Лихорадка Марбург – острое природно-очаговое заболевание, характеризующееся тяжелым течением, геморрагическим синдромом, высоким уровнем контагиозности и летальности. Возбудителем заболевания является РНК-содержащий вирус, принадлежащий к семейству филовирусов (Filoviridae). Отсутствие вакцин и профилактических препаратов является основной проблемой, с которой сталкиваются врачи и ученые, участвующие в борьбе с лихорадкой Марбург. Разработка эффективных вакцин актуальна для защиты населения, проживающего в природных очагах и медицинского персонала в очагах эпидемий, а также для обеспечения безопасной научной работы в лабораториях BSL-4. В обзоре рассматриваются биомодели, подходящие для изучения патогенеза филовирусных инфекций, доклинического исследования специфической активности и безвредности кандидатных вакцин против лихорадки Марбург, а также различные варианты этих вакцин.

Проведен анализ имеющейся информации о наличии и использовании мобильных лабораторий биологического профиля в целях осуществления индикации и идентификации патогенных биологических агентов в зарубежных странах и Российской Федерации. Выделены основные типы мобильных лабораторий, имеющихся за рубежом и в России. Представлены основные этапы эволюции создания и применения мобильных лабораторий в системе противочумных учреждений Роспотребнадзора, показано расширение спектра направлений их использования в России. Проанализировано практическое применение российских мобильных лабораторий в России и за рубежом для обеспечения санитарно-эпидемиологического благополучия при проведении массовых мероприятий, ликвидации последствий стихийных бедствий, реагировании на эпидемические проявления особо опасных инфекционных болезней. Выделены основные направления использования мобильных лабораторий биологического профиля в России. Освещено их использование в ходе выполнения Российской Федерацией различных программ оказания содействия странам-партнерам по вопросам реализации Международных медико-санитарных правил (2005), борьбы с опасными инфекционными болезнями. Представлены новейшие разработки – модернизированный мобильный комплекс СПЭБ второго поколения, мобильная лаборатория мониторинга и диагностики, аэромобильный противоэпидемический комплекс.

Обзор литературы посвящен эпидемиологическим аспектам распространения в мире особо опасных микозов (кокцидиоидомикоз, гистоплазмоз, бластомикоз, паракокцидиоидомикоз). Представлен прогноз заболеваемости на несколько ближайших лет. Из всех эндемических микозов наибольшую опасность представляет кокцидиоидомикоз, эндемичный для регионов Северной Америки, при заражении которыми чаще всего возникают осложнения, вплоть до диссеминации процесса у иммуноослабленных лиц. Гистоплазмоз, также относящийся к группе особо опасных микозов, поражает как людей, так и животных, эндемичен для Северной, Центральной и Южной Америки, а также Азии и Австралии. Наиболее изученные эндемичные регионы заражения бластомикозом находятся на территории Северной Америки, а паракокцидиоидомикоз эндемичен в странах Латинской Америки. Анализ работ и опубликованных материалов по особо опасным микозам за последние три года свидетельствует о повышении заболеваемости ими в мире. Подобная картина связана, прежде всего, с увеличением количества иммунокомпрометированных субъектов. Важным этапом для улучшения диагностики возбудителей особо опасных микозов является внедрение современных методов ранней диагностики микозов, в частности, молекулярно-генетических и секвенирования генома возбудителя. Это также позволило бы обнаруживать больных вне эндемических очагов.

Рукокрылые – один из наиболее многочисленных отрядов млекопитающих, способных выступать в качестве природных хозяев и переносчиков различных вирусов, бактерий и патогенных грибов. В период 2007–2013 гг. у рукокрылых обнаружено 248 новых вирусов, относящихся к 24 семействам. В последние годы целый ряд новых инфекций, которые провоцировали тяжелые заболевания у людей, были связаны с переносчиками – летучими мышами. Сегодня их рассматривают как возможный источник вирусов Эбола, Марбург и Хендра, возбудителей тяжелого острого респираторного синдрома, а также многих других летальных болезней. Особое внимание рукокрылым стало уделяться после установления факта их вовлечения в циркуляцию эболавируса Заир и их возможного участия в формировании природных очагов этой инфекции. В настоящее время природным резервуаром эболавируса Заир, а также некоторых других филовирусов (Filoviridae), считаются рукокрылые. Помимо филовирусов от рукокрылых на Африканском континенте выделяли другие значимые для здравоохранения вирусы – лиссавирусы (Rhabdoviridae, Lyssavirus), хенипавирусы (Paramixoviridae, Henipavirus) и коронавирусы (Coronaviridae, Alphacoronavirus, Betacoronavirus), которые также могут циркулировать среди рукокрылых в Западной Африке. В представленной работе проанализированы имеющиеся в литературных источниках сведения о распространении рукокрылых на территории Африканского континента, их видовое разнообразие, особенности экологии и поведения. Представлены сведения о том, для каких инфекций они могут служить потенциальными носителями. Имеется описание особенностей взаимодействия людей, проживающих на Африканском континенте, с летучими мышами разных видов. Представленный обзор посвящен анализу результатов изучения популяционных, экологических и эпидемиологических факторов, влияющих на поддержание циркуляции ряда наиболее опасных для человека вирусов (филовирусов, лиссавирусов, хенипавирусов и коронавирусов) среди африканских рукокрылых. Обосновывается необходимость изучения вышеперечисленных факторов для популяций рукокрылых Гвинейской Республики.

