Preview

Проблемы особо опасных инфекций

Расширенный поиск

Анализ результатов клинических испытаний рекомбинантного вируса вакцины, штамм MVA, экспрессирующего гены вируса иммунодефицита человека

https://doi.org/10.21055/0370-1069-2021-3-13-22

Полный текст:

Аннотация

Успехи антиретровирусной терапии (АРТ) превратили синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД) из некогда смертельной болезни в вяло прогрессирующее заболевание, однако его профилактика и терапия попрежнему остаются одной из важнейших социально значимых проблем. Увеличение числа пациентов, инфицированных вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), особенно в США, Южной Америке и Европе, диктует насущную необходимость создания вакцины. Существующая практика вакцинации показала эффективность схем праймирования/бустирования для формирования выраженного иммунного ответа. Поскольку антивекторный иммунитет праймирующего вектора может ограничивать ответ при бустерной вакцинации той же вакциной, при иммунизации используют гетерологичные векторные конструкции. Идеальная вакцина против СПИДа должна не только предотвращать диссеминацию вируса и контролировать его репликацию, но и быть безопасной для ВИЧ-инфицированного контингента. Вакцинация у ВИЧ-инфицированных пациентов применяется для увеличения иммуноопосредованной элиминации персистентно ВИЧ-инфицированных CD4+ Т-клеток на протяжении длительной АРТ с целью удаления латентно инфицированных вирусных резервуаров. В обзоре анализируются результаты испытаний ДНК-анти-ВИЧ/СПИД вакцин и рекомбинантного штамма MVA вируса вакцины, экспрессирующих различные сочетания генов ВИЧ, которые показали безопасность и хорошую переносимость вакцинации как не инфицированными ВИЧ, так и ВИЧ-инфицированными волонтерами. При анализируемых схемах вакцинации индуцировался клеточный и гуморальный иммунные ответы у всех волонтеров. И хотя нет данных о том, что не инфицированные ВИЧ волонтеры, отобранные из групп невысокого поведенческого риска, заболевали СПИДом, на настоящий момент нет оснований, чтобы сделать вывод о достаточности индуцированного иммунного ответа для профилактики риска возможного заражения ВИЧ

Об авторах

Л. Ф. Стовба
ФГБУ «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
Россия

Российская Федерация, 141306, Московская область, г. Сергиев Посад-6, ул. Октябрьская, 11



С. А. Мельников
ФГБУ «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
Россия

Российская Федерация, 141306, Московская область, г. Сергиев Посад-6, ул. Октябрьская, 11



Д. И. Павельев
ФГБУ «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
Россия

Российская Федерация, 141306, Московская область, г. Сергиев Посад-6, ул. Октябрьская, 11



В. Т. Кротков
ФГБУ «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
Россия

Российская Федерация, 141306, Московская область, г. Сергиев Посад-6, ул. Октябрьская, 11



Н. К. Черникова
ФГБУ «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
Россия

Российская Федерация, 141306, Московская область, г. Сергиев Посад-6, ул. Октябрьская, 11



В. Н. Лебедев
ФГБУ «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
Россия

Российская Федерация, 141306, Московская область, г. Сергиев Посад-6, ул. Октябрьская, 11



С. В. Борисевич
ФГБУ «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны Российской Федерации
Россия

Российская Федерация, 141306, Московская область, г. Сергиев Посад-6, ул. Октябрьская, 11



Список литературы

1. Capucci S., Wee E.G., Schiffner T., LaBranche C.C., Bortwick N., Cupo A., Dodd J., Dean H., Sattentau Q., Montefiori D., Klasse P.J., Sanders R.W., Moore J.P., Hanke T. HIV-1-neutralizing antibody induced by simian adenovirus- and poxvirus MVA-vectored BG505 native-like envelope trimers. PLoS One. 2017; 12(8):e0181886.DOI: 10.1371/journal.pone.0181886.

