva Z.N., et al. Two kinds of monoclonal antibodies to tick-borne encephalitis virus. Acta Virol. 1986; 30(3):206-12.Gaidamovich S.Ya., Melnikova Ye.E., Gresнkovб M., Sekeyovб M., Novokhatsky A.S., Kushch A.A., Novбk M., Sveshnikova N.A., Mikheeva T.G., Krasnobayeva Z.N., et al. Two kinds of monoclonal antibodies to tick-borne encephalitis virus. Acta Virol. 1986; 30(3):206-12.Осин Н.С., Помелова В.Г., Быченкова Т.А., Соколов А.С. Новая технология фосфоресцентного иммуноанализа для обнаружения микроорганизмов и вирусов. В кн.: Современные технологии в диагностике особо опасных инфекционных заболеваний: Матер. 4-й Межгос. науч.-практич. конф. стран СНГ; 29 сентября - 2 октября 2003 г. Саратов, 2003. С. 138-42.Осин Н.С., Помелова В.Г., Быченкова Т.А., Соколов А.С. Новая технология фосфоресцентного иммуноанализа для обнаружения микроорганизмов и вирусов. В кн.: Современные технологии в диагностике особо опасных инфекционных заболеваний: Матер. 4-й Межгос. науч.-практич. конф. стран СНГ; 29 сентября - 2 октября 2003 г. Саратов, 2003. С. 138-42.Осин Н.С., Помелова В.Г., Быченкова Т.А. Фосфоресцентный микроанализ (ФОСФАН) как новая технология для диагностики инфекций. В кн.: Арбовирусы и арбовирусные инфекции: Матер. расширенного пленума проблемной комиссии «Арбовирусы» и науч.-практич. конф. «Арбовирусы и арбовирусные инфекции»; 17-20 октября 2006; Астрахань. Москва; 2007. С. 79-87.Осин Н.С., Помелова В.Г., Быченкова Т.А. Фосфоресцентный микроанализ (ФОСФАН) как новая технология для диагностики инфекций. В кн.: Арбовирусы и арбовирусные инфекции: Матер. расширенного пленума проблемной комиссии «Арбовирусы» и науч.-практич. конф. «Арбовирусы и арбовирусные инфекции»; 17-20 октября 2006; Астрахань. Москва; 2007. С. 79-87.Осин Н.С., Помелова В.Г., Соколов А.С. и др. Фосфоресцентный микроанализ как новая технологическая платформа для молекулярной диагностики. Вестник РАМН. 2007; 12:3-8.Осин Н.С., Помелова В.Г., Соколов А.С. и др. Фосфоресцентный микроанализ как новая технологическая платформа для молекулярной диагностики. Вестник РАМН. 2007; 12:3-8.Пиликова О.М., Юничева Ю.В., Ларичев В.Ф. Изучение циркуляции арбовирусов на территории, курируемой Причерноморской противочумной станцией. В кн.: Арбовирусы и арбовирусные инфекции: Матер. расширенного пленума проблемной комиссии «Арбовирусы» и науч.-практич. конф. «Арбовирусы и арбовирусные инфекции»; 17-20 октября 2006; Астрахань. Москва; 2007. С. 152-5.Пиликова О.М., Юничева Ю.В., Ларичев В.Ф. Изучение циркуляции арбовирусов на территории, курируемой Причерноморской противочумной станцией. В кн.: Арбовирусы и арбовирусные инфекции: Матер. расширенного пленума проблемной комиссии «Арбовирусы» и науч.-практич. конф. «Арбовирусы и арбовирусные инфекции»; 17-20 октября 2006; Астрахань. Москва; 2007. С. 152-5.Распопин В.В., Топычканова Н.Г., Жуков В.А. Дифференциальная серодиагностика клещевого энцефалита и лихорадки Западного Нила. Новости «Вектор-Бест». 2006; 2 (40):4.Распопин В.В., Топычканова Н.Г., Жуков В.А. Дифференциальная серодиагностика клещевого энцефалита и лихорадки Западного Нила. Новости «Вектор-Бест». 2006; 2 (40):4.Шишкина Е.О. Серологическая диагностика лихорадки Западного Нила [автореф. дис. ... канд. мед. наук]. М.; 2003. 20 с.Шишкина Е.О. Серологическая диагностика лихорадки Западного Нила [автореф. дис. ... канд. мед. наук]. М.; 2003. 20 с.Щелканов М.Ю., Колобухина Л.В., Москвина Т.М. и др. Выявление циркуляции вируса Крымской-Конго геморрагической лихорадки в предгорных степях Северного Кавказа. Вопр. вирусол. 2005; 50(5):9-15.Щелканов М.Ю., Колобухина Л.В., Москвина Т.М. и др. Выявление циркуляции вируса Крымской-Конго геморрагической лихорадки в предгорных степях Северного Кавказа. Вопр. вирусол. 2005; 50(5):9-15.Mendoza L.G., McQuary P., Mongan A. et al. High-throughput microarray-based enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Biotechniques. 1999; 27:778-80.Mendoza L.G., McQuary P., Mongan A. et al. High-throughput microarray-based enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Biotechniques. 1999; 27:778-80.Osin N.S., Pomelova V.G. Multi-array immunophosphorescence technology for the detection of pathogens. In: Frontiers in research. Humana Press; 2008; 24:233-40.Osin N.S., Pomelova V.G. Multi-array immunophosphorescence technology for the detection of pathogens. In: Frontiers in research. Humana Press; 2008; 24:233-40.Razumov I.A., Kazachinskaia E.I., Ternovoi V.A. et al. Neutralizing monoclonal antibodies against Russian Strain of the West Nile Virus. Viral Immunol. 2005; 18(3):558-68. 14. de Vegvar Neuman H.E., Robinson W.H. Microarray profiling of antiviral antibodies for the development of diagnostics, vaccines, and therapeutics. Clin. Immunol. 2004; 111:196-201.Razumov I.A., Kazachinskaia E.I., Ternovoi V.A. et al. Neutralizing monoclonal antibodies against Russian Strain of the West Nile Virus. Viral Immunol. 2005; 18(3):558-68. 14. de Vegvar Neuman H.E., Robinson W.H. Microarray profiling of antiviral antibodies for the development of diagnostics, vaccines, and therapeutics. Clin. Immunol. 2004; 111:196-201.Wong S.J., Demarest V.L., Boyle R.H. et al. Detection of human anti-flavivirus antibodies with a West Nile virus recombinant antigen microsphere immunoassay. J. Clin. Microbiol. 2004; 42(1):65-72.Wong S.J., Demarest V.L., Boyle R.H. et al. Detection of human anti-flavivirus antibodies with a West Nile virus recombinant antigen microsphere immunoassay. J. Clin. Microbiol. 2004; 42(1):65-72.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.