Конструирование штамма Vibrio cholerae биовара эльтор гиперпродуцента холерного токсина II типа и определение оптимальных условий для продукции этого белка
https://doi.org/10.21055/0370-1069-2008-1(95)-56-59
Аннотация
Показано, что внедрение транспозона Tn5-Mob (KmR) в хромосому токсигенного штамма V. cholerae МАК757 биовара эльтор обусловило появление инсерционных мутантов с измененным геномом профага СТХφ. Реорганизация генома профага выразилась в делеции четырех генов zot, асе, сер, orfU при сохранении лишь оперона ctxAB, кодирующего синтез холерного токсина II типа. Указанное изменение генома профага СТХφ обусловило повышение продукции этого белка у клонов МАК757 chr::Tn5-Mob (KmR) Tox++более чем в 2000 раз. Среди инсерционных мутантов KmR Tox++ в качестве штамма-продуцента выбран один клон с наиболее высоким уровнем биосинтеза холерного токсина (42,0-45,0 мкг/мл), получивший обозначение КМ234. Подобраны условия для культивирования штамма КМ234, обеспечивающие наибольшую продукцию холерного токсина. Показано, что сконструированный штамм V. cholerae KM234 биовара эльтор является стабильным и эффективным продуцентом холерного токсина 2-го типа и может быть использован в производстве для получения этого белка, необходимого для приготовления холерных профилактических и диагностических препаратов.
Ключевые слова
холерный вибрион,
штамм-продуцент холерного токсина,
реорганизация генома профага СТХφ,
транспозон Tn5-Mob
При поддержке: гранты РФФИ № 06-04-48310 и РФФИ ОФИ № 06-04-08122
Об авторах
А. А. Горяев
Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб», Саратов
Россия
Россия
Е. Ю. Щелканова
Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб», Саратов
Россия
Россия
Ю. В. Лозовский
Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб», Саратов
Россия
Россия
И. В. Тучков
Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб», Саратов
Россия
Россия
Н. И. Смирнова
Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб», Саратов
Россия
Россия
Список литературы
1. Журавлева Е.А., Смирнова Н.И.//Мол. генет. - 1991. - №5. - С. 15-19.
2. Осин А.В., Нефедов К.С.,Ерошенко Г.А., Смирнова Н.И.//Генетика. - 2005. - Т. 41, №1. - С. 1-10.
3. Шагинян Б.М., Маракуша Б.И.//Журн. микробиол. - 1983. - №7. - С. 92-96.
4. Difeita V.J., Neely М., Taylor R.K., Bruss P.//Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1996. - Vol. 93. - P. 7991-7995.
5. Iwanasa M., Yamamoto K., Higa N., Ichinose Y. et al.//Microbiol. Immunol. - 1986. - Vol. 30 (11). - P. 1075-1083.
6. Simon R.//Mol. Gen. Genet. - 1984. - Vol. 196. - P. 413-420.
7. Svennerholm A.-M., Wiklund G.//J. Clin. Microbiol. - 1983. - Vol. 17. - P. 262-270.
Рецензия
Для цитирования:
Горяев А.А., Щелканова Е.Ю., Лозовский Ю.В., Тучков И.В., Смирнова Н.И. Конструирование штамма Vibrio cholerae биовара эльтор гиперпродуцента холерного токсина II типа и определение оптимальных условий для продукции этого белка. Проблемы особо опасных инфекций. 2008;(1(95)):56-59. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2008-1(95)-56-59
For citation:
Goryaev A.A., Shchelkanova E.Yu., Lozovsky Yu.V., Touchkov I.V., Smirnova N.I. Construction of an El Tor Biovariant Vibrio cholerae Strain Capable of Type II Cholera Toxin Hyperproduction and Determining the Optimal Conditions for the Production of This Protein. Problems of Particularly Dangerous Infections. 2008;(1(95)):56-59. (In Russ.) https://doi.org/10.21055/0370-1069-2008-1(95)-56-59
Просмотров:
529
Послать статью по эл. почте 