Исследование взаимодействия бромистого этидия с клетками бактерий рода Yersinia в лиофилизированных/регидратированных препаратах
https://doi.org/10.21055/0370-1069-2012-1(111)-54-56
Аннотация
Исследовано взаимодействие бромистого этидия с клетками авирулентных штаммов Y. pestis и Y. pseudotuberculosis в лиофилизированных/регидратированных препаратах. Методом проточной цитофлуориметрии и при регистрации тотальной флуоресценции выявлена гетерогенность популяции по размерам частиц и содержанию в них нуклеиновых кислот. Показана корреляция между концентрацией колониеобразующих единиц в суспензии и приростом флуоресценции после добавки цетилтриметиламмонийбромида. Предложено использовать этот подход в качестве экспресс-метода оценки концентрации жизнеспособных клеток в лиофилизированных/регидратированных препаратах в процессе приготовления и хранения музейных штаммов, сухих живых вакцин и пробиотических препаратов грамотрицательных бактерий.
Ключевые слова
Yersinia pestis,
Yersinia pseudotuberculosis,
бромистый этидий,
флуоресценция,
жизнеспособность,
цитометрия
616.91/98
Об авторах
В. А. Говорунова
Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии
Россия
Россия
И. Г. Говорунов
Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии
Россия
Россия
В. В. Фирстова
Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии
Россия
Россия
Е. В. Зырина
Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии
Россия
Россия
Список литературы
1. Говорунов И.Г., Косарев Н.В., Евтодиенко Ю.В., Пучков Е.О. Исследование проницаемости мембран оболочки Escherichia coli для бромистого этидия. Микробиол. 1982; 51(5):731-4.
2. Ирхин А.И., Кондрашенко Т.Н., Пучков Е.О. Чувствительность мембран клеток Escherichia coli к детергентам разных классов. Микробиол. 1989; 58(2):217-21.
3. Косарев Н.В., Пучков Е.О. Способ определения концентрации бактерий в суспензии. А.с. СССР 1231077., опубл. 15.05.1986. Бюл. 18.
4. Пучков Е.О. Методы определения содержания и жизнеспособности микроорганизмов. Биотехнол. 1988; 4(1):132-42.
5. Пучков Е.О., Говорунов И.Г., Евтодиенко Ю.В., Косарев Н.В. Действие шока, вызванного низкой температурой, и внеклеточного образования льда на внешнюю и цитоплазматическую мембраны E. coli К-12. Микробиол. 1983; 52(1):136-9.
6. Санитарные правила «Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)» СП 1.3.1285-03. Бюл. норм. и метод. документов Госсанэпиднадзора. 2003, 3(13):61-144.
7. Тихонравов В.В., Агеев В.А., Ковтун В.П., Ковтун А.Л., Шведов В.В. Способ определения количества бактерий в биопрепарате. Патент России 2117291, опубл. 10.08.1998. Бюл. 22.
8. Davey H.M., Kell D.B. Flow cytometry and cell sorting of heterogeneous microbial populations: the importance of single-cell analyses. Microbiol. Rev. 1996; 60:641-96.
9. Greenstocka C.L., Ruddocka G.W. Interaction of ethidium bromide with DNA as studied by kinetic spectrophotometry. Chemico-Biological Interactions. 1975; 11(5):441-7.
10. Martins M., Viveiros M., Couto I., Costa S.S., Pacheco T., Fanning S. et. al. Identification of Efflux Pump-mediated Multidrug-resistant Bacteria by the Ethidium Bromide-agar Cartwheel Method. In Vivo. 2011; 25:171-8.
11. Puchkov E., Melkozernov A. Fiuorimetric assessment of Pseudomonas fluorescens viability after freeze-thawing using ethidium bromide. Lett. Appl. Microbiol. 1995; 21:368-72.
12. Viveiros M., Martins A., Paixão L., Rodrigues L., Martins M., Couto I. et al. Demonstration of intrinsic efflux activity of Escherichia coli K-12 AG100 by an automated ethidium bromide method. International Journal of Antimicrobial Agents. 2008; 31:458-62.
Рецензия
Для цитирования:
Говорунова В.А., Говорунов И.Г., Фирстова В.В., Зырина Е.В. Исследование взаимодействия бромистого этидия с клетками бактерий рода Yersinia в лиофилизированных/регидратированных препаратах. Проблемы особо опасных инфекций. 2012;(1(111)):54-56. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2012-1(111)-54-56
For citation:
Govorunova V.A., Govorunov I.G., Firstova V.V., Zyrina E.V. Investigation of Ethidium Bromide Interaction with Yersinia Bacterial Cells in Lyophilized/Rehydrated Preparations. Problems of Particularly Dangerous Infections. 2012;(1(111)):54-56. (In Russ.) https://doi.org/10.21055/0370-1069-2012-1(111)-54-56
Просмотров: 418
Послать статью по эл. почте 