Использование питательной среды на основе сухого гидролизата казеина в производстве холерной бивалентной химической вакцины

Цель работы – подбор стандартной основы, содержащей сухой гидролизат казеина, для приготовления питательной среды, используемой в производстве вакцины холерной бивалентной химической при глубинном культивировании штаммов холерного вибриона в биореакторах. Материалы и методы. В работе использованы штаммы Vibrio cholerae О1 классического биовара: 569В серовара Инаба и М-41 серовара Огава. В исследование взяты две сухие основы среды: ферментативный гидролизат казеина тип I Himedia (Индия) и панкреатический гидролизат казеина ГНЦ ПМБ (Россия). В качестве контроля использована среда лабораторного приготовления РосНИПЧИ «Микроб». Глубинное культивированине проводилось в биореакторах в течение (9±1) ч с аэрацией и автоматической подкормкой глюкозой и аммиаком. Продукцию протективных антигенов определяли иммунохимическими и биологическими методами. Результаты и обсуждение. Показано, что глубинное культивирование производственных штаммов холерного вибриона на питательных средах, приготовленных на всех взятых в исследование основах, обеспечивает синтез протективных антигенов, показатели которых соответствуют требованиям нормативной документации. Более стандартные и высокие показатели целевого продукта обеспечивают культивирование штаммов-продуцентов на питательной среде с основой из сухого ферментативного гидролизата казеина, содержащей (1,5±0,1) г/л аминного азота для штамма V. cholerae М-41 и (2±0,1) г/л аминного азота для штамма V. cholerae 569В. Переход на использование стандартных сухих белковых компонентов сред культивирования не снижает качества вакцины холерной химической, но позволяет снизить ее себестоимость и сократить продолжительность технологического процесса.

1. Ali M., Nelson A.R., Lopez A.L., Sack D.A. Updated global burden of cholera in endemic countries. PloSNegl. Trop. Dis. 2015; 9(6):e0003832. DOI: 10.1371/journal.pntd.0003832.

2. World Health Organization. Cholera, 2015. Wkly. Epidemiol. Rec. 2016; 91(38):433–40.

3. World Health Organization. Cholera. 2017. Wkly. Epidemiol. Rec. 2018; 93(38):489–500.

4. Горяева.А., Саяпинал.В., Обухов Ю.И., Бондарев В.П. Эффективность и безопасность вакцин для профилактики холеры. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2018; 18(1):42–9. DOI: 10.30895/2221-996X-2018-18-1-42-49.

5. Государственная фармакопея Российской Федерации XIV издание. Москва; 2018. T. 1–4.

6. Анисимов П.И., Адамов А.К., Джапаридзе М.Н., Наумов А.В., Никитина Г.П. Способ производства вакцины для профилактики холеры. Патент РФ № 2080121, опубл. 27.05.1997 г.

7. Джапаридзе М.Н., Наумов А.В., Никитина Г.В. Оральная химическая вакцина из гипертоксигенных штаммов КМ76 Инаба и КМ68 Огава возбудителя Холеры. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1991; 68(4):31–6.

8. Онищенко Г.Г., Кутырев В.В., Щуковская Т.Н., Смирнова Н.И., Никифоров А.К., Еремин С.А., Топорков В.П. Специфическая профилактика холеры в современных условиях. Проблемы особо опасных инфекций, 2011; 1:5–12. DOI: 10.21055/0370-1069-2011-1(107)-5-12.

9. Еремин С.А., Алешина Ю.А., Комиссаров А.В., Громова О.В., Васин Ю.Г., Никифоров А.К., Ливанова Л.Ф., Волох О.А., Лобовикова О.А., Бронникова В.С. Методы и технологии культивирования холерного вибриона (обзор). Проблемы особо опасных инфекций. 2013; 4:95–101. DOI: 10.21055/0370-1069-2013-4-95-101.

10. Еремин С.А., Комиссаров А.В., Ливанова Л.Ф., Белякова Н.И., Волох О.А., Васин Ю.Г., Никифоров А.К. Повышение эффективности процесса культивирования производственных штаммов Vibrio cholerae – продуцентов протективных антигенов в производстве вакцины холерной химической таблетированной. в кн.: Холера и патогенные для человека вибрионы. Ростов-н/Д: Дониздат; 2013. C. 241–3.

11. Шагинян И.А., Маракуша Б.М. Модификация метода пассивного иммунного гемолиза на плотной среде для выявления продукции термолабильных энтеротоксинов штаммами холерных вибрионов и кишечной палочки. Журнал микробиологи, эпидемиологи и иммунологии.1983; 60(2):92–6.

12. Craig J.P., Yamamoto к., TakedaY., Miwatani T. Production of cholera-like toxin by V. cholerae non-O1 strains isolated from environment. Infect. Immun. 1981; 34(1):90–7. PMID: 7298194. PMCID: PMC350825.