Особенности идентификации Burkholderia mallei и Burkholderia pseudomallei с помощью микробиологического анализатора Vitek 2 Compact 30

Для идентификации B. pseudomallei и B. mallei в лабораторной практике широко применяется автоматизированная система Vitek 2, основанная на сравнении биохимического профиля исследуемой бактериальной культуры с имеющейся базой данных.

Цель работы. Проведение расширенной фенотипической характеристики штаммов возбудителей сапа и мелиоидоза, поддерживаемых в коллекции ФКУЗ «Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт» и анализа вариаций их биохимических профилей с использованием системы Vitek 2.

Материалы и методы. С помощью Vitek 2 (bioMerieux, Франция) проанализированы биохимические свойства 52 коллекционных штаммов B. pseudomallei и B. mallei, выращенных на L-агаре (Difco, США) и триптиказо-соевом агаре – ТСА (HiMedia, Индия).

Выводы и результаты. Большинство исследованных штаммов (31 из 40 B. pseudomallei и 8 из 12 B. mallei) идентифицированы с приемлемой для определения видовой принадлежности вероятностью (90–99 %). Процент правильной идентификации B. pseudomallei и B. mallei был выше при культивировании на L-агаре, чем на ТСА . В связи с вариабельностью биохимических признаков, отдельные штаммы показали нетипичные для своего вида результаты по определенным тестам (для штаммов B. pseudomallei – отсутствие активности β-N-ацетилглюкозаминидазы, β-N-ацетилгалактозаминидазы и способность к утилизации D-целлобиозы; для штаммов B. mallei – отсутствие активности L-пролинариламидазы и тирозинариламидазы, наличие активности глицинариламидазы, способность к утилизации сахарозы и D-трегалозы), что привело к их неправильной идентификации. Вероятность ошибочной диагностики микроорганизмов рода Burkholderia диктует необходимость дополнения идентификационной базы бактериологического анализатора Vitek 2 данными по биохимическим характеристикам штаммов, имеющих особенности в профиле.

1. М олчанова Е.В., Агеева Н.П. Использование фитопатогенного эффекта для изучения вирулентности Burkholderia. Бюл. эксп. биол. мед. 2014; 158(10):522–5.

2. Currie B.J., Dance D.A., Cheng A.C. The global distribution of Burkholderia pseudomallei and melioidosis: an update. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 2008; 102(1):S1–4. DOI: 10.1016/S0035-9203(08)70002-6.

3. Dance D.A.B. Melioidosis as an emerging global problem. Acta Tropica. 2000; 74:115–9. DOI: 10.1016/S0001- 706X(99)00059-5.

4. Deepak R.N., Crawley B., Phang E. Burkholderia pseudomallei identification: a comparison between the API 20NE and Vitek 2 GN systems. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 2008; 102(1):S42–4.DOI: 10.1016/S0035-9203(08)70012-9.

5. Gilad J., Harary I., Dushnitsky T., Schwartz D., Amsalem Y. Burkholderia mallei and Burkholderia pseudomallei as bioterrorism agents: national aspects of emergency preparedness. Isr. Med. Assoc. J. 2007; 9:499–503.

6. Gilad J., Schwartz D., Amsalem Y. Clinical features and laboratory diagnosis of infection with the potential bioterrorism agents Burkholderia mallei and Burkholderia pseudomallei. Int. J. Biomed. Sci. 2007; 3(3):144–52.

7. Kiratisin P., Santanirand P., Chantratita N., Kaewdaeng S. Accuracy of commercial systems for identification of Burkholderia pseudomallei versus Burkholderia cepacia. Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 2007; 59:277–81. DOI: 10.1016/j.diagmicrobio.2007.06.013.

8. Lowe P., Haswell H., Lewis K. Use of various common isolation media to evaluate the new Vitek 2 colorimetric GN card for identification of Burkholderia pseudomallei. J. Clin. Microbiol. 2006;44:854–6. DOI: 10.1128/JCM.44.3.854-856.2006.

9. Masoud H., Ho M., Schollaardt T., Perry M.B. Characterization of the capsular polysaccharide of Burkholderia (Pseudomonas) pseudomallei 304b. J. Bacteriol. 1997; 179(18):5663–9.

10. Podin Y., Kaestli M., McMahon N., Hennessy J., Ngian H.U., Wong J.S., Mohana A., Wong S.C., William T., Mayo M., Baird R.W., Currie B.J. Reliability of automated biochemical identification of Burkholderia pseudomallei is regionally dependent. J. Clin. Microbiol. 2013; 51(9):3076. DOI: 10.1128/JCM.01290-13.

11. Puthucheary S.D., Vadivelu J. Human melioidosis. Singapore: Singapore University Press; 2002. 58 р.

12. Van Zandt K.E., Greer M.T., Gelhaus H.C. Glanders: an overview of infection in humans. Orphanet. J. Rare Dis. 2013; 8:131. DOI: 10.1186/1750-1172-8-131.

13. Yakandawala N., Gawande P.V., LoVetri K., Cardona S.T., Romeo T., Nitz M., Madhyastha S. Characterization of the poly-1,6- Nacetylglucosamine polysaccharide component of Burkholderia biofilms. Appl. Environ. Microbiol. 2011; 77(23):8303–9. DOI: 10.1128/ AEM.05814-11.

14. Zong Z., Wang X., Deng Y., Zhou T. Misidentification of Burkholderia pseudomallei as Burkholderia cepacia by the Vitek 2 system. J. Med. Microbiol. 2012; 61:1483–4. DOI: 10.1099/jmm.0.041525-0.