microbeПроблемы особо опасных инфекцийProblems of Particularly Dangerous Infections0370-10692658-719XRussian Research Anti-Plague Institute “Microbe”10.21055/0370-1069-2009-2(100)-68-71microbe-982Research ArticleБИОТЕХНОЛОГИЯBIOTECHNOLOGYИспользование рекомбинантных штаммов для одновременного получения нескольких очищенных основных протективных антигенов холерного вибрионаRecombinant Strains Application for Simultaneous Preparation of Several Purified Cholera Vibrio AntigensЗахароваТ.Л.ZakharovaT.L.microbe@san.ruЗадноваС.П.ZadnovaS.P.noemail@neicon.ruЛивановаЛ.Ф.LivanovaL.F.noemail@neicon.ruКиреевМ.Н.KireevM.N.noemail@neicon.ruСмирноваН.И.SmirnovaN.I.noemail@neicon.ruРоссийской научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»РоссияRussian Anti-Plague Research Institute MicrobeRussian Federation20092004200902(100)6871Copyright © Захарова Т., Заднова С., Ливанова Л., Киреев М., Смирнова Н., 20092009Захарова Т., Заднова С., Ливанова Л., Киреев М., Смирнова Н.Zakharova T., Zadnova S., Livanova L., Kireev M., Smirnova N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://journal.microbe.ru/jour/article/view/982

Предложен способ выделения и очистки одновременно трех ключевых факторов патогенности холерного вибриона (холерного токсина, токсин-корегулируемых пилей адгезии, О1-антигена Инаба или Огава), являющихся и основными протективными антигенами, из сконструированных ранее рекомбинантных штаммов Vibrio cholerae 2415 серовара Инаба и КМ 206 серовара Огава. Иммунологическая активность препаратов подтверждена поликлональными высокоактивными специфическими антисыворотками, полученными на их основе. Очищенные антигены могут быть использованы для создания и усовершенствования профилактических и диагностических препаратов.

Proposed is the method for simultaneous isolation and purification of three cholera vibrio key pathogenicity factors (cholera toxin, toxin-co-regulated adhesion pili, O1 antigen Ogawa or Inaba), which are main protective antigens, from previously constructed recombinant Vibrio cholerae strains 2415 Inaba and KM 206 Ogawa. Immunologic activity of the preparations was confirmed using polyclonal high-active specific antisera. Purified antigens can be used for creation and improvement of prophylactic and diagnostic preparations.

