ИЗУЧЕНИЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ВОЗМОЖНОСТЕЙ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ, СПЕЦИФИЧНЫХ К МЕМБРАННОМУ БЕЛКУ ВОЗБУДИТЕЛЯ ХОЛЕРЫ, В ИММУНОФЕРМЕНТНОМ АНАЛИЗЕ
https://doi.org/10.21055/0370-1069-2017-3-45-48
Аннотация
Цель – разработка пероксидазного конъюгата на основе МКА H2F6 и изучение возможности его использования для выявления tcp+ штаммов холерных вибрионов О1/О139 серогрупп в прямых методах ИФА.
Материалы и методы. В работе использовали гибридный клон H2F6, синтезирующий в культуральную среду моноклональные антитела, специфичные к белку наружной мембраны холерного вибриона.
Результаты и выводы. На основе МКА сконструирован пероксидазный конъюгат, позволяющий выявлять tcp+ штаммы V. cholerae О1 и О139 в прямом ТИФА и дот-ИФА. Испытания препарата на наборе штаммов холерных вибрионов и гетерологичных микроорганизмов показали его специфичность в отношении V. cholerae О1 и О139. Моноклональный пероксидазный конъюгат H2F6 может быть использован для детекции в иммуноферментных методах эпидемически значимых штаммов холерных вибрионов О1/О139 серогрупп.
Об авторах
В. В. Евдокимова
ФКУЗ «Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институт»
Россия
Россия
Л. П. Алексеева
ФКУЗ «Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институт»
Россия
Россия
В. П. Зюзина
ФКУЗ «Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институт»
Россия
Россия
О. Ф. Кретенчук
ФКУЗ «Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институт»
Россия
Россия
М. Э. Яговкин
ФКУЗ «Ростовский-на-Дону научно-исследовательский противочумный институт»
Россия
Россия
Список литературы
1. Алексеева Л.П., Козлова Г.А., Маркина О.В., Кретенчук О.Ф., Яговкин М.Э., Бурша О.С. Использование моноклональных пероксидазных конъюгатов для идентификации холерных вибрионов О1, О139 в реакции дот-иммуноанализа. Клин. лаб. диагн. 2013; 3:26–9.
2. Алексеева Л.П., Телесманич Н.Р., Ломов Ю.М., Храмов М.В., Кругликов В.Д., Агафонова В.В., Фатеева О.Ф., Чеботарев Д.А., Керманов А.В. Сравнительная оценка методов дот- иммуноанализа и иммунохроматографии при выявлении холерных вибрионов О1 серогруппы. Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 2010; 6:88–93.
3. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л.: Медгиз; 1962. 180 с.
4. Евдокимова В.В., Алексеева Л.П., Кретенчук О.Ф., Кругликов В.Д., Архангельская И.В., Бурша О.С. Иммунофер ментные методы анализа в диагностике холеры. Клин. лаб. диагн. 2016; 5:303–7. DOI: 10.18821/0869-2084-2016-61-5-303-307.
5. Евдокимова В.В., Алексеева Л.П., Кретенчук О.Ф., Кругликов В.Д., Архангельская И.В. Моноклональные антитела к термостабильным поверхностным антигенам холерных вибрионов О1- и О139-серогруппы. Эпидемиол. и инф. бол. 2015; 3:51–7.
6. Кэтти Д., редактор. Антитела. Методы. Т. 1. М.: Мир; 1991. 384 с.
7. Кэтти Д., редактор. Антитела. Методы. Т. 2. М.: Мир; 1991. 382 с.
8. Монахова Е.В. Стратегия вирулентности холерных вибрионов и пути ее реализации. Пробл. особо опасных инф. 2013; 4:60–8.
9. Онищенко Г.Г., Ломов Ю.М., Москвитина Э.А., Подосинникова Л.С., Водяницкая С.Ю., Прометной В.И., Монахова Е.В., Водопьянов С.О., Телесманич Н.Р., Дудина Н.А. Холера, обусловленная Vibrio cholerae O1 ctxAB– tcpA+. Журн. микробиол., эпидемол. и иммунобиол. 2007; 1:23–9.
