Изучение иммунной прослойки к возбудителю холеры у лиц, проживающих на территории Гвинейской Республики

Для достоверной оценки наличия иммунной прослойки к возбудителю холеры необходимым является определение уровня специфических антител в сыворотке крови людей. для выявления специфических противохолерных антител применяют серологические методы, направленные на выявление агглютинирующих, вибриоцидных и токсиннейтрализующих антител. в то же время указанные методы имеют ряд существенных недостатков, которые могут быть устранены при использовании биологических микрочипов, направленных на выявление специфических антител. Цель работы - оценка уровня формирования иммунной прослойки к возбудителю холеры у лиц, проживающих на территории Гвинейской Республики, с использованием биологического микрочипа. Материалы и методы. Исследовано 190 образцов сывороток крови людей, проживающих на территории трех провинций Гвинейской Республики. Образцы собраны в период с мая по октябрь 2016 г. Выявление специфических антител к антигенам V. cholerae осуществляли с использованием иммуночипа в непрямом анализе. В качестве специфических антигенов для сенсибилизации поверхности иммуночипа использовали О-антигены V. cholerae и холерный токсин. Результаты и обсуждение. В результате анализа с применением иммуночипа специфические антитела к О1 и О139 антигенам холерных вибрионов ни в одном из случаев не выявлены. В то же время в 66 исследованных пробах (34,7 %) обнаружены антитела к холерному токсину, из них в 59 образцах - в титре 1:100, в одном - в титре 1:400, в двух - в титре 1:800, в четырех образцах - в титре 1:1600. Отмечено отсутствие статистически значимых различий в зависимости от половой принадлежности обследованных и территории их проживания. Полученные результаты можно объяснить тем, что антитела к холерному токсину циркулируют в сыворотке крови человека более длительное время, чем антитела, специфичные к О1 и О139 антигенам холерного вибриона. Проведенные исследования продемонстрировали наличие в сыворотках антител класса IgG, комплементарных к холерному токсину, что может свидетельствовать как о контакте населения с возбудителем холеры, так и о формировании поствакцинального иммунитета.

1. Москвитина Э.А., Янович Е.Г., Кругликов В.Д., Титова С.В., Куриленко М.П., Пичурина Н. Л., Водопьянов А.С., Левченко Д.А., Иванова С.М., Водопьянов С.О., Олейников И.П. Прогноз по холере на 2019 г. на основании анализа эпидемиологической обстановки в мире, СНГ и Госсии в 2009-2018 гг. Проблемы особо опасных инфекций. 2019; 1:64-73. DOI: 10.21055/0370-1069-2019-1-64-73.

2. World Health Organization. Wkly Epidemiol. Rec. 2018, 93(38):489-500. [Электронный ресурс] URL: https://apps.who.inmris/bitstream/handle/10665/274654/WER9338.pdf7ua=1 (дата обращения 15.07.2019).

3. Grout L., Martinez-Pino I., Ciglenecki I. Keita S., Diallo A.A., Traore B., Delamou D., Toure O., Nicholas S., Rusch B., Staderini N., Serafini M., Grais R.F., Luquero F.J. Pregnancy Outcomes after a Mass Vaccination Campaign with an Oral Cholera Vaccine in Guinea: A Retrospective Cohort Study. PLoS Negl. Trop. Dis. 2015; 9(12):e0004274. DOI: 10.1371/journal.pntd.0004274.

4. Гришин Е.В., Валякина Т.И. Получение моноклональных антител к холерному токсину и термолабильному энтеротоксину Е. rnli для разработки биплексного анализа токсинов в объектах окружающей среды. Biotechnologia Acta. 2013; 6(4):19-32. DOI: 10.15407/biotech6.04.019.

5. Levine M.M., Young C.R., Hughes T.P., O’Donnel S., Black R.E., Clements M.L., Robins-Browne R., Lim Y.-L. Duration of serum antitoxin response following Vibrio cholerae infection in North Americans: relevance for seroepidemiology. Am. J. Epidemiol. 1981; 114(3):348-54. DOI: 10.1093/oxfordjournals.aje.a113201.

6. Методические указания. МУК 4.2.2315-08 «Серологические методы в диагностике холеры». Дополнение к МУК 4.2.2218-07 «Лабораторная диагностика холеры». Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом российской Федерации Г.Г. Онищенко 18 января 2008 года.

7. Онищенко Г.Г., Брагина И.В., Ежлова Е.Б., Демина Ю.В., Шеенков Н.В., Балахонов С.В., Урбанович Л.Я., Ганин B.С., Миронова Л.В., Загоскина Т.Ю., Носкова О.А., Куликалова Е.С., Басов Е.А., Токарева Л.Е., Тайкова Т.С., Долгова Т.М. руководство к практическим занятиям по лабораторной диагностике холеры. Иркутск; 2012. 92 с.

8. Кэтти Д., редактор. Антитела. Методы. М.: Мир; 1991. Т 1. 287 с.

9. Yuan J., Wang E., Fox B. A Immune Monitoring Technology Primer: protein microarray («seromics»). J. Immunother. Cancer. 2016; 4:2. DOI: 10.1186/s40425-016-0106-4.

10. Уткин Д.В., Осина Н.А., Киреев М.Н., Спицын А.Н., Щербакова С.А. Биологический микрочип для выявления и многопараметрического анализа противохолерных антител. Патент рф № 2528099, опубл. 10.09.2014 г. Бюл. № 25.

11. Уткин Д.В., Осина Н.А., Спицын А.Н., Киреев М.Н., Громова О.В., Захарова Т.Л., Найденова Е.В., Куклев В.Е. разработка биочипа для выявления противохолерных антител в сыворотке крови человека. Клиническая лабораторная диагностика. 2015; 60(2):50-3.

12. Rebaudet S., Mengel M.A., Koivogui L., Moore S., Mutreja A., Kande Y., Yattara O., Keita V.S., Njanpop-Lafourcade B.-M., Fournier P.-E., Garnotel E., Keita S., Piarroux R. Deciphering the Origin of the 2012 Cholera Epidemic in Guinea by Integrating Epidemiological and Molecular Analyses. PLoS Negl. Trop. Dis. 2014; 8(6):e2898. DOI: 10.1371/journal.pntd.0002898

13. World Health Organization. Cholera. Wkly Epidemiol. Rec. 2014; 89(31):345-56. [Электронный ресурс]. URL: http://www.who.int/wer/2014/wer8931.pdf?ua=1 (дата обращения 15.07.2019).

14. Martinez-Pino I., Luquero F.J., Sakoba K., Sylla S., Haile M., Grais R.F., Ciglenecki I., Quilici M.-L., Page A.-L.Use of a Cholera Rapid Diagnostic Test during a Mass Vaccination Campaign in Response to an Epidemic in Guinea, 2012. PLoS Negl. Trop. Dis. 2013; 7(8):e2366. DOI: 10.1371/journal.pntd.0002366.

15. Гржибовский А.М. Доверительные интервала: для частот и долей. Экология человека. 2008; 5:57-60.