2. Rompay K.K.A., Abel K., Earl P., Kozlowski P.A., Easlick J., Moore J., Buonocore-Buzzelli L., Schmidt K.A., Willson R.L., Simon I., Moss B., Rose J., Marthas M.L. Immunogenicity of viral vector, prime-boost vaccine regimens in infant rhesus macaques: attenuated vesicular stomatitis virus (VSV) and modified vaccinia Ankara (MVA) recombinant SIV vaccines compared to liveattenuated SIV. Vaccine. 2010; 28(6):1481–92. DOI: 10.1016/j.vaccine.2009.11.061.

3. Knudsen M.L., Ljungberg K.,Tatoud R., Weber J., Esteban M., Liljeström P. Alphavirus replicon DNA expressing HIV antigens is an excellent prime for boosting with recombinant modified vaccinia Ankara (MVA) or with HIV gp140 protein antigen. PLoS One. 2015; 10(2):e0117042. DOI: 10.1371/journal.pone.0117042.

4. Hopkins R., Bridgeman A., Joseph J., Gilbert S.C., McShane H., Hanke T. Dual neonate vaccine platform against HIV-1 and M. tuberculosis. PLoS One. 2011; 6(5):e20067. DOI: 10.1371//journal.pone.0020067.

5. Saubi N., Gea-Mallorqui E., Ferrer P., Hurtado C., SanchezUbeda S., Eto Y., Gatell J., Hanke T., Joseph J. Engineering new mycobacterial vaccine design for HIV-TB pediatric vaccine vectored by lysine auxotroph of BCG. Mol. Ther. Methods Clin. Dev. 2014; 1:14017. DOI: 10.1038/mtm.2014.17.

6. Buchbinder S.P., Mehrotra D.V., Duerr A., Fitzgerald D.W., Mogg R., Li D., Gilbert P.B., Lama J.R., Marmor M., Del Rio C., McElrath M.J., Casimiro D.R., Gottesdiener K.M., Chodakewitz J.A., Corey L., Robertson M.N. Efficacy assessment of a cellmediated immunity HIV-1 vaccine (the StepStudy): a double-blind, randomized, placebo-controlled, test-of-concept trial. Lancet. 2008; 372:1881–93. DOI: 10.1016/S0140-6736(08)61591-3.

7. Gray G.E., Allen M., Moodie Z. Churchyard G., Bekker L.G., Nchabeleng M., Mlisana K., Metch B., de Bruyn G., Latka M.H., Roux S., Mathebula M., Naicker N., Ducar C., Carter D.K., Puren A., Eaton N., McElrath M.J., Robertson M., Corey L., Kublin J.G. Safety and efficacy of the HVTN 503/Phambili study of a cladeB-based HIV-1 vaccine in South Africa: a double-blind, randomized, placebo-controlled, test-of-concept phase 2b study. Lancet Infect. Dis. 2011; 11(7):507–15. DOI: 10.1016/S1473-3099(11)70098-6.

8. Rerks-Ngarm S., Pitisuttithum P., Nitayaphan S., Kaewkungwal J., Chiu J., Paris R., Premsri N., Namwat C., de Souza M., Adams E., Benenson M., Gurunathan S., Tartaglia J., McNeil J.G., Francis D.P., Stablein D., Birx D.L., Chunsuttiwat S., Khamboonruang C., Thongcharoen P., Robb M.L., Michael N.L., Kunasol P., Kim J.H. Vaccination with ALVAC and AIDSVAX to prevent HIV-1 infection in Thailand. N. Engl. J. Med. 2009; 361(23):2209–20. DOI: 10.1056/NEJMoa0908492.

9. Machett M., Smith G.L., Moss B. Vaccinia virus: a selectable eukaryotic cloning and expression vector. Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1982; 79(23):7415-9. DOI: 10.1073/pnas.79.23.7415.

10. Redfield R.R., Wright D.C., James W.D., Jones T.S., Brown C., Burke D.S. Disseminated vaccinia in a military recruit with human immunodeficiency virus (HIV) disease. N. Engl. J. Med. 1987; 316(11):673–6. DOI: 10.1056/NEJM198703123161106.

11. Greenberg R.N., Overton E.T., Haas D.W., Frank I., Goldman M., von Krempelhuber A., Virgin G., Bädeker N., Vollmar J., Chaplin P. Safety, immunogenicity, and surrogate markers of clinical efficacy for modified vaccinia Ankara as a smallpox vaccine in HIV-infected subjects. J. Infect. Dis. 2013; 207:749–58. DOI: 10.1093/infdis/jis753.

