Совершенствование технологии получения живой туляремийной вакцины


https://doi.org/10.21055/0370-1069-2016-3-81-84

Полный текст:


Аннотация

Цель исследования. Разработка и апробация новых биотехнологических приемов в технологии получения живой туляремийной вакцины.

Материалы и методы: Штамм Francisella tularensis 15 НИИЭГ использовали в качестве штамма-продуцента, штамм F. tularensis 503 – в качестве тест-заражающего. Проводили культивирование штамма-продуцента на плотных и жидких питательных средах, тангенциальную ультрафильтрацию на ультра-микрофильтрационной установке «Вива-флоу», лиофилизацию в сублимационной сушильной установке FreeZone 2,5 L.

Результаты и обсуждение. Использование сконструированной жидкой питательной среды на основе ферментативного гидролизата фибрина и применение глубинного культивирования штамма-продуцента позволило увеличить выход биомассы. На этапе концентрирования культуры туляремийного микроба методом микрофильтрации через мембраны с размером пор 0,2 мкм в режиме тангенциального потока жидкости увеличено содержание микробных клеток и проведено освобождение от остатков питательной среды. Проведенный сравнительный анализ полученных по экспериментальной технологии лабораторных серий вакцины с коммерческим препаратом вакцины туляремийной живой показал их соответствие нормативным свойствам. Установлено, что применение новой жидкой питательной среды, глубинного культивирования, способов концентрирования и сепарации биомассы не оказывает отрицательного влияния на основные свойства живой туляремийной вакцины и в дальнейшем позволит в значительной степени повысить технологичность производства.


Об авторах

О. А. Волох
ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»
Россия

Российская Федерация, 410005, Саратов, ул. Университетская, 46



А. В. Комиссаров
ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»
Россия
Российская Федерация, 410005, Саратов, ул. Университетская, 46


М. В. Антонычева
ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»
Россия
Российская Федерация, 410005, Саратов, ул. Университетская, 46


О. А. Лобовикова
ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»
Россия
Российская Федерация, 410005, Саратов, ул. Университетская, 46


Н. Г. Авдеева
ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»
Россия
Российская Федерация, 410005, Саратов, ул. Университетская, 46


Н. И. Вахрушина
ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»
Россия
Российская Федерация, 410005, Саратов, ул. Университетская, 46


Н. П. Миронова
ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»
Россия
Российская Федерация, 410005, Саратов, ул. Университетская, 46


Д. Н. Бибиков
ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»
Россия
Российская Федерация, 410005, Саратов, ул. Университетская, 46


А. К. Никифоров
ФКУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»
Россия
Российская Федерация, 410005, Саратов, ул. Университетская, 46


Список литературы

1. Волох О.А., Антонычева М.В., Авдеева Н.Г., Вахрушина И.И., Никифоров А.К. Питательная среда для глубинного культивирования туляремийного микроба. Патент 2518282 РФ. Бюл. № 16, опубл. 10.06.2014.

2. Волох О.А., Комиссаров А.В., Никифоров А.К., Самохвалова Ю.И., Авдеева Н.Г. Способ получения концентрата микробных клеток для получения живой туляремийной вакцины. Патент 2528878 РФ. Бюл. № 26, опубл. 20.09.2014

3. Кисличкин Н.Н., Кисличкина О.Н. Живая туляремийная вакцина Nik-sp. Francisella tularensis. Патент 2308969 РФ. Бюл. № 30, опубл. 27.10.07.

4. Мещерякова И.С. Туляремия. В кн.: Природная очаговость болезней: исследования института им. Н .И.ГамалеиРАМН . М.; 2003. С. 137–60.

5. Олсуфьев Н.Г. Таксономия, микробиология и лабораторная диагностика возбудителя туляремии. М.: Медицина; 1975. 190 с.

6. Павлов В.М., Дятлов И.А. Молекулярно-генетические исследования бактерий рода Francisella и их прикладное значение. М.: ООО «ТиРу»; 2012. 267 с.

7. Шепелёв И.А., Волох О.А., Еремин С.А., Авдеева Н.Г., Кузнецова Е.М. Способ получения биомассы туляремийного микроба. Патент 2451743 РФ. Бюл. № 15, опубл. 27.05.2012.

8. Barry E.M., Cole L.E., Santiago A.E. Vaccine against tularemia. Hum. Vaccine. 2009; 5(12):832–8. DOI: 10.4161/hv.10297.

9. Conlan J.W., Oyston P.C.F. Vaccines against Francisella tularensis. Ann. NY Acad. Sci. 2007; 1105:325–50. DOI: 10.1196/ annals.1409.012.

10. Forslund A.L., Kuoppa., Svensson K., Salomonsson E., Johansson A., Bystro M., Oyston P.C.F., Michell S.L., Titball R.W. Direct repeat-mediated deletion of a type IV pilin gene results in major virulence attenuation of Francisella tularensis. Mol. Microbiol. 2006; 59:1818–30. DOI: 10.1111/j.1365-2958.2006.05061.x.

11. Jia Q., Lee B.Y., Bowen R. Francisella tularensis live vaccine strain (LVS) mutant with a deletion in capB, encoding a putative capsular biosynthesis protein, is significantly more attenuated than LVS yet induces potent protective immunity in mice against F. tularensis challenge. Infect. Immun. 2010; 78(10):4341–55. DOI: 10.1128/ IAI.00192-10.

12. Marohn M.E., Barry E.M. Live attenuated tularemia vaccines: recent developments and future goals. Vaccine. 2013; 31(35):3485–91. DOI: 10.1016/j.vaccine.2013.05.096.

13. Reed D.S., Smith L’K.P., Cole K.S., Santiago A.E., Mann B.J., Barry E.M. Live attenuated mutants of Francisella tularensis protect rabbits against aerosol challenge with a virulent type A strain. Infect. Immun. 2014; 2(5):2098–2105. DOI: 10.1128/IAI.01498-14.


Дополнительные файлы

Для цитирования: Волох О.А., Комиссаров А.В., Антонычева М.В., Лобовикова О.А., Авдеева Н.Г., Вахрушина Н.И., Миронова Н.П., Бибиков Д.Н., Никифоров А.К. Совершенствование технологии получения живой туляремийной вакцины. Проблемы особо опасных инфекций. 2016;(3):81-84. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2016-3-81-84

For citation: Volokh O.A., Komissarov A.V., Antonycheva M.V., Lobovikova O.A., Avdeeva N.G., Vakhrushina N.I., Mironova N.P., Bibikov D.N., Nikiforov A.K. Enhancement of the Technology for Live Tularemia Vaccine Production. Problems of Particularly Dangerous Infections. 2016;(3):81-84. (In Russ.) https://doi.org/10.21055/0370-1069-2016-3-81-84

Просмотров: 257

Обратные ссылки

  • Обратные ссылки не определены.


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 0370-1069 (Print)
ISSN 2658-719X (Online)