Экспериментальное обоснование возможности использования среды на основе ферментативного гидролизата фибрина для получения компонентов холерной химической вакцины

Цель работы – экспериментально обосновать возможность использования питательной среды на основе ферментативного гидролизата фибрина для получения специфических компонентов холерной химической вакцины: холерогена-анатоксина и О-антигена.
Материалы и методы. В работе использовали производственные штаммы Vibrio cholerae 569В и V. cholerae М-41. Глубинное малообъемное культивирование проводили на лабораторном ферментере в течение 8 ч с автоматическим поддержанием параметров культивирования и подкормкой глюкозой на питательной среде на основе ферментативного гидролизата фибрина с показателем рН (8,0±0,1), содержащей (1,0±0,1) г/л аминного азота. Холероген-анатоксин и О-антигены получали из детоксицированных формалинизированных центрифугатов культуральных жидкостей. Специфическую активность антигенов V. cholerae на этапах культивирования и выделения определяли иммунохимическими методами. Изготовление готовой лекарственной формы холерной вакцины и покрытие таблеток кишечнорастворимой оболочкой проводили в соответствии с нормативной документацией.
Результаты и обсуждение. Показано, что культивирование на среде на основе ферментативного гидролизата фибрина обеспечивает стабильный рост биомассы производственных штаммов V. cholerae с высоким уровнем специфической активности антигенов. Сравнительный анализ основных свойств готовой лекарственной формы лабораторных серий с коммерческой серией холерной химической вакцины показал соответствие требованиям нормативной документации. Полученные результаты позволили сделать вывод о возможности применения питательной среды на основе ферментативного гидролизата фибрина для культивирования производственных штаммов и получения специфических компонентов холерной вакцины. 

1. Cholera vaccines: WHO position paper – August 2017. [Электронный ресурс]. URL: http://apps.who.int/iris/bitstream/10665/258764/1/WER9234-477-498.pdf.

2. WHO – Weekly Epidemiological Record. Cholera, 2020. 17 September 2021. No. 37. Vol. 96. P. 445–60. [Электронный ресурс]. URL: https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/345267/WER9637-eng-fre.pdf.

3. Еремин С.А., Алешина Ю.А., Комиссаров А.В., Громова О.В., Васин Ю.Г., Никифоров А.К., Ливанова Л.Ф., Волох О.А., Лобовикова О.А., Бронникова В.С. Методы и технологии культивирования холерного вибриона (обзор). Проблемы особо опасных инфекций. 2013; 4:95–101. DOI: 10.21055/0370-1069-2013-4-95-101.

4. Holmgren J. Modern history of cholera vaccines and the pivotal role of icddr,b. J. Infect. Dis. 2021; 224(12 Suppl. 2):S742– S748. DOI: 10.1093/infdis/jiab423.

5. Shaikh H., Lynch J., Kim J., Excler J.L. Current and future cholera vaccines. Vaccine. 2020; 38(Suppl. 1):A118–A126. DOI: 10.1016/j.vaccine.2019.12.011.

6. Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV изд. М.; 2018.

7. Антонычева М.В., Нижегородцев С.А., Еремин С.А., Аленкина Т.В., Шульгина И.В., Вахрушина Н.И., Белоусов А.Д., Жулидов И.М., Никифоров А.К. Питательная среда для глубинного культивирования холерного вибриона. Патент РФ № 2425866, опубл. 10.08.2011. Бюл. № 22.

8. Дуракова О.С., Громова О.В., Ливанова Л.Ф., Авдеева Н.Г., Самохвалова Ю.И., Гаева А.В., Киреев М.Н., Волох О.А. Современные подходы к выделению и очистке холерного тесттоксина. Бактериология. 2018; 3(1):59–62. DOI: 10.20953/2500-1027-2018-1-59-62.

9. Комиссаров А.В., Никифоров А.К., Алешина Ю.А., Еремин С.А., Васин Ю.Г., Клокова О.Д., Белякова Н.И., Крайнова А.Г. Способ концентрирования нативных холерогена- анатоксина и О-антигена Vibrio cholerae О1 классического биовара штамма 569 В серовара Инаба. Патент РФ № 2451522, опубл. 27.05.2012. Бюл. № 15.

10. Дуракова О.С., Громова О.В., Киреев М.Н., Воробьева С.А., Клокова О.Д., Ливанова Л.Ф., Белякова Н.И., Волох О.А. Применение дот-иммуноанализа для определения специфической активности антигенов в производстве холерной вакцины. Вестник биотехнологии и физико-химической биологии им. Ю.А. Овчинникова. 2018; 14(4):10–3.