12. Mair A., Stickl H., Muller H.K., Danner K., Singer H. The smallpox vaccination strain MVA: marker, genetic structure, experience gained with the parenteral vaccination and behavior in organisms with a debilitated defence mechanism (authorʼs transl). Zentralbl. Bakteriol. B. 1978; 167(5–6):375–90.

13. Павельев Д.И., Стовба Л.Ф., Писцов М.Н., Лебедев В.Н., Борисевич С.В. Применение рекомбинантного аттенуированного штамма MVA вируса вакцины качестве векторной вакцины для иммунизации против туберкулеза. Бактериология. 2018; 3(2):43–50.

14. Zitzmann-Roth E.M., von Sonnerburg F., de la Motte S., Arndtz-Wiedemann N., von Krempelhuber A., Uebler N., Vollmar J., Virgin G., Chaplin P. Cardiac safety of modified vaccinia Ankara for vaccination against smallpox in a young, healthy study population. PLoS One. 2015; 10(4):e122653. DOI: 10.1371/journal.pone.0122653.

15. Стовба Л.Ф., Кротков В.Т., Павельев Д.И., Мельников С.А., Лебедев В.Н., Борисевич С.В. Анализ и перспективы применения рекомбинантного вируса вакцины, штамм MVA, в качестве вектора при разработке вакцин против заболеваний, вызванных вирусами иммунодефицита человека и обезьян. Проблемы особо опасных инфекций. 2019; 2:37–44.

16. Melamed S., Israely T., Paran N. Challenges and achievements in prevention and treatment of Smallpox. Vaccines (Basel). 2018; 6(1):8. DOI: 10.3390/vaccines6010008.

17. Keefer M.C., Frey S.E., Elizaga M.L., Metch B., De Rosa S.C., Barroso P.F., Tomaras G.D., Cardinali M., Goepfert P.A., Kalichman A, Phiippon V., McElrath M.J., Jin X., Ferrari G., Defave O.D., Mazzara G.P., Montefiori D., Pensiero M., Panicali D.L., Corey L. A phase 1 trial of preventive HIV vaccination with heterologous poxviral-vectors containing matching HIV-1 inserts in healthy HIVuninfected subjects. Vaccine. 2011; 29(10):1948–58. DOI: 10.1016/j.vaccine.2010.12.104.

18. Walsh S.R., Seaman M.S., Grandpre L.E., Charbonneau C., Yanosick K.E., Metch B., Keefer M.C., Dolin R., Baden L.R. Impact of anti-orthopoxvirus neutralizing antibodies induced by heterologous prime-boost HIV-1 vaccine on insert-specific immune responses. Vaccine. 2012; 31(1):114–9. DOI: 10.1016/j vaccine.2012.10.093.

19. Gorse M.J., Newman A., deCamp A., Hay C.M., De Rosa S.C., Noonan E., Livingston B.D., Fuchs J.D., Kalams S.A., CassisGhavami F.L. DNA and modified vaccinia virus Ankara encoding multiple cytotoxic and helper T-lymphocete epitopes of human immunodeficiency virus type1 (HIV-1) are safe but weakly immunogenic in HIV-1- uninfected vaccinia virus-naive adults. Clin. Vaccine Immunol. 2012; 19(5):649–58. DOI: 10.1128/CVI.00038-12.

20. Gangadhara S., Kwon Y.-M., Jeeva S., Quan F.-S., Wang B., Moss B., Compans R.W., Amara R.R., Jabbar M.A., Kang S.-M. Vaccination with combination DNA and virus-like particles enhances humoral and cellular immune responses upon boost with recombinant modified vaccinia virus Ankara expressing human immunodeficiency virus envelope proteins. Vaccines (Basel). 2017; 5(4):52. DOI: 10.3390/vaccines5040052.

