Конструирование кандидата в вакцинные штаммы Yersinia pestis с пониженной реактогенностью
https://doi.org/10.21055/0370-1069-2011-1(107)-70-73
Аннотация
Разработана методология направленного конструирования лишенных маркеров антибиотикоустойчивости неревертирующих ΔlpxM мутантов Y. pestis, сочетающая прямой сайт-направленный мутагенез, клонирование мутантной аллели ΔlpxM::cat в суицидном векторе pCVD442, гомологичную рекомбинацию in vivo и удаление кассеты устойчивости к антибиотику. Созданный на основе вакцинного штамма Y. pestis EV линии НИИЭГ нокаутный мутант по гену lpxM, лишенный маркеров антибиотикоустойчивости, синтезировал липополисахарид (ЛПС) со сниженной способностью стимулировать продукцию TNF-α. Степень снижения провоспалительной активности ЛПС, синтезируемого мутантным штаммом Y. pestis EVΔlpxM, была значительно выше в тестах на клетках-мишенях человека по сравнению с мышиной моделью.
Ключевые слова
616.981.452:576.8.097.3
Об авторах
С. А. Агеев
Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии
Россия
Россия
Р. З. Шайхутдинова
Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии
Россия
Россия
И. В. Бахтеева
Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии
Россия
Россия
Г. М. Титарева
Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии
Россия
Россия
Т. И. Комбарова
Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии
Россия
Россия
С. В. Дентовская
Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии
Россия
Россия
А. П. Анисимов
Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии
Россия
Россия
Список литературы
1. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л.: Государственное издательство медицинской литературы; 1962, 104 c.
2. Дентовская С.В., Шайхутдинова Р.З., Книрель Ю.А. Иванов С.А., Анисимов А.П. Конструирование вакцинных штаммов грамотрицательных бактерий со сниженной реактогенностью. Мол. генет. 2006; 2:3-8.
3. Дентовская С.В., Бахтеева И.В., Титарева Г.М., Шайхутдинова Р.З., Кондакова А.Н., Быстрова О.В. и др. Структурное разнообразие и эндотоксическая активность липополисахарида Yersinia pestis. Биохимия. 2008; 73(2):237-46.
4. Anisimov A.P., Lindler L.E., Pier G.B. Intraspecific diversity of Yersinia pestis. Clin. Microbiol. Rev. 2004; 17(2):434-64.
5. Anisimov A.P., Shaikhutdinova R.Z., Pan'kina L.N., Feodorova V.A., Savostina E.P., Bystrova O.V. et al. Effect of deletion of the lpxM gene on virulence and vaccine potential of Yersinia pestis in mice. J. Med. Microbiol. 2007; 56( 4):443-53.
6. Datsenko K., Wanner B. One-step inactivation of chromosomal genes in Escherichia coli K-12 using PCR products. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000; 97:6641-45.
7. Donnenberg M.S., Kaper J.B. Construction of an eae deletion mutant of enteropathogenic Escherichia coli by using a positive-selection suicide vector. Infect. Immun. 1991; 29(12):4310-7.
8. Feodorova V.A., Pan'kina L.N., Savostina E.P., Sayapina L.V., Motin V.L., Dentovskaya S.V. et al. A Yersinia pestis lpxM-mutant live vaccine induces enhanced immunity against bubonic plague in mice and guinea pigs. Vaccine. 2006; 25:7620-8.
9. Frey J. Biological safety concepts of genetically modified live bacterial vaccines. Vaccine. 2006; 25:5598-605.
10. Knirel Y.A., Lindner B., Vinogradov E.V., Kocharova N.A., Senchenkova S.N., Shaikhutdinova R.Z. et al. Temperature-dependent variations and intraspecies diversity of the structure of the lipopolysaccharide of Yersinia pestis. Biochemistry. 2005; 44(5):1731-43.
11. Maniatis T., Fritsch E., Sambrook J. Molecular cloning: a laboratory manual. N.Y. Cold Spring Harbor Laboratory. 1982; 281 p.
12. Miller J.H. Experiments in Molecular Genetics. 1972. 280 p.
13. Walsh C., Gangloff M., Monie T., Smyth T., Wei B., McKinley T.J. et al. Elucidation of the MD-2/TLR4 interface required for signaling by lipid IVa. J. Immunol. 2008; 181(2):1245-54.
Рецензия
Для цитирования:
Агеев С.А., Шайхутдинова Р.З., Бахтеева И.В., Титарева Г.М., Комбарова Т.И., Дентовская С.В., Анисимов А.П. Конструирование кандидата в вакцинные штаммы Yersinia pestis с пониженной реактогенностью. Проблемы особо опасных инфекций. 2011;(1(107)):70-73. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2011-1(107)-70-73
For citation:
Ageev S.A., Shaikhutdinova R.Z., Bakhteeva I.V., Titareva G.M., Kombarova T.I., Dentovskaya S.V., Anisimov A.P. Construction of Candidate Yersinia pestis Vaccine Strains with Reduced Reactogenicity. Problems of Particularly Dangerous Infections. 2011;(1(107)):70-73. (In Russ.) https://doi.org/10.21055/0370-1069-2011-1(107)-70-73
Просмотров: 405
Послать статью по эл. почте 