В статье проведен анализ востребованности гетерологичных препаратов и показана необходимость их применения в практическом здравоохранении. В настоящее время в Российской Федерации зарегистрировано 15 гетерологичных иммуноглобулинов и сывороток, из них девять – против бактериальных и вирусных инфекций (сибирская язва, дифтерия, столбняк, ботулизм, бешенство, противогангренозная), одна – против яда змей, пять – иммуноглобулины антитимоцитарные отечественных и зарубежных производителей. Анализ данных показал, что наиболее востребованы в клинической практике иммуноглобулин антирабический, противодифтерийная и противоботулинические сыворотки типов А, В и Е. Выпуск же других лекарственных препаратов данной группы, например, сыворотки противогангренозной, имеет тенденцию к снижению. Достаточное обеспечение лечебно-профилактических учреждений данными препаратами имеет большое значение для оказания своевременной медицинской помощи при инфекционных заболеваниях, таких как сибирская язва, дифтерия, столбняк, ботулизм, бешенство, а также при укусах змей. В профилактике и лечении некоторых заболеваний (экстренная помощь при сибирской язве, бешенстве, укусах ядовитых змей) гетерологичные препараты до сих пор зачастую не имеют альтернативы. Основной проблемой регулирования обращения гетерологичных препаратов является отсутствие критериев качества, эффективности и безопасности, предъявляемых к другим иммунобиологическим препаратам. Выработка единых требований к стандартизации гетерологичных сывороток и иммуноглобулинов различной специфичности, принципов оценки их эффективности и безопасности, необходима для гармонизации действующих инструкций по медицинскому применению. Разработанные ранее подходы ВОЗ для гетерологичных сывороток к ядам змей могут использоваться для проведения мониторинга и процесса гармонизации нормативно-правовых документов по совершенствованию, оценке качества, эффективности и безопасности аналогичных препаратов, находящихся в обращении на фармацевтическом рынке Российской Федерации.

Цель исследования – апробация питательной среды на основе ферментативного гидролизата кукурузного экстракта сгущенного для масштабированного производства вакцины чумной живой, а также проверка качества полученных серий согласно регламентированным показателям. Материалы и методы. Для выращивания биомассы в процессе производства вакцины чумной живой использована плотная питательная среда на основе кукурузного экстракта. Параметры качества полученного вакцинного препарата изучались регламентированными методами, изложенными  в  нормативной  документации. Результаты и обсуждение. Контроль  вакцины  осуществляли  на всех этапах ее изготовления, включая контроль готовой лекарственной формы, в строгом соответствии с утвержденной нормативной документацией. Все полученные экспериментально-производственные серии соответствовали регламентированным показателям. Апробация среды в условиях производственного цикла получения вакцины чумной живой показала ее высокую продуктивность и возможность применения в промышленном выпуске препарата.

С момента открытия в 1971 и до 2007 года Центрально-Кавказский высокогорный природный очаг чумы характеризовался почти непрерывной эпизоотической активностью. Начиная с 2008 г. и вплоть до настоящего времени длится межэпизоотический период – из полевого материала не удается выделить штаммы возбудителя чумы. В связи с этим является актуальной задача прогнозирования активизации очага, особенно на фоне регистрации в Российской Федерации случаев заболевания человека чумой в 2014–2016 гг. Цель исследования – создать прогностическую модель для количественного прогноза возможной активизации очага или продолжения межэпизоотического периода. Материалы и методы. Использованы архивные данные ФКУЗ «Кабардино-Балкарская ПЧС»: журналы вскрытия грызунов, ежегодные отчеты об эпизоотологическом обследовании; метеорологические данные по метеостанции «Кисловодск» за 1989–2017 гг.; данные ФКУЗ «СтавНИПЧИ» за 2010–2017 гг. Для статистической обработки использованы методы непараметрического корреляционного анализа Спирмена, регрессионный анализ, в том числе метод главных компонент, квартильный анализ и непрерывная последовательная статистическая процедура распознавания. Результаты и обсуждение. Получена статистическая модель, позволяющая прогнозировать альтернативу: отсутствие или наличие активности очага чумы с упреждением один год, с вероятностью 99 % и выше. Модель проверена в течение семи лет на ретроспективном материале. Все предположения оказались верными. Оперативные прогнозы с  2015  по  2017  год  также  подтвердились. Однако не  исключена  возможность  быстрого  изменения  условий  существования  экологической  системы Центрально-Кавказского высокогорного природного очага чумы из-за глобального изменения климата. В связи с этим прогностическая модель будет ежегодно проверяться на информативность используемых предикторов и, при необходимости, корректироваться.

