Kлонирование и экспрессия гена ace Vibrio cholerae в Escherichia coli
https://doi.org/10.21055/0370-1069-2012-2(112)-39-42
Аннотация
Ген accessory cholera enterotoxin (ace) Vibrio cholerae, амплифицированный с помощью ПЦР, клонирован в составе векторной плазмиды pQE30 по сайтам BamHI-HindIII. Экспрессия гена происходит под контролем Т5-промотора. Штамм Escherichia coli M15[pREP4]pAce90 (КМ 194), содержащий рекомбинантную плазмиду, является активным продуцентом белка 6His-Ace, который обладает биологической активностью на модели мышей-сосунков, вызывая накопление жидкости в кишечнике. Продукт присутствует в клетках кишечной палочки в виде телец включения. Сконструированный штамм-продуцент может быть использован для получения препаратов Ace в целях изучения его значимости как фактора патогенности холерных вибрионов.
Ключевые слова
616.932:575
Об авторах
Е. В. Монахова
Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институт
Россия
Россия
Р. В. Писанов
Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институт
Россия
Россия
Л. М. Веркина
Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институт
Россия
Россия
А. В. Миронова
Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институт
Россия
Россия
Список литературы
1. Манниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии: Молекулярное клонирование. М.: Мир; 1984. 480 с.
2. Монахова Е.В., Ломов Ю.М., Михась Н.К., Писанов Р.В. Структура и изменчивость неполного СТХ-элемента холерных вибрионов. Пробл. особо опасных инф. 2007; 1(93):58-61.
3. Монахова Е.В., Ломов Ю.М., Писанов Р.В., Алексеева Л.П., Маркина О.В., Миронова А.В. и др. Клонирование гена цитотонического фактора Cef (CHO-cell elongating factor) Vibrio cholerae в Escherichia coli и его экспрессия под контролем PBAD-промотора. Биотехнология. 2005; 5:12-8.
4. Монахова Е.В., Ломов Ю.М., Писанов Р.В., Веркина Л.М., Миронова А.В. Рекомбинантная плазмида, экспрессирующая клонированный ген ace Vibrio cholerae, и штамм Escherichia coli - продуцент accessory cholera enterotoxin Vibrio cholerae. Патент РФ № 2313576, опубл. 27.12.2007.
5. Монахова Е.В., Миронова А.В., Алексеева Л.П., Мазрухо А.Б. Изучение вирулентности холерных вибрионов, содержащих pre-CTXφ: генотипическая и фенотипическая характеристика. Журн. микробиол. эпидемиол. и иммунобиол. 2008; 4:27-32.
6. Faruque S.M., Albert M.J., Mekalanos J.J. Epidemiology, genetics and ecology of toxigenic Vibrio cholerae. Microbiol. Mol. Biol. Rew. 1998; 62:1301-14.
7. Somarny W.M., Mariana N.S., Neela V., Rozita R., Raha A.R. Optimization of parameters for accessory cholera enterotoxin (Ace) protein expression. J. Med. Sci. 2002; 2:74-6.
8. Somarny W.M., Mariana N.S., Rozita R., Raha A.R. Cloning and expression of Vibrio cholerae virulence gene, accessory cholera enterotoxin (ace). Southeast Asian J. Trop. Med. Public Health 2004; 35:856-62.
9. Trucksis M., Conn T.L., Wasserman S.S., Sears C.L. Vibrio cholerae ACE stimulates Ca+-dependent Cl-/HCO3- secretion in T84 cells in vitro. Am. J. Physiol. Cell Physiol. 2000; 279:567-77.
10. Trucksis M., Conn T.L., Fasano A., Kaper J.B. Production of Vibrio cholerae accessory cholera enterotoxin (Ace) in the yeast Pichia pastoris. Infect. Immun. 1997; 65:4984-8.
11. Trucksis M., Galen G.E., Michalski J., Fasano A., Kaper J. B. Accessory cholera enterotoxin (Ace), the third toxin of a V. cholerae virulence cassette. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993; 90:5267-71.
12. Waldor M.K., Mekalanos J.J. Lysogenic conversion by a filamentous phage encoding cholera toxin. Science. 1996; 272:1910-4.
Рецензия
Для цитирования:
Монахова Е.В., Писанов Р.В., Веркина Л.М., Миронова А.В. Kлонирование и экспрессия гена ace Vibrio cholerae в Escherichia coli. Проблемы особо опасных инфекций. 2012;(2(112)):39-42. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2012-2(112)-39-42
For citation:
Monakhova E.V., Pisanov R.V., Verkina L.M., Mironova A.V. Cloning and Expression of ace Gene of Vibrio cholerae in Escherichia coli. Problems of Particularly Dangerous Infections. 2012;(2(112)):39-42. (In Russ.) https://doi.org/10.21055/0370-1069-2012-2(112)-39-42
Просмотров: 397
Послать статью по эл. почте 