21. Mehendeke S., Thakar M., Sahay S., Kumar M., Shete A., Sathyamurthi P., Verma A., Kurle S., Shrotri F., Gilmour J., Goyal R., Dally L., Sayeed E., Zachariah D., Ackland J., Kochhar S., Cox J.H., Excler J.-L., Kumaraswami V., Paranjahe R., Ramanaathan V.D. Safety and immunogenicity of DNA and MVA HIV-1 subtype C vaccine prime-boost regimens: A phase I randomised trial in HIVuninfected Indian volunteers. PLoS One. 2013; 8(2):e55831. DOI: 10.1371/journal.pone.0055831.

22. Goepfert P.A., Elizaga M.L., Seaton K., Tomaras G.D., Montefiori D.C., Sato A., Hural J., De Rosa S.C., Kalams S.A., McElrath M.J., Keefer M.C., Baden L.R., Lama J.R., Sanchez J., Mulligan M.J., Buchbinder S.P., Hammer S.M., Koblin B.A., Pensiero M., Butler C., Moss B., Robinson H.L. Specificity and 6-month durability of immune responses induced by DNA and recombinant modified vaccinia Ankara vaccines expressing HIV-1 virus-like particles. J. Infect. Dis. 2014; 210(1):99–110. DOI: 10.1093/infdis/jiu003.

23. Smith J.M., Amara R.R., Campbell D., Xu Y., Patel M., Sharma S., Butera S.T., Ellenberger D.L., Yi H., Chennareddi L., Herndon J.G., Wyatt L.S., Montefiori D., Moss B., McClure H.M., Robinson H.L. DNA/MVA vaccine for HIV type I: effects of codon-optimization and expression of aggregates or virus-like particles on immunogenicity of the DNA prime. AIDS Res. Hum. Retroviruses. 2004; 20(12):1335–47. DOI: 10.1089/aid.2004.20.1335.

24. Goepfert P.A., Elizaga M.L., Sato A., Qin L., Cardinali M., Hay C.M., Hural J., DeRosa S.C., DeFawe O.D., Tomaras G.D., Montefiori D.C., Xu Y., Lai L., Kalams S.A., Baden L.R., Frey S.E., Blattner W.A., Wyatt L.S., Moss B., Robinson H.L. Phase 1 safety and immunogenicity testing of DNA and recombinant modified vaccinia Ankara vaccines expressing HIV-1 virus-like particles. J. Infect. Dis. 2011; 203:610–9. DOI: 10.1093/infdis/jiq105.

25. Raska M., Czernekova L., Moldoveanu Z., Zachova K., Elliot M.C., Novak Z., Hall S., Hoelscher M., Maboko L., Brown R., Smith P.D., Mesteky J., Novak J. Differential glycosylation of envelope gp120 is associated with differential recognition of HIV-1 by virus-specific antibodies and cell infection. AIDS Res. Ther. 2014; 11:23. DOI: 10.1186/1742-6405-11-23.

26. Bauer A., Podola L., Mann P., Missanga M., Haule A., Sudi L., Nilsson C., Kaluwa B., Lueer C., Mwqkatima M., Munseri P.J., Maboko L., Robb M.L., Tovanabutra S., Kijak G., Marovich M., McCormack S., Joseph S., Lyamuya E., Wahren B., Sandström E., Biberfeld G., Hoelscher M., Bakari M., Kroidl A., Geldmacher C. Preferential targeting of conserved Gag region after action with heterologous DNA-prime-modified vaccinia virus Ankara-boost HIV vaccine regimen. J. Virol. 2017; 91(18):e00730–17. DOI: 10.1128/JVI.00730-17.

27. Sandström E., Nilsson C., Hejdeman B., Bråve A., Bratt G., Robb M., Cox J., Vancott T., Marovich M., Stout R., Aboud S., Bakari M., Pallangyo K., Ljungberg K., Moss B., Earl P., Michael N., Birx D., Mhalu F., Wahren B., Biberfeld G. Broad immunogenicity of a multigene, multiclade HIV-1 DNA vaccine boosted with heterologous HIV-1 recombinant modified vaccinia virus Ankara. J. Infect. Dis. 2008; 198(10):1482–90. DOI: 10.1086/592507.

