Разработка и испытания диагностикума на основе моноклональных антител для определения спор возбудителя сибирской язвы в реакции латекс-агглютинации
https://doi.org/10.21055/0370-1069-2011-4(110)-71-75
Аннотация
Проведены исследования по иммобилизации моноклональных антител на твердом носителе (латексных микрочастицах) и подбору оптимальной их нагрузки. Наибольшая чувствительность реакции латекс-агглютинации наблюдалась при использовании моноклональных антител 1Е6. Оптимальная нагрузка моноклональных антител на латексных частицах составила 20 мкг на 50 мкл исходной латексной суспензии. Проведена оценка чувствительности и специфичности лиофильновысушенных латексных суспензий с иммобилизованными МКА. Их чувствительность и специфичность не уступала исходной жидкой латексной суспензии. На их основе сконструирован латексный диагностикум для определения спор возбудителя сибирской язвы, разработан и утвержден комплект нормативной документации, включающий в себя инструкцию по применению и технические условия (ТУ 9388-112-78095326-2010, код ОКП 938890). Проведены межлабораторные и комиссионные испытания экспериментальных образцов сконструированного латексного диагностикума. Полученные препараты характеризуются высокой чувствительностью (от 1·105 до 2·106 спор/мл и выше) и специфичностью (не реагируют со спорами различных видов спорообразующих бацилл в концентрации 1·108 спор/мл и ниже).
Ключевые слова
моноклональные антитела (МКА),
латексные микрочастицы,
реакция латекс-агглютинации (РЛА),
чувствительность,
специфичность,
комиссионные испытания
616.981.51:616-07
Об авторах
А. Е. Хлынцева
Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии
Россия
Россия
Н. М. Лунева
Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии
Россия
Россия
Е. В. Белова
Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии
Россия
Россия
И. А. Дятлов
Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии
Россия
Россия
И. Г. Шемякин
Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии
Россия
Россия
Список литературы
1. Хлынцева А.Е., Белова Е.В., Жарникова И.В., Тюменцева И.С., Куличенко А.Н., Дятлов И.А., Шемякин И.Г. Конструирование тест-системы для селективного концентрирования спор Bacillus anthracis на основе магнитных частиц с иммобилизованными моноклональными антителами. Биотехнол. 2010; 4:81-8.
2. Andreotti P.K., Ludwig G.V., Peruski A.H. et al. Immunoassay of infectious agents. Biotechniques. 2003; 35:850-9.
3. Steichen C., Chen P., Kearney J.F., Turnbough C.L. Identification of the Immunodominant Protein and Other Proteins of the Bacillus anthracis Exosporium. J. Bacteriol. 2003; 185:1903-10.
Рецензия
Для цитирования:
Хлынцева А.Е., Лунева Н.М., Белова Е.В., Дятлов И.А., Шемякин И.Г. Разработка и испытания диагностикума на основе моноклональных антител для определения спор возбудителя сибирской язвы в реакции латекс-агглютинации. Проблемы особо опасных инфекций. 2011;(4(110)):71-75. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2011-4(110)-71-75
For citation:
Khlyntseva A.E., Luneva N.M., Belova E.V., Dyatlov I.A., Shemyakin I.G. Development and Testing of Monoclonal Antibodies-Based Diagnostic Preparation for Bacillus anthracis Spores Detection Using Latex Agglutination Method. Problems of Particularly Dangerous Infections. 2011;(4(110)):71-75. (In Russ.) https://doi.org/10.21055/0370-1069-2011-4(110)-71-75
Просмотров: 488
Послать статью по эл. почте 