Preview

Проблемы особо опасных инфекций

Расширенный поиск

Разработка иммуноферментных моноклональных тест-систем для выявления возбудителей сапа и мелиоидоза

https://doi.org/10.21055/0370-1069-2018-3-60-65

Полный текст:

Аннотация

Цель. Создание лабораторных  образцов  иммуноферментных  моноклональных  тест-систем  для  выявления возбудителей сапа и мелиоидоза. Материалы и методы. В работе использованы микробные культуры и гибридные клеточные линии, полученные из государственной коллекции микроорганизмов филиала ФГБУ «48 ЦНИИ» Минобороны России  (г. Киров). Клетки  гибридом  культивировали  в  перитонеальной  полости  мышей  линии BALB/с. Препараты сапных и мелиоидозных моноклональных антител выделяли из асцитных жидкостей осаждением сульфатом аммония и очисткой ионообменной хроматографией. Специфические компоненты создаваемых тест-систем  подвергали  сублимационному  высушиванию  в  соответствующих  защитных  средах. Исследование диагностических свойств разработанных тест-систем проводили методом непрямого твердофазного иммуноферментного анализа. Результаты и обсуждение. В результате работы получены препараты моноклональных антител in vivo, а также выделены и очищены иммуноглобулины из асцитных жидкостей. Подобраны пары моноклональных антител для изготовления специфических компонентов. Изготовлены лабораторно-экспериментальные серии  иммуноферментных  моноклональных  тест-систем,  позволяющие  специфически  выявлять  возбудителей сапа и мелиоидоза в концентрации 0,5·106 м.к./мл и более. Показано отсутствие перекрестных реакций с близкородственными сапрофитами и гетерологичными микроорганизмами в концетрации 1,0·108 м.к./мл. Показана принципиальная возможность проведения дифференциации Burkholderia mallei и Burkholderia pseudomallei методом иммуноферментного анализа. Тест-системы перспективны для последующей регистрации в качестве медицинских изделий для диагностики in vitro.

Об авторах

А. А. Кытманов
Филиал ФГБУ «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны, Киров
Россия


Г. Д. Елагин
Филиал ФГБУ «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны, Киров
Россия


Г. В. Куклина
Филиал ФГБУ «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны, Киров
Россия


Д. В. Печенкин
Филиал ФГБУ «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны, Киров
Россия


О. О. Фоменков
Филиал ФГБУ «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны, Киров
Россия


А. В. Еремкин
Филиал ФГБУ «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны, Киров
Россия


С. С. Ипатов
Филиал ФГБУ «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны, Киров
Россия


Э. Р. Зиганшин
Филиал ФГБУ «48 Центральный научно-исследовательский институт» Министерства обороны, Киров
Россия


Список литературы

1. Кэтти Д., Редактор. Антитела. Методы. М.: Мир, 1991. Т. 1. 287 с.

2. Замарина Т.В., Храпова Н.П., Корсакова И.И., Пименова Е.В. Конструирование экспериментальной тест-системы иммуноферментной на основе моноклональных антител к антигену 200 kDa возбудителя мелиоидоза. Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. 2014; 3:93–95.

3. Прохватилова Е.В., Храпова Н.П. О получении моноклональных люминесцирующих иммуноглобулинов для обнаружения возбудителя мелиоидоза. В кн.: эколого-эпидемиологический надзор за природно-очаговыми инфекциями в Северном Прикаспии. Астрахань; 1996. с. 147–8.

4. Прохватилова Е.В. О разработке новых иммунобиологических препаратов на основе моноклональных антител к Burkholderia malleiи Burkholderia pseudomallei. Проблемы особо опасных инфекций. 2003; 2:153–8.

5. Cheng A.C., Currie B.J. Melioidosis: epidemiology, pathophysiology and management. Clin. Microbiol. Rev. 2005; 18(2):383–416. DOI: 10.1128/CMR.18.2.383-416.2005.

6. Harvey S.P., Minter J.M. Ribotyping of Burkholderia mallei isolates.FEMS Immunol. Med. Microbiol. 2005. 44(1):91–7. DOI: 10.1016/j.femsim.2004.12.002.

7. Khrapova N.P., Tikhonov N.G., Prokhvatilova Y.V. Detection of Glycoprotein of Burkholderia pseudomallei. Emerg. Infect. Dis. 1998; 4(2):336–7. DOI: 10.3201/eid0402.980229.

8. Nakane P.K., Kawaoi A. Peroxidase-labeled antibody. A new method of conjugated J. Histochem. Cytochem. 1974; 22(12):1084–91. DOI: 10.1177/22.12.1084.

9. Sudhir K. Dohre, Urmil Tuteja, Subodh Kumar Generation and Characterization of Monoclonal Antibodies Specific to Burkholderia mallei. Int. J. Curr. Microbiol. App. Sci. 2016; 5(5):342–9. DOI: 10.20546/ijcmas.2016.505.035.

10. Woods K.L., Boutthasavong L., NicFhogartaigh C., Lee S.J., Davong V., AuCoin D.P., Dance D.A.B. Evaluation of a rapid diagnostic test for detection of Burkholderia pseudomallei in the Lao People’s Democratic Republic. J. Clin. Microbiol. 2018; 56(7):e02002–17. DOI: 10.1128/jcm.02002-17.

11. Zhang S., Feng S.H., Li B., Kim H.Y., Rodriguez J., Tsai S, Lo S.C. In vitroand in vivostudies of monoclonal antibodies with prominent bactericidal activity against Burkholderia pseudomallei andBurkholderia mallei. Clin. Vaccine Immunol.2011; 18(5):825–34. DOI: 10.1128/CVI.00533-10.


Для цитирования:


Кытманов А.А., Елагин Г.Д., Куклина Г.В., Печенкин Д.В., Фоменков О.О., Еремкин А.В., Ипатов С.С., Зиганшин Э.Р. Разработка иммуноферментных моноклональных тест-систем для выявления возбудителей сапа и мелиоидоза. Проблемы особо опасных инфекций. 2018;(3):60-65. https://doi.org/10.21055/0370-1069-2018-3-60-65

For citation:


Kytmanov A.A., Elagin G.D., Kuklina G.V., Pechenkin D.V., Fomenkov O.O., Eremkin A.V., Ipatov S.S., Ziganshin E.R. Development of Immuno-Enzymatic Monoclonal Tests-Systems for the Detection of Glanders and Melioidosis Agents. Problems of Particularly Dangerous Infections. 2018;(3):60-65. (In Russ.) https://doi.org/10.21055/0370-1069-2018-3-60-65

Просмотров: 89


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 0370-1069 (Print)
ISSN 2658-719X (Online)