28. Nilsson C., Godoy-Ramirez K., Hejdeman B., Bråve A., Gudmundsdotter L., Hallengärd D., Currier J.R., Wiekzorek L., Hasselrod K., Earl P.L., Polonis V.R., Marovich M.A., Robb M.L., Sandström E., Wahren B., Biberfeld G. Broad and potent cellular and humoral immune responses after a second late HIV-modified vaccinia virus Ankara vaccination in HIV-DNA-primed and HIV-modified vaccinia virus Ankara-boosted Swedish vacciniees. AIDS Res. Hum. Retroviruses. 2014; 30(3):299–311. DOI: 10.1089/AID.2013.0149.

29. Buchbinder S.P., Grunenberg N.A., Sanchez B.J., Seaton K.E., Ferrari G., Moody M.A., Frahm N., Montefiori D.C., Hay C.M., Goephert P.A., Baden L.R., Robinson H.L., Yu X., Gilbert P.B., McElrath M.J., Huang Y., Tomasras G.D. Immunogenicity of a novel clade B HIV-1 vaccine combination: Results of phase 1 randomized placebo controlled trial of an HIV-1 GM-CSF-expressing DNA prime with a modified vaccinia Ankara vaccine boost in healthy HIV-1 uninfected adults. PLoS One. 2017; 12(7):e0179597. DOI: 10.1371/journal.pone.0179597.

30. Gray G.E., Mayer K.H., Elizaga M.L., Bekker L.-G., Allen M., Morris L., Montefiori D., De Rosa S.C., Sato A., Gu N., Tomaras G.D., Tucker T., Barnett S.W., Mkhize N.N., Shen X., Downing K., Williamson C., Pensiero M., Corey L., Williamson A.-I. Subtype C Gp 140 vaccine boosts immune responses primed by the South African AIDS vaccine initiative DNA-C2 and MVA-C HIV vaccines after more than a 2-year gap. Clin. Vaccine Immun. 2016; 23(6):495–506. DOI: 10.1128/CVLi.00717-15.

31. Burgers W.A., van Harmelen J.H., Shephard E., Adams C., Mgwebi T., Bourn W., Hanke T., Williamson A.L., Williamson C. Design and preclinical evaluation of a multigene human immunodeficiency virus type 1 subtype C DNA vaccine for clinical trial. J. Gen. Virol. 2006; 87(Pt 2):399–410. DOI: 10.1099/vir.0.81379-0.

32. Joachim A., Bauer A., Joseph S., Geldmacher C., Munseri P.J., Aboud S., Missanga M., Mann P., Wahren B., Ferrari G., Polonis V.R., Robb M.L., Weber J., Tatoud R., Maboko L., Hoelscher M., Lyamuya E.F., Biberfeld G., Sandström E., Kroidi A., Bakari M., Nilsson C., McCormick S. Boosting with subtype C CN54rgp140 protein adjuvanted with glucopyranosyl lipid adjuvant after priming with HIV-DNA and HIV-MVA is safe and enhances immune responses: A phase I trial. PLoS One. 2016; 11(5):e0155702. DOI: 10.1371/journal.pone0155702.

33. García F., Bernaldo de Quirós J.C., Gómez C.E., Perdiguero B., Nájera J.L., Jiménez V., García-Arriaza J., Guardo A.C., Pérez I., Díaz-Brito V., Conde M.S., González N., Alvarez A., Alcamí J., Jiménez J.L., Pich J., Arnaiz J.A., Maleno M.J., León A., MuñozFernández M.A., Liljeström P., Weber J., Pantaleo G., Gatell J.M., Plana M., Esteban M. Safety and immunogenicity of a modified pox vector-basedHIV/AIDS vaccine candidate expressing Env, Gag, Pol and Nef proteins of HIV-1 subtype B (MVA-B) in healthy HIV-1- uninfected volunteers: A phase I clinical trial (RISVAC02). Vaccine. 2011; 29(46):8309–16. DOI: 10.1016/j.vaccine.2011.08.098.

34. Guardo A.S., Gómez C.E., Díaz-Brito V., Pich J., Arnaiz J.A., Perdiguero B., García-Arriaza J., González N., Sorzano C.O.S., Jiménez L., Jiménez J.L., Muñoz-Fernández M.Á., Gatell J.M., Alcamí J., Esteban M., López Bernaldo de Quirós J.C., García F., Plana M. Safety and vaccine-induced HIV-1 immune responses in healthy volunteers following a late MVA-B boost 4 years after the last immunization. PLoS One. 2017; 12(10):e0186602. DOI: 10.1371/journal.pone0186602.