10. Титова С.В., Москвитина Э.А., Кругликов В.Д., Самородова А.В., Тюленева Е.Г., Mонахова Е.В., Писанов Р.В., Водопьянов А.С., Архангельская И.В., Иванова С.М., Ковалева Т.В., Водопьянов С.О. Холера: оценка эпидемиологической обстановки в мире и России в 2006–2015 гг. Прогноз на 2016 г. Пробл. особо опасных инф. 2016; 1:20–7. DOI: 10.21055/0370-1069-2016-1-20-27.
11. Chen W., Lu J.Zh.G., Yuan Z., Wu Q., Li J., Xu G., He A., Zheng Ji., Zhang Ju. Development of an immunochromatographic lateral flow device for rapid diagnosis of Vibrio cholerae O1 serotype Ogawa. Clinical Biochemistry. 2014; 47(6):448–54. DOI: 10.1016/j.clinbiochem.2013.12.022.
12. Jyoung J.Y., Hong S., Lee W., Choi J.W. Immunosensor for the detection of Vibrio cholerae O1 using surface plasmon reso- nance. Siosens. Bioelectron. 2006; 21(12):2315–9. DOI: 10.1016/j.bios.2005.10.015.
13. Krebs S.J., Taylor R.K. Protection and attachment of Vibrio cholerae mediated by the toxin-coregulated pilus in the infant mouse model. J. Bacteriol. 2011; 193(19):5260–70. DOI: 10.1128/JB.00378-11.
14. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during assembly of the head ofbacteriophage T4. Nature. 1970; 227(5259): 680–5.
15. Nakane P.K., Kawaoi A. Peroxidase-labeled antibody a new method of conjugation. J. Histochem Cytochem. 1974; 22:1084–91.
16. Pengsuk C., Longyant S., Rukpratanporn S., Chaivisut hangkura P., Sridulyakul P., Sithigorngul P. Differentiation among the Vibrio cholerae serotypes O1, O139, O141 and non-O1, non- O139, non-O141 using specific monoclonal antibodies with dot blotting. J. Microbiol Methods. 2011; 87(2):224–33. DOI: 10.1016/j.mimet.2011.07.022.
17. Pengsuk Ch., Chaivisuthangkura P., Longyant S., Sithi gorngul P. Development and evaluation of a highly sensitive immunochromatographic strip test using gold nanoparticle for direct detection of Vibrio cholerae O139 in seafood samples. Biosen. Bioelectron. 2013; 42:229–35. DOI: 10.1016/j.bios.2012.10.011.
18. Thattiyaphong A., Okada K., Khangrang S., Nispa W., Sawanpanyalert P., Honda T. Development of a 5-minute rapid test for detecting Vibrio cholerae O139. Southeast Asian J. Trop. Med. Public Health. 2013; 44(3):448–55.
19. Towbin H., Gordon J. Immunoblotting and dot immunobinding – Current status and outlook. J. Immunol. Methods. 1984; 72:313–40.
20. Tuteja U., Kumar S., Shukla J., Kingston J., Batra H.V. Simultaneous direct detection of toxigenic and non-toxigenic Vibrio cholerae from rectal swabs and environmental samples by sandwich ELISA. J. Med. Microbiol. 2007; 56(Pt 10):1340–5. DOI: 10.1099/jmm.0.47166-0.
Рецензия
Для цитирования:
Евдокимова В.В., Алексеева Л.П., Зюзина В.П., Кретенчук О.Ф., Яговкин М.Э. ИЗУЧЕНИЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ВОЗМОЖНОСТЕЙ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ, СПЕЦИФИЧНЫХ К МЕМБРАННОМУ БЕЛКУ ВОЗБУДИТЕЛЯ ХОЛЕРЫ, В ИММУНОФЕРМЕНТНОМ АНАЛИЗЕ. Проблемы особо опасных инфекций. 2017;(3):45-48. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2017-3-45-48
For citation:
Evdokimova V.V., Alekseeva L.P., Zyuzina V.P., Kretenchuk O.F., Yagovkin M.E. THE STUDY OF DIAGNOSTIC POTENTIAL OF MONOCLONAL ANTIBODIES SPECIFIC TO THE MEMBRANE PROTEIN OF CHOLERA AGENT IN ENZYME-LINKED IMMUNOASSAY. Problems of Particularly Dangerous Infections. 2017;(3):45-48. (In Russ.) https://doi.org/10.21055/0370-1069-2017-3-45-48
Просмотров: 578
Послать статью по эл. почте 