Preview

Проблемы особо опасных инфекций

Расширенный поиск

Качественные показатели экспериментальных бруцеллезных антигенных препаратов, предназначенных для клеточных тестов in vitro

https://doi.org/10.21055/0370-1069-2020-3-83-88

Полный текст:

Аннотация

Для разработки наиболее диагностически информативных методик постановки антиген-стимулированных клеточных тестов in vitro необходим тщательный подбор стимулирующего агента (антигена), обладающего достаточным активирующим потенциалом и обеспечивающим специфичность реакции.

Цель работы – определение качественных показателей экспериментальных серий бруцеллезных антигенных препаратов, предназначенных для клеточных тестов in vitro.

Материалы и методы. Для проведения исследований получали антигенные комплексы бруцеллезного микроба – на основе вакцинных штаммов трех эпидемически значимых видов Brucella spp. (B. abortus, B. melitensis, B. suis). Количественное определение белков экспериментальных серий полученных препаратов WsAg и PPBC проводили методом специфической флуориметрии. Исследование белкового состава препаратов проводили методом капиллярного электрофореза. Качественный состав определяли методом ионообменной жидкостной хроматографии с рефрактометрической детекцией.

Результаты и обсуждение. В результате исследований определены физико-химические характеристики, изучены хроматографические профили и состав белковых фракций, а также проведена апробация изготовленных экспериментальных серий бруцеллезных антигенных препаратов. Анализируя охарактеризованный белковый и полисахаридный состав полученных образцов WsAg, можно сделать заключение о невозможности использования препарата WsAg для клеточных тестов, так как экспериментально доказана вероятность проявления неспецифических реакций лимфоцитов in vitro. В свою очередь, комплексный бруцеллезный антигенный препарат PPBC обладает выраженной специфической активностью и специфичностью в условиях in vitro и имеет перспективы использования при разработке методических подходов для лабораторной диагностики бруцеллеза и оценке фактической привитости контингентов риска после вакцинации. Полученные характеристики позволят обеспечить надлежащее качество при производстве разработанного экспериментального препарата PPBC,  предназначенного для клеточных тестов in vitro, с учетом современных правил валидации и стандартизации. 

Об авторах

C. А. Курчева
ФКУЗ «Ставропольский противочумный институт»
Россия
Российская Федерация, 355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15


Д. А. Ковалев
ФКУЗ «Ставропольский противочумный институт»
Россия
Российская Федерация, 355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15


Д. Г. Пономаренко
ФКУЗ «Ставропольский противочумный институт»
Россия
Российская Федерация, 355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15


Ю. В. Сирица
ФКУЗ «Ставропольский противочумный институт»
Россия
Российская Федерация, 355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15


М. В. Костюченко
ФКУЗ «Ставропольский противочумный институт»
Россия
Российская Федерация, 355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15


А. Г. Кошкидько
ФКУЗ «Ставропольский противочумный институт»
Россия
Российская Федерация, 355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15


И. В. Жарникова
ФКУЗ «Ставропольский противочумный институт»
Россия
Российская Федерация, 355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15


Е. Л. Ракитина
ФКУЗ «Ставропольский противочумный институт»
Россия
Российская Федерация, 355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15


О. В. Логвиненко
ФКУЗ «Ставропольский противочумный институт»
Россия
Российская Федерация, 355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15


А. М. Жиров
ФКУЗ «Ставропольский противочумный институт»
Россия

Российская Федерация, 355035, Ставрополь, ул. Советская, 13–15



Список литературы

1. Byndloss M.X., Tsolis R.M. Brucella spp. virulence factors and immunity. Annual Review of Animal Biosciences. 2016; 4:111– 27. DOI: 10.1146/annurev-animal-021815-111326.

2. Głowacka P., Żakowska D., Naylor K., Niemcewicz M., Bielawska-Drózd A. Brucella – virulence factors, pathogenesis and treatment. Polish Journal of Microbiology. 2018; 67(2):151–61. DOI: 10.21307/pjm-2018-029.

3. Amjadi O., Rafiei A., Mardani M., Zafari P, Zarifian A. A review of the immunopathogenesis of Brucellosis. Infect. Dis. (Lond). 2019; 51(5):321–33. DOI: 10.1080/23744235.2019.1568545.

4. Smith J.A. Brucella Lipopolysaccharide and pathogenicity: The core of the matter. Virulence. 2018; 9(1):379–82. DOI: 10.1080/21505594.2017.1395544.

5. Avila-Calderón E.D., Flores-Romo L., Sharon W., Donis-Maturano L., Becerril-García M.A., Arreola M.G.A., Reynoso B.A., Güemes F.S., Contreras-Rodríguez A. Dendritic cells and Brucella spp. interaction: the sentinel host and the stealthy pathogen. Folia Microbiol (Praha). 2020; 65(1):1–16. DOI: 10.1007/s12223-019-00691-6.

