Организация внешнего контроля качества исследований на чуму с использованием панелей шифрованных образцов

Цель работы – оценка результатов внешнего контроля качества исследований молекулярно-генетическим и иммунологическим методами на чуму в лабораториях противочумных учреждений с использованием шифрованных панелей. Материалы и методы. Участниками внешнего контроля качества являлись 19 противочумных учреждений. Оценивалось качество исследований, выполненных методами полимеразной цепной реакции (ПЦР) и флуоресцирующих антител (МФА), с использованием шифрованных панелей, которые содержали следующие образцы: для контроля исследований методом ПЦР – высушенные препараты ДНК Yersinia pestis EV НИИЭГ («положительные» образцы) и ДНК Yersinia pseudotuberculosis, Escherichia coli в концентрации не менее 1 нг, 15 % раствор сахарозы («отрицательные» пробы); для контроля индикации чумы с помощью МФА – фиксированные мазки штаммов тех же возбудителей (Y. pestis EV НИИЭГ, Y. pseudotuberculosis и E. coli) в концентрациях 1·10⁶ м.к./мл. Результаты и обсуждение. Анализ результатов внешнего контроля качества деятельности лабораторий противочумных учреждений проведен за период с 2011 по 2025 г. Число ложноположительных проб при исследовании МФА составило 0,7 %, ложноотрицательных – 0,47 %; при индикации методом ПЦР количество ложноположительных случаев составило 1,27 %, ложноотрицательных – 0,36 %. Проведенный анализ позволил установить возможные ошибки при проведении исследований по индикации возбудителя чумы в лабораториях противочумных учреждений и пути их устранения. Для исключения возможных ошибок и недопущения получения неудовлетворительных результатов в лабораториях целесообразно осуществлять внутрилабораторный контроль качества исследований, своевременную закупку диагностических препаратов, оснащение необходимым оборудованием, соблюдать рекомендации производителей тест-систем в части использования адаптированных к методике приборов, подтверждать квалификацию персонала. Проведение процедуры внешнего контроля качества на чуму в противочумных учреждениях с применением шифрованных панелей образцов Y. pestis, имитирующих реальные биологические пробы, позволяет эффективно осуществлять контроль индикации возбудителя чумы, обеспечить качество лабораторных исследований и гарантировать достоверность получаемых результатов.

1. Wang L.N., Wu J.M., Deng W., Shen Z.Y., Chen W.X., Li J.M. Lyophilized standards for the calibration of real time PCR assay for hepatitis C virus RNA. Chin. Med. J. (Engl.) 2006; 119(22): 1910–14.

2. Neumaier M. 11. European quality assessment networks in molecular diagnostics. EJIFCC. 2008; 19(1):75–8.

3. Терещенко А.Г., Пикула Н.П. Внутрилабораторный контроль качества результатов химического анализа. Томск: STT; 2017. 266 с.

4. Семёнов С.Ю., Стерликов А.В., Тананыкин Н.И., Колбутова К.Б., Куриленко Ю.В., Воронков А.В. Внешний контроль качества исследований в испытательных лабораториях при проведении прямых измерений. Медицина экстремальных ситуаций. 2018; 20(2):223–31.

5. Кушнарев В.А., Кудайбергенова А.Г., Завалишина Л.Э. Применение внутрилабораторного и внешнего контроля качества иммуногистохимических исследований для улучшения выявления рецепторов эстрогенов и прогестеронов. Архив патологии. 2021; 83(2):5–9. DOI: 10.17116/patol2021830215.

6. Zhang Yo., Wang X., Niu C., Wang D., Shen Q., Gao Y., Zhou H., Zhang Yu., Zhang Ya., Dong L. Evaluation of factors contributing to variability of qualitative and quantitative proficiency testing for SARS-CoV-2 nucleic acid detection. Biosaf. Health. 2022; 4(5):321–9. DOI: 10.1016/j.bsheal.2022.08.004.

7. Делий И.В., Сизиков В.В., Безуглова Л.В. Опыт участия 6 клинико-диагностических лабораторий учреждений службы крови РФ в программе межлабораторных сличений «Вместе» (выявление HBsAg, анти-ВГС). В кн.: Материалы XXVII Всероссийской научно-практической конференции с международным участием. Клиническая лаборатория: вклад в борьбу с пандемией: сборник тезисов. М.; 2022. С. 41–2. [Электронный ресурс]. URL: https://pureportal.spbu.ru/files/107029858/2022_.pdf.