Цель работы – изучение биологических и молекулярно-генетических свойств культур Bacillus anthracis, выделенных на курируемой территории Сибири и Дальнего Востока с 1959 по 2013 год. Материалы и методы. В исследование отобрано 39 музейных штаммов B. Anthracis, изолированных из материалов различного происхождения в 11 субъектах Сибири и Дальнего Востока во время эпизоотических и эпидемических осложнений по сибирской язве и мониторинга почвенных очагов. Штаммы изучены по 16 культурально-морфологическим и 23 биохимическим тестам, вирулентности, плазмидному составу, 15 вариабельным VNTR- и 13 SNP-локусам. Результаты и обсуждение. Показана фенотипическая неоднородность и значительная генотипическая гетерогенность популяции штаммов сибиреязвенного микроба на курируемой территории. Типичными культурально-морфологическими  и  биохимическими  свойствами обладают 87,2 % изолятов. По результатам молекулярно-генетического типирования выявлено 20 VNTR-профилей и три канонических SNP кластера, которые отнесены к двум глобальным генетическим линиям А и В. Полученные результаты могут служить в качестве генетического маркера при расследовании случаев сибирской язвы, возможных актов биотерроризма и оценке эпизоотической активности СНП на определенной административной территории. На основе систематизации и анализа сведений  о  происхождении,  биологических  и  молекулярно-генетических  свойств штаммов создана база данных «биологические  свойства  штаммов Bacillus  anthracis,  изолированных  на  территории Сибири и Дальнего Востока», а также получено свидетельство о государственной регистрации. Структура базы данных пополняема и может быть расширена по результатам применения новых технологий и методов.

Цель. Создание лабораторных  образцов  иммуноферментных  моноклональных  тест-систем  для  выявления возбудителей сапа и мелиоидоза. Материалы и методы. В работе использованы микробные культуры и гибридные клеточные линии, полученные из государственной коллекции микроорганизмов филиала ФГБУ «48 ЦНИИ» Минобороны России  (г. Киров). Клетки  гибридом  культивировали  в  перитонеальной  полости  мышей  линии BALB/с. Препараты сапных и мелиоидозных моноклональных антител выделяли из асцитных жидкостей осаждением сульфатом аммония и очисткой ионообменной хроматографией. Специфические компоненты создаваемых тест-систем  подвергали  сублимационному  высушиванию  в  соответствующих  защитных  средах. Исследование диагностических свойств разработанных тест-систем проводили методом непрямого твердофазного иммуноферментного анализа. Результаты и обсуждение. В результате работы получены препараты моноклональных антител in vivo, а также выделены и очищены иммуноглобулины из асцитных жидкостей. Подобраны пары моноклональных антител для изготовления специфических компонентов. Изготовлены лабораторно-экспериментальные серии  иммуноферментных  моноклональных  тест-систем,  позволяющие  специфически  выявлять  возбудителей сапа и мелиоидоза в концентрации 0,5·10⁶ м.к./мл и более. Показано отсутствие перекрестных реакций с близкородственными сапрофитами и гетерологичными микроорганизмами в концетрации 1,0·10⁸ м.к./мл. Показана принципиальная возможность проведения дифференциации Burkholderia mallei и Burkholderia pseudomallei методом иммуноферментного анализа. Тест-системы перспективны для последующей регистрации в качестве медицинских изделий для диагностики in vitro.