35. Sahu G.K. Potential implication of residual viremia in patients on effective antiretroviral therapy. AIDS Res. Hum. Retroviruses. 2015; 31(1):25–35. DOI: 10.1089/AID.2014.0194.

36. Hachimoto C., Tanaka T., Narumi T., Nomura W., Tamamura H. The successes and failures of HIV drug discovery. Expert Opin. Drug. Discov. 2011; 6(10:)1067–90. DOI: 10.1517/17460441.2011.611129.

37. Gomez C.E., Perdiguero B., García-Arriaza J., Cepeda V., Sánchez-Sorzano C.Ó., Mothe B., Jiménez J.L., Muñoz-Fernández M.Á., Gatell J.M., López Bernaldo de Quirós J.C., Brander C., García F., Esteban M. A phase I randomized therapeutic MVA-B vaccination improves the magnitude and quality of the T cell immune responses in HIV-1-infected subjects on HAART. PLoS One. 2015; 10(11):e0141456. DOI: 10.1371/journal.pone.0141456.

38. Hanke T. Conserved immunogens in prime-boost strategies for the next-generation HIV-1 vaccines. Expert Opin. Biol. Ther. 2014; 14(5):601–16. DOI: 10.1517/14712598.2014.885946.

39. Rosario M., Bridgeman A., Quakkelaar E.D., Quigley M.F., Hill B.J., Knudsen M.L., Ammendola V., Ljungberg K., Borthwick N., Im E.J., McMichael A.J., Drijfhout J.W., Greenaway H.Y., Venturi V., Douek D.C., Colloca S., Liljeström P., Nicosia A., Price D.A., Melief C.J., Hanke T. Long peptides induse polyfunctional T-cell against conserved regions of HIV-1 with superior breadth to singlegene vaccines in macaques. Eur. J. Immunol. 2010; 40(7):1973–84. DOI: 10.1002/eli.20104034.

40. Hancock G., Morón-López S., Kopycinski J., Puertas M.C., Giannoulatou E., Rose A., Salgado M., Hayton E.J., Crook A., Morgan C., Angus B., Chen F., Yang H., Martinez-Picado J., Hanke T., Dorrell L. Evaluation of the immunogenicity and impact on the latent HIV-1 reservoir of a conserved region vaccine, MVA∙HIVconsv, in antiretroviral therapy-treated subjects. J. Int. AIDS Soc. 2017; 20(1):21171. DOI: 10.7448/IAS.20.1.21171.

41. Borthwick N., Ahmed T., Ondondo B., Hayes P., Rose A., Ebrahimsa U., Hayton E.-J., Black A., Bridgemann A., Rosario M., Hill A.V.S., Berrie J., Moule S., Frahm N., Cox J., Colloca S., Nicosia A., Gilmour J., McMichael A.J., Dorrell L., Hanke T. Vaccineelicited human T-cell recognizing conserved protein regions inhibit HIV-1. Mol. Ther. 2014; 22(2):464–75. DOI: 10.1038/mt.2013.248.


Для цитирования:


Стовба Л.Ф., Мельников С.А., Павельев Д.И., Кротков В.Т., Черникова Н.К., Лебедев В.Н., Борисевич С.В. Анализ результатов клинических испытаний рекомбинантного вируса вакцины, штамм MVA, экспрессирующего гены вируса иммунодефицита человека. Проблемы особо опасных инфекций. 2021;(3):13-22. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2021-3-13-22

For citation:


Stovba L.F., Mel’nikov S.A., Paveli’ev D.I., Krotkov V.T., Chernikova N.K., Lebedev V.N., Borisevich S.V. The Results of Clinical Trials of Recombinant Vaccine Virus, MVA Strain, Expressing Genes of Human Immunodeficiency Virus. Problems of Particularly Dangerous Infections. 2021;(3):13-22. (In Russ.) https://doi.org/10.21055/0370-1069-2021-3-13-22

Просмотров: 107


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 0370-1069 (Print)
ISSN 2658-719X (Online)