6. Брико Н.И., Онищенко Г.Г., Покровский В.И. Руководство по эпидемиологии инфекционных болезней. М.: ООО «Издательство «Медицинское информационное агентство»; 2019. Т. 1. 880 с.

7. Костюченко М.В., Пономаренко Д.Г., Ракитина Е.Л., Логвиненко О.В., Санникова И.В., Дейнека Д.А., Голубь О.Г. Перспектива оценки антигенреактивности лимфоцитов in vitro для диагностики острого бруцеллеза. Инфекция и иммунитет. 2017; 7(1):91–6. DOI: 10.15789/2220-7619-2017-1-91-96.

8. Костюченко М.В., Ракитина Е.Л., Пономаренко Д.Г., Логвиненко О.В., Курчева С.А., Бердникова Т.В., Русанова Д.В., Куличенко А.Н. Изучение формирования клеточного поствакцинального иммунитета против бруцеллеза в лимфоцитарных тестах in vitro c использованием экспериментального антигенного комплекса. Медицинская иммунология. 2019; 21(3):547–54. DOI: 10.15789/1563-0625-2019-3-547-554.

9. Пономаренко Д.Г. Новый подход к комплексной оценке иммунобиологической реактивности контингента, подлежащего вакцинации (ревакцинации) против бруцеллеза. Эпидемиология и инфекционные болезни. Актуальные вопросы. 2015; 3:28–31.

10. Budak F., Bal S.H., Tezcan G., Akalın E.H., Yılmaz A., Hız P., Oral H.B. The microRNA expression signature of CD4+ T cells in the transition of brucellosis into chronicity. PLoS One. 2018; 13(6):e0198659. DOI: 10.1371/journal.pone.0198659.

11. Starska K., Głowacka E., Kulig A., Lewy-Trenda I., Bryś M., Lewkowicz P. Prognostic value of the immunological phenomena and relationship with clinicopathological characteristics of the tumor – the expression of the early CD69+, CD71+ and the late CD25+, CD26+, HLA/DR+ activation markers on T CD4+ and CD8+ lymphocytes in squamous cell laryngeal carcinoma. Part II. J. Folia Histochem. Сytobiol. 2011; 49(4):593–603. DOI: 10.5603/FHC.2011.0082.

12. Shipkova M., Wieland E. Surface markers of lymphocyte activation and markers of cell proliferation. Clinica Chimica Acta. 2012; 413(17–18):1338–49. DOI: 10.1016/j.cca.2011.11.006.

13. Shevach E.M., McHugh R.S., Piccirillo C.A., Thornton A.M. Control of T-cell activation by CD4+ CD25+ suppressor T cells. Immunol. Rev. 2001; 182:58–67. DOI: 10.1034/j.1600-065-x.2001.1820104.x.

14. Moreno-Lafont M.C., López-Santiago R., Zumarán-Cuéllar E., Paredes-Cervantes V., López-Merino A., Estrada-Aguilera A., Santos-Argumedo L. Antigen-specific activation and proliferation of CD4+ and CD8+ T lymphocytes from brucellosis patients. Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene. 2002; 96(3):340–7. DOI: 10.1016/s0035-9203(02)90119-7.

15. Coria L.M., Ibañez A.E., Pasquevich K.A., González Cobiello P.L., Frank F.M., Giambartolomei G.H., Cassataro J. Brucella abortus Omp19 recombinant protein subcutaneously co-delivered with an antigen enhances antigen-specific T helper 1 memory responses and induces protection against parasite challenge. Vaccine. 2016; 34(4):430–7. DOI: 10.1016/j.vaccine.2015.12.012.


Для цитирования:


Курчева C.А., Ковалев Д.А., Пономаренко Д.Г., Сирица Ю.В., Костюченко М.В., Кошкидько А.Г., Жарникова И.В., Ракитина Е.Л., Логвиненко О.В., Жиров А.М. Качественные показатели экспериментальных бруцеллезных антигенных препаратов, предназначенных для клеточных тестов in vitro. Проблемы особо опасных инфекций. 2020;(3):83-88. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2020-3-83-88

For citation:


Kurcheva S.A., Kovalev D.A., Ponomarenko D.G., Siritsa Yu.V., Kostyuchenko M.V., Koshkid’ko A.G., Zharnikova I.V., Rakitina E.L., Logvinenko O.V., Zhirov A.M. Qualitative Indicators of Experimental Brucellosis Antigen Preparations Designed for Cellular Tests in vitro. Problems of Particularly Dangerous Infections. 2020;(3):83-88. (In Russ.) https://doi.org/10.21055/0370-1069-2020-3-83-88

Просмотров: 43


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 0370-1069 (Print)
ISSN 2658-719X (Online)