Эпидемические осложнения на территории Горно-Алтайского высокогорного природного очага чумы,  связанные  с  ростом  численности носителей и переносчиков этого опасного заболевания,  потребовали усиления профилактической направленности эпиднадзора. Цель – оценка эффективности дезинсекции и дератизации при проведении противоэпидемических мероприятий. Материалы и методы. Исследования проводились в 2014–2017 гг. На территории Кош-Агачского района Республики Алтай на основе архивных и оперативных материалов Алтайской противочумной станции, Управления Роспотребнадзора по Республике Алтай, собственных данных. В качестве инструмента использовалась «Интерактивная карта по управлению оздоровительными мероприятиями в Горно-Алтайском высокогорном природном очаге чумы». Результаты и обсуждение. Наиболее радикальными разделами комплекса профилактических мероприятий по чуме остаются дезинсекция и дератизация. Применение современных методов и средств контроля численности носителей и переносчиков инфекции свидетельствует о высокой противоэпидемической их эффективности. Проведение инсектицидных и родентицидных обработок на стоянках животноводов, располагающихся на эпизоотических участках, дезинсекция и дератизация в крупных населенных пунктах на территории очага позволило снизить риск инфицирования населения. Техническая эф-фективность полевой дезинсекции составила 96,7 %, поселковой дератизации и дезинсекции – от 91,6 до 100 %. Проведение экстренных инсектицидных и родентицидных обработок, наряду с другими мероприятиями, обеспечило эпидемиологическое благополучие по чуме.

Целью исследования явился сравнительный биоинформационный анализ продуктов трансляции генов rtxa штаммов V. Cholerae разных серогрупп, выделенных от больных и из объектов окружающей среды. Материалы и методы. Использовано 32 штамма из коллекции Ростовcкого противочумного института. Секвенирование ДНК проводили на платформе Miseq (Illumina), для анализа и идентифицации генов использовали программы BioEdit 7.2.5, BLASTN 2.2.29, Blastp, Vector NTI Advance 11. Результаты и обсуждение. Гены rtxa изученных штаммов представлены множеством аллелей. AlignX-анализ продуктов их трансляции позволил разделить 32 белка на три отдельных кластера. Первый включал близкие прототипу белки штаммов О1 и неО1/неО139, второй – только неО1/неО139, третий – О139. Blastp-анализ показал, что белки первого кластера сохранили все характерные для MARTX домены – ACD (актин-связывающий), RID (инактивирующий ГТФазу), CPD (цистеиновой протеазы) и ABH (альфа-бета гидролаз), что свидетельствует о вероятности проявления ими типичной активности. У трех штаммов обнаружен новый домен Hia (предполагаемого фактора адаптации). В белках второго кластера отсутствовал ACD, но сформировался дополнительный RID; в двух из них отсутствовал и ABH, но у одного появился домен VIP2 (модификатора G-актина), а у второго – Hia. Эти данные согласуются с предположением J. Dolores, K.J.F.Satchell (2013) о возможном «преображении» актимодулятора MARTX в токсины с иными механизмами действия. Белки вибрионов О139 серогруппы имели все специфичные домены, кроме ACD. Для ряда выявленных нами измененных белков в NCBI найдены полные гомологи, принадлежащие штаммам из других регионов мира. Присутствие сходных детерминант в геномах штаммов различного происхождения указывает на неслучайный характер их сохранения. Не исключено, что отдельные штаммы «специально» изменяют эти гены либо полностью выключают синтез высокомолекулярного токсина в целях энергосбережения.

Цель. Создание иммуноферментной тест-системы для выявления спор Вacillus anthracis. Материалы и методы. В работе использованы штаммы из государственной коллекции микроорганизмов филиала ФГБУ «48ЦНИИ» Минобороны России (г.Киров) и мыши линии BALB/c. Гибридизацию В-лимфоцитов и миеломных клеток SP2/0-Ag14 проводили по методике G. Kohler и C. Milstein в модификации De St. Fazekas и P. Scheidegger. Клетки гибридом культивировали в перитонеальной полости мышей линии BALB/с. Моноклональные антитела выделяли из асцитных жидкостей осаждением сульфатом аммония и очисткой ионообменной хроматографией. Исследование специфической активности супернатантов гибридом, асцитных жидкостей, очищенных моноклональных антител  проводили  «сэндвич» - методом  иммуноферментного  анализа. Специфические  компоненты  создаваемых тест-систем подвергали сублимационному высушиванию в соответствующих защитных средах. Результаты и выводы. Получены гибридные клеточные линии, продуцирующие специфические моноклональные антитела к споровым  антигенам В. anthracis,  и  асцитные  жидкости,  из  которых  выделены  иммуноглобулины. Подобраны оптимальные сочетания моноклональных антител в качестве сенситина и в составе иммуноферментного конъюгата. Наибольшую чувствительность иммуноферментного анализа при выявлении споровых антигенов сибиреязвенного микроба обеспечила пара сенситин–конъюгат: 272E10G1–272F7A10. Определена оптимальная концентрация иммуноглобулинов для сенсибилизации планшета. Разработана иммуноферментная тест-система для вы-явления спор В. anthracisс пределом обнаружения 5,0·10⁵ спор/мл. Показано отсутствие перекрестных реакций с близкородственными сапрофитами и гетерологичными микроорганизмами в концентрации 1,0·10⁸ м.к./мл.