8. Мезенцева Н.И., Лаптев С.В. Разработка программы и организация внешнего контроля качества ПЦР-диагностики COVID-19. В кн.: Акимкин В.Г., Творогова М.Г., редакторы. Молекулярная диагностика и биобезопасность – 2020. Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием (6–8 октября 2020 года): сборник материалов. М.: ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора; 2020. С. 155–6. DOI: 10.36233/978-5-9900432-9-9-155.

9. Мезенцева Н.И., Лаптев С.В. Внешняя оценка качества ПЦР-выявления РНК SARS-CoV-2 в период пандемии. В кн.: Материалы XXVII Всероссийской научно-практической конференции с международным участием. Клиническая лаборатория: Вклад в борьбу с пандемией: сборник тезисов. М.; 2022. С. 89–90. [Электронный ресурс]. URL: https://pureportal.spbu.ru/files/107029858/2022_.pdf.

10. Жумамуродов С.Т., Ёдгорова Н.Т., Орынбаева З.Н. Оценка качества ПЦР исследований с использованием метода «сухая пробирка». В кн.: Фундаментальные и практические вопросы иммунологии и инфектологии: сборник научных статей участников Международной научно-практической конференции (г. Уфа, 3–5 октября 2018 г.). Уфа: НИЦ «НИКА»; 2018. Т. 1. С. 130–7.

11. Schirm J., van Loon A.M., Valentine-Thon E., Klapper P.E., Reid J., Cleator G.M. External quality assessment program for qualitative and quantitative detection of hepatitis C virus RNA in diagnostic virology. J. Clin. Microbiol. 2002; 40(8):2973–80. DOI: 10.1128/JCM.40.8.2973-2980.2002.

12. Pembrey L., Newell M.L., Tovo P.A., van Drimmelen H., Quinti I., Furlini G., Galli S., Meliconi M.G., Burns S., Hallam N., Sönnerborg A., Cilla G., Serrano E., Laccetti P., Portella G., Polywka S., Icardi G., Bruzzone B., Balbo L., Alfarano A.; European Paediatric Hepatitis C Virus Network. Inter-laboratory comparison of HCV-RNA assay results: implications for multi-centre research. J. Med. Virol. 2003; 69(2):195–201. DOI: 10.1002/jmv.10283.

13. Preiksaitis J.K., Pang X.L., Fox J.D., Fenton J.M., Caliendo A.M., Miller G.G. Interlaboratory comparison of Epstein-Barr virus viral load assays. Am. J. Transplant. 2009; 9(2):269–79. DOI: 10.1111/j.1600-6143.2008.02514.x.

14. Тымчук С.Н., Ларин В.Е., Карташова А.В. МСИ водных образцов по бактериологическим показателям. Контроль качества продукции. 2020; (7):58–62.

15. Мезенцева Н.И., Лаптев С.В. Разработка программ межлабораторных сличительных испытаний и организация внешней оценки качества ПЦР-диагностики COVID-19. Справочник заведующего КДЛ. 2020; (12):6–10.

16. Карташова А.В., Чамаев А.В., Прокошина Н.Ю. Участие в МСИ – независимое подтверждение компетентности лаборатории. Методы оценки соответствия. 2012; (12):5–9.

17. Карташова А.В., Халиков М.Р. МСИ как критерий аккредитации. Контроль качества продукции. 2015; (1):27–30.

18. Лаврова Н. Все аспекты деятельности испытательной лаборатории. Практическое пособие. М.; 2021. 556 с. ISBN 978-5-0053-0895-5.

19. Сеничкина А.М., Портенко С.А., Шарова И.Н., Корешкова О.А., Блинова К.Д., Осина Н.А., Малюкова Т.А. Конструирование панелей шифрованных образцов для подготовки специалистов Роспотребнадзора и валидации новых методик в лабораториях. Здоровье населения и среда обитания. 2025; 33(3):17–24. DOI: 10.35627/2219-5238/2025-33-3-17-24.

20. Карташова А.В., Прокошина Н.Ю., Халиков М.Р. Межлабораторные сравнительные испытания – внешний контроль качества работы лаборатории. Контроль качества продукции. 2018; (9):36–9.

21. Карташова А.В., Тропынина Л.В. Опыт проведения межлабораторных сравнительных испытаний: обеспечение сопоставимости результатов анализа. Аналитика. 2022; 12(4):262–5.