Обнаружение антител к протективному антигену Bacillus anthracis с использованием реакции непрямой гемагглютинации и твердофазного иммуноферментного метода

Протективный антиген, выделенный гель-хроматографией с помощью сефакрила S-300 из КФ штамма B. anthracis СТИ, использован для обнаружения антител. Чувствительность РНГА и ТИФМ с гипериммунной сывороткой к ПА соответствовала титрам 1:128000 - 1:256000. Специфическая активность РНГА c сыворотками 22 морских свинок, выживших после заражения B. anthracis 81/1, была в титре 1:40 - 1:81920, ТИФМ - 1:160 - 1:81920. В сыворотках больных сибирской язвой титры антител обнаружены в РНГА в титрах 1:20 - 1:20480, в ТИФМ - 1:800 - 1:12800. Отмечено нарастание титра антител в парных сыворотках в зависимости от срока заболевания. Специфичность РНГА подтверждена РТНГА с ПА. Оба метода равнозначны для диагностики заболевания, однако преимущество РНГА в простоте, скорости постановки и учета результатов.

протективный антиген (ПА), эритроцитарный диагностикум, реакция непрямой гемагглютинации (РНГА), реакция торможения непрямой гемагглютинации (РТНГА), твердофазный иммуноферментый метод (ТИФМ)

1. Абалакин В.А., Сергеева Л.В., Черкасский Б.Л. Выявление специфических антигенов при экспериментальной сибирской язве. Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1989; 12:63-7.

2. Баркова И.А., Липницкий А.В., Барков А.М., Евтеева Е.В. Использование иммуноглобулинов к отдельным внеклеточным антигенам Bacillus anthracis СТИ для идентификации сибиреязвенного микроба. Биотехнология. 2005; 2: 91-5.

3. Баркова И.А., Алексеев В.В., Липницкий А.В., Барков А.М., Буханцова Л.В. Продукция белков S-слоя разными штаммами Bacillus anthracis. Пробл. особо опасных инф. 2008;. 4(98):29-32.

4. Баркова И.А., Липницкий А.В., Барков А.М. Способ получения иммунной сыворотки к антигенам вирулентного штамма Bacillus antracis. Патент № 2252031, опубл. 20.05.2005. Бюл. № 14.

5. Бахтеева И.В., Титарева Г.М., Кравченко Т.Б. и др. Сибирская язва: ранние этапы внутриклеточной стадии развития инфекции. Мол. генет., микробиол. и вирусол. 2005; 4:3-8.

6. Дубровина В.И., Голубинский Е.П., Колесникова О.Б. Показатели неспецифической резистентности морских свинок, иммунизированных Bacillus anthracis СТИ-1 и комплексом его антигенов. Бюл. ВСНЦ СО РАМН. 2004; 1(2):73-6.

7. Леви М.И., Езепчук Ю.В., Неменова М.А. Применение протективного антигена для реакции пассивной гемагглютинации при сибирской язве. Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1968; 10:132-4.

8. Ермакова И.А., Липницкий А.В., Барков А.М. Способ выделения высокомолекулярного соматического сибиреязвенного антигена. Патент № 2230570, опубл. 20.06.2004. Бюл. № 17.

9. Меньшов П.И., Шмутер М.Ф. Подбор оптимальных методов формализации эритроцитов для приготовления стойких диагностикумов для чумы и бруцеллеза. Пробл. особо опасных инф. 1969; 6:231-2.

10. Онищенко Г.Г., Кутырев В.В., редакторы. Лабораторная диагностика опасных инфекционных болезней. М.: Медицина; 2009. 472 с.

11. Фримель Г., редактор. Иммунологические методы. М.: Медицина; 1987. 472 с.

12. Buchanan T.M., Feeley J.C., Haues P.S., Brachman P.S. Anthrax in direct hemagglutination test. J. Immunol. 1971; 107:1631-6.

13. Ivins B.E., Ezzell J.W., Jemski J. et al. Immunization Studies with Attenuated Strains of Bacillus anthracis. Infect. Immun. 1986; 52:454-8.

14. Jernigan D.B., Raghunathan P.L., Bell B.P. et al. Investigation of biotrrorism-related anthrax, United States, 2001: epidemiologic findings. J. Emer. Infect. Dis. 2002; 8(10):1019-29.

15. Johnson-Winegar A. Comparison of enzyme-linked immunosorbend and indirect hemagglution assays for determining anthrax antibodies. J. Clinic. Microbiol. 1984; 20(3):357-61.

16. Little S.F, Knudson G.B. Comparative Efficacy of Bacillus anthracis Live Spore Vaccine and Protective Antigen Vaccine against Anthrax in the Guinea Pig. Infect. Immun. 1986; 52:509-12.