В 2017 г. c 15 октября по 21 ноября в г. Алматы зарегистрировано пять завозных случаев холеры – три больных и два вибриононосителя. Заболевания людей закончились выздоровлением. Цель работы – характеристика завозных  случаев  холеры  в  г. Алматы  в  2017 г.;  изучение  свойств  штаммов  холерного  вибриона,  выделенных от  больных  и  вибриононосителей. Материалы  и  методы. Проанализированы  истории  болезни;  исследованы сыворотки крови и испражнения от больных и контактных, изучен спектр чувствительности к антибактериальным препаратам выделенных штаммов холерных вибрионов согласно «Методическим указаниям по лабораторной  диагностике  холеры»  от  27.09.2010 г.  № 252. Применены  эпидемиологический,  микробиологический,  иммунологический  и  молекулярно-генетический  методы  исследования. Результаты  и  обсуждение. В результате молекулярно-генетических исследований в пробах материала от трех больных и двух контактных обнаружены гены  специфичности  холерного  вибриона wbeN и гены  эпидемической  значимости ctxА и tcpА. Выделенные штаммы в двух случаях идентифицированы как Vibrio cholerae O1 Eltor Inaba, а в одном – Vibrio cholerae O1 Eltor Hykoshima, I группы Хейберга, токсигенные, гемолизнегативные, в пробе Грейга – вирулентные, высокочувствительные к ципрофлоксацину, доксициклину, эритромицину, тетрациклину и средней чувствительности к левомицетину. Установлено, что страна выноса болезни во всех случаях – Индия. Проведены соответствующие противоэпидемические и профилактические мероприятия по локализации и ликвидации очагов с целью предупреждения возможной угрозы эпидемического распространения инфекции среди населения.

Цель работы  направлена  на  разработку  алгоритмов  дифференциальной ПЦР индикации  бактерий  рода Brucellaс использованием баз данных их геномов. Материалы и методы. В работе использовались ресурсы Национального центра биотехнологической информации (NCBI) и программные утилиты «BLAST» и «Vector NTI 9.1.0». Для ПЦР амплификации использовались нуклеиновые кислоты B. suis, B. abortus, B. melitensis,а также плазмидная ДНК с маркерными вставками. Результаты и обсуждение. Проанализированы последовательности генов бруцелл, одни из которых имеются у бактерий рода Brucella, другие лишь у представителей вида B. melitensis, третьи лишь у представителей вида B. abortus. В результате дизайна праймеров и зондов для индикации бактерий рода Brucella и представителей видов B. melitensis и B. abortus установлены критерии, позволяю-щие амплифицировать маркерные последовательности этих бактерий, с одновременной их дифференциацией в условиях одной реакции. Определение штаммовых различий в пределах одного вида бруцелл описано в методике мультилокусного VNTR анализа, а профили тандемных повторов различных штаммов B. melitensis и B. abortus имеются в открытом доступе. Для контроля хода амплификации разработан положительный контроль, имеющий нуклеотидную последовательность всех маркерных областей. По тексту статьи указаны все нуклеотидные последовательности праймеров, зондов и положительного контроля, что предоставляет возможность самостоятельного их приобретения в компетентных организациях.

Цель. Оценка  эпизоотологической  и  эпидемиологической  активности  природных  очагов  туляремии  в Республике Татарстан для дальнейшего прогнозирования ситуации, выработки тактики проведения профилактических  и  противоэпидемических  мероприятий. Материалы  и  методы. В работе  использованы  статистические данные, отчеты ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Республике Татарстан» и литературные источники. Результаты и обсуждение. С 1995 г. в Республике Татарстан не регистрируется заболеваемость туляремией среди людей. На территории республики расположены природные очаги в 19 энзоотичных по туляремии административных районах. Эпизоотологический мониторинг природных очагов позволяет сделать вывод, что за последние четыре года произошла их активизация. В связи с этим остается актуальным проведение комплекса противоэпидемических мероприятий, регламентируемых действующими нормативно-методическими документами, своевременная и качественная диагностика туляремии, в том числе среди пациентов, имеющих сходную с данным заболеванием симптоматику.