Разработка амплификационных тест-систем для выявления возбудителя туляремии
https://doi.org/10.21055/0370-1069-2015-2-54-57
Аннотация
Разработан способ обнаружения ДНК туляремийного микроба методом ПЦР с электрофоретическим и гибридизационно-флуоресцентным учетом результатов. В качестве ДНК-матрицы выбраны гены iglBC, которые являются видоспецифичными для возбудителя туляремии. На основе полученных результатов созданы препараты для выявления ДНК туляремийного микроба в биологическом материале и объектах окружающей среды методом ПЦР с учетом результатов методом электрофореза и в режиме реального времени: «Ген Francisella tularensis - РЭФ» и «Ген Francisella tularensis - РГФ» соответственно. Определена форма комплектации данных тест-систем. Чувствительность и специфичность сконструированных наборов определена при исследовании бактериальных взвесей туляремийного микроба, суспензий органов мелких млекопитающих, клещей, блох, комаров, проб почвы, воды открытых водоемов, мокроты и крови человека, искусственно контаминированных возбудителем туляремии. Установлена высокая чувствительность - 1·103 м.к./мл и специфичность - 100 % разработанных тест-систем вне зависимости от вида исследуемого материала.
Об авторах
Н. А. Осина
Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»
Россия
Россия
А. М. Сеничкина
Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»
Россия
Россия
Т. В. Бугоркова
Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»
Россия
Россия
С. А. Щербакова
Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб»
Россия
Россия
Список литературы
1. Воробьев А.А., Боев Б.В., Бондаренко В.М., Гинзбург А.Л. Проблема биотерроризма в современных условиях. Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 2002; 3:3-12.
2. Emanuel P.A., Bell R., Dang J.L., McClanahan R., David J.C., Burgess R.J., Thompson J., Collins L., Hadfield T. Detection of Francisella tularensis within infected mouse tissues by using a hand-held PCR thermocycler. J. Clin. Microbiol. 2003; 41(2):689-93.
3. Johansson A., Berglund L., Eriksson U., Goransson I., Wollin R., Forsman M., Tarnvik A., Sjostedt A. Comparative analysis of PCR versus culture for diagnosis of ulceroglandular tularemia. J. Clin. Microbiol. 2000; 38(1):22-6.
4. Kugeler K.J. Discrimination between Francisella tularensis and Francisella-like endosymbionts when screening ticks by PCR. Appl. Environ. Microbiol. 2005; 7(11):7594-7.
5. Long G.W., Oprandy J.J., Narayanan R.B., Fortier A.H., Porter K.R., Nacy C.A. Detection of Francisella tularensis in blood by polymerase chain reaction. J. Clin. Microbiol. 1993; 31(1):152-4.
6. Sjostedt A., Eriksson U., Berglund L., Tarnvik A. Detection of Francisella tularensis in ulcers of patients with tularemia by PCR. J. Clin. Microbiol. 1997; 35(5):1045-8.
7. Versage J.L., Severin D.D., Chu M.C., Petersen J.H. Development of a multitarget real-time TaqMan PCR assay for enhanced detection of Francisella tularensis in complex. J. Clin. Microbiol. 2003; 41:5492-9.
Рецензия
Для цитирования:
Осина Н.А., Сеничкина А.М., Бугоркова Т.В., Щербакова С.А. Разработка амплификационных тест-систем для выявления возбудителя туляремии. Проблемы особо опасных инфекций. 2015;(2):54-57. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2015-2-54-57
For citation:
Osina N.A., Senichkina A.M., Bugorkova T.V., Shcherbakova S.A. Development of Amplification Test-Systems for Tularemia Agent Detection. Problems of Particularly Dangerous Infections. 2015;(2):54-57. (In Russ.) https://doi.org/10.21055/0370-1069-2015-2-54-57
Просмотров: 604
Послать статью по эл. почте 