рекомбинантные штаммы Vibrio choleraeпротективные антигеныочисткаантисывороткиспецифичностьrecombinant Vibrio cholerae strainsprotective antigenspurificationantiseraspecificityReferencesГромова О.В., Джапаридзе М.Н., Дятлов И.А. и др. Новый способ получения О-антигена холерного очищенного с целью создания холерных диагностических антисывороток. Биотехнология. 2002; 2:42-6.Громова О.В., Джапаридзе М.Н., Дятлов И.А. и др. Новый способ получения О-антигена холерного очищенного с целью создания холерных диагностических антисывороток. Биотехнология. 2002; 2:42-6.Заднова С.П., Топорков А.В., Новикова О.В., Смирнова Н.И. Получение и использование антител на токсин-корегулируемые пили адгезии холерного вибриона. Биотехнология. 2003; 1:79-84.Заднова С.П., Топорков А.В., Новикова О.В., Смирнова Н.И. Получение и использование антител на токсин-корегулируемые пили адгезии холерного вибриона. Биотехнология. 2003; 1:79-84.Иммунологические методы. Под ред. Г.Фримеля. М.: Медицина; 1987. 471 с.Иммунологические методы. Под ред. Г.Фримеля. М.: Медицина; 1987. 471 с.Онищенко Г.Г., Ломов Ю.М., Москвитина Э.А. и др. Холера в начале ХХI века, прогноз. Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 2005; 3:44-8.Онищенко Г.Г., Ломов Ю.М., Москвитина Э.А. и др. Холера в начале ХХI века, прогноз. Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 2005; 3:44-8.Смирнов В.В., Чаплинский В.Я., Андреева З.М., Богоявленская Л.Б. Научные основы производства диагностических препаратов. Киев: Наукова думка; 1980. 195 с.Смирнов В.В., Чаплинский В.Я., Андреева З.М., Богоявленская Л.Б. Научные основы производства диагностических препаратов. Киев: Наукова думка; 1980. 195 с.Топорков А.В., Заднова С.П., Смирнова Н.И., Кутырев В.В. Штамм бактерий Vibrio cholerae KM 206 классического биовара серовара Огава - продуцент протективных антигенов. Патент РФ 2222594, C12N 1/21 A61 K39/106//(C12N 1/21 C12R 1:63), 2004.Топорков А.В., Заднова С.П., Смирнова Н.И., Кутырев В.В. Штамм бактерий Vibrio cholerae KM 206 классического биовара серовара Огава - продуцент протективных антигенов. Патент РФ 2222594, C12N 1/21 A61 K39/106//(C12N 1/21 C12R 1:63), 2004.Шагинян И.А., Маракуша В.И. Модификация метода пассивного иммунного гемолиза на плотной среде для выявления продукции термолабильных энтеротоксинов штаммами холерных вибрионов и кишечной палочки. Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1983; 2:92-6.Шагинян И.А., Маракуша В.И. Модификация метода пассивного иммунного гемолиза на плотной среде для выявления продукции термолабильных энтеротоксинов штаммами холерных вибрионов и кишечной палочки. Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1983; 2:92-6.Kaper J.B., Morris J.G., Levin M.M. Cholera. Clin. Microbiol. Rev. 1995; 8(1):48-89.Kaper J.B., Morris J.G., Levin M.M. Cholera. Clin. Microbiol. Rev. 1995; 8(1):48-89.Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the head of the bacteriophage T4. Nature. 1970; 227(15):680-5.Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the head of the bacteriophage T4. Nature. 1970; 227(15):680-5.Mekalanos J.J., Collier R.J., Romig W.R. Purification of cholera toxin and its subunits: new methods of preparation and the use of hypertoxinogenic mutants. Infect. Immun. 1978; 20:552-9.Mekalanos J.J., Collier R.J., Romig W.R. Purification of cholera toxin and its subunits: new methods of preparation and the use of hypertoxinogenic mutants. Infect. Immun. 1978; 20:552-9.Rappoport R.S., Bonde G., McCann T. et al. Development of a purified cholera toxoid. Infect. Immun. 1974; 9:304-17.Rappoport R.S., Bonde G., McCann T. et al. Development of a purified cholera toxoid. Infect. Immun. 1974; 9:304-17.Smirnova N., Zadnova S.P., Toporkov A.V., Kutyrev V.V. Construction of strains producting the main protective antigens of Vibrio cholerae based on altered expression of the global regulatory gene toxR. In: New Research on Biotechnology and Medicine. A.M.Egorov, G.E.Zaikov, editors. New York; 2006. P. 177-88.Smirnova N., Zadnova S.P., Toporkov A.V., Kutyrev V.V. Construction of strains producting the main protective antigens of Vibrio cholerae based on altered expression of the global regulatory gene toxR. In: New Research on Biotechnology and Medicine. A.M.Egorov, G.E.Zaikov, editors. New York; 2006. P. 177-88.Sun D., Mekalanos J.J., Taylor R.K. Antibodies directed against the toxin-coregulated pilus isolated from Vibrio cholerae provide protection in the infant mouse experimental cholera model. J. Infect. Dis. 1990; 161:1231-6.Sun D., Mekalanos J.J., Taylor R.K. Antibodies directed against the toxin-coregulated pilus isolated from Vibrio cholerae provide protection in the infant mouse experimental cholera model. J. Infect. Dis. 1990; 161:1231-6.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.