Получение гипериммунных сывороток к термоэкстрактам из бруцелл в S- и L-формах

Цель. Получение гипериммунных сывороток к термоэкстрактам из бруцелл в S- и L-формах. Материалы и методы. В работе использовали термоэкстракты, полученные из штамма Brucella abortus И-206 в S- и L-формах. В качестве животных-продуцентов сывороток использовали кроликов породы Шиншилла. Специфическую активность определяли в пробирочной реакции агглютинации с диагностикумами: корпускулярным экспериментальным из бруцелл в L-форме и коммерческим бруцеллезным цветным, специфичность – с гетерологичными штаммами: Francisella tularensis 15 НИИЭГ, Vibrio choleraе 5 (Огава), V. choleraе 35 А3 (Инаба), Yersinia enterocolitica О:9, Y. pestis EV НИИЭГ, Escherichia coli 3912/41. Содержание белка в полученном экстракте определяли по методу Лоури. Результаты и выводы. В результате проведенных исследований показана антигенная активность термоэкстрактов, разработаны схемы иммунизации, позволяющие получать высокоактивные и специфичные сыворотки, которые могут быть использованы для идентификации и дифференциации возбудителя бруцеллеза. 

1. Михайлов Л.М., Калиновский А.И., Андреевская Н.М., Михайлова В.А., Репина Л.П. Способ получения диагностической агглютинирующей сыворотки против бруцелл в L-форме. Патент РФ 2242765, опубл. 20.12.2004. Бюл. 35.

2. Михайлов Л.М., Калиновский А.И., Андреевская Н.М., Михайлова В.А., Балахонов С.В., Шестопалов М.Ю., Татарникова О.Г., Репина Л.П., Болдина А.А., Капустин Ю.М. Антисыворотки к бруцеллам в L-форме. Бюл. ВСНЦ СО РАМН. 2004; 1(2):143–6.

3. Михайлов Л.М., Калиновский А.И., Баранникова Н.Л., Балахонов С.В., Марков Е.Ю., Николаев В.Б., Козулина К.Ю., Шестопалов М.Ю., Андреевская Н.М., Михайлова В.А., Татарникова О.Г., Кузнецов В.И. Способ получения антигенно- го препарата из бруцелл в L-форме. Патент РФ 2416429, опубл. 20.04.2011. Бюл. 11.

4. Онищенко Г.Г., Кутырев В.В., редакторы. Лабораторная диагностика опасных инфекционных болезней. Практическое руководство. Изд. 2-е. М.: ЗАО «Шико»; 2013. 560 с.

5. Саяпина Л.В., Комратов А.В., Храмов М.В., Торопчин М.И., Фадейкина О.В., Волкова Р.А., Русанова Д.В., Немировская Т.И., Лямкин Г.И. Аттестация отраслевого стандартного образца сыворотки бруцеллезной диагностической поливалентной для реакции агглютинации. Биопрепараты. Профилактика. Диагностика. Лечение. 2014; 4(52):42–7.

6. Спирин А.С. Спектрофотометрическое определение суммарного количества нуклеиновых кислот. Биохимия. 1958; 23(5):656–62.

7. Хансон Р. Химический состав бактериальной клетки. В кн.: Методы общей бактериологии. Кн. 2. М.; 1984. С. 283–373.

8. Berman D.T., Kurtz R.S. Relationship of biological activi- ties to structures of Brucella abortus endotoxin and LPS. Ann. Inst. Pasteur Microbiol. 1987; 138(1):98–101.

9. Chenais, E. Bagge, E. Lambertz, S.T. Artursson, K. Yersinia enterocolitica serotype O:9 cultured from Swedish sheep showing serologically false-positive reactions for Brucella melitensis. Infect. Ecol. Epidemiol. 2012; 2:19027. DOI:10.3402/iee.v2i0.19027.

10. Kubler-Kielb J., Vinogradov E. Reinvestigation of the structure of Brucella O-antigens. Carbohydr. Res. 2013; 378:144–7.

11. Kubler-Kielb J., Vinogradov E. The study of the core part and non-repeating elements of the O-antigen of Brucella lipopoly saccharide. Carbohydr. Res. 2013; 366:33–7.

12. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement with the Folin phenol reagent. J. Biol. Chem. 1951; 193(1):265–75.