Detection of Antibodies to Protective Antigen of Bacillus anthracis Using Indirect Hemagglutination Test and Enzime-Linked Immunosorbent Assay
https://doi.org/10.21055/0370-1069-2010-3(105)-42-45
Abstract
Protective antigen, isolated by gel chromatography with the help of sephacril S-300 from the cultural filtrate of B. anthracis strain STI, was used to detect antibodies. Sensitivity of IHA and ELISA with hyperimmune serum to PA corresponded to the titers 1:128000 - 1:256000. Specific activity of IHA with sera of 22 guinea-pigs survived after challenging with B. anthracis 81/1, was in titers 1:40 - 1:81920, that of the ELISA - 1:160 - 1:81920. In the sera of anthrax patients antibodies were detected in IHA in titers of 1:20 - 1:20480, in ELISA - 1:800 - 1:12800. The titers of antibodies in paired sera were demonstrated to increase depending on the period of the disease. Specificity of IHA was confirmed by IHIA with PA. Both methods are equally applicable for anthrax diagnosis, however IHA possesses some benefits, i.e. simplicity, rapid performance and registration of the results.
About the Authors
A. M. Barkov
Volgograd Research Anti-Plague Institute
Russian Federation
Russian Federation
I. A. Barkova
Volgograd Research Anti-Plague Institute
Russian Federation
Russian Federation
V. V. Alekseev
Volgograd Research Anti-Plague Institute
Russian Federation
Russian Federation
A. V. Lipnitskiy
Volgograd Research Anti-Plague Institute
Russian Federation
Russian Federation
M. Ya. Kulakov
Volgograd Research Anti-Plague Institute
Russian Federation
Russian Federation
References
1. Абалакин В.А., Сергеева Л.В., Черкасский Б.Л. Выявление специфических антигенов при экспериментальной сибирской язве. Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1989; 12:63-7.
2. Баркова И.А., Липницкий А.В., Барков А.М., Евтеева Е.В. Использование иммуноглобулинов к отдельным внеклеточным антигенам Bacillus anthracis СТИ для идентификации сибиреязвенного микроба. Биотехнология. 2005; 2: 91-5.
3. Баркова И.А., Алексеев В.В., Липницкий А.В., Барков А.М., Буханцова Л.В. Продукция белков S-слоя разными штаммами Bacillus anthracis. Пробл. особо опасных инф. 2008;. 4(98):29-32.
4. Баркова И.А., Липницкий А.В., Барков А.М. Способ получения иммунной сыворотки к антигенам вирулентного штамма Bacillus antracis. Патент № 2252031, опубл. 20.05.2005. Бюл. № 14.
5. Бахтеева И.В., Титарева Г.М., Кравченко Т.Б. и др. Сибирская язва: ранние этапы внутриклеточной стадии развития инфекции. Мол. генет., микробиол. и вирусол. 2005; 4:3-8.
6. Дубровина В.И., Голубинский Е.П., Колесникова О.Б. Показатели неспецифической резистентности морских свинок, иммунизированных Bacillus anthracis СТИ-1 и комплексом его антигенов. Бюл. ВСНЦ СО РАМН. 2004; 1(2):73-6.
7. Леви М.И., Езепчук Ю.В., Неменова М.А. Применение протективного антигена для реакции пассивной гемагглютинации при сибирской язве. Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунобиол. 1968; 10:132-4.
8. Ермакова И.А., Липницкий А.В., Барков А.М. Способ выделения высокомолекулярного соматического сибиреязвенного антигена. Патент № 2230570, опубл. 20.06.2004. Бюл. № 17.
9. Меньшов П.И., Шмутер М.Ф. Подбор оптимальных методов формализации эритроцитов для приготовления стойких диагностикумов для чумы и бруцеллеза. Пробл. особо опасных инф. 1969; 6:231-2.
10. Онищенко Г.Г., Кутырев В.В., редакторы. Лабораторная диагностика опасных инфекционных болезней. М.: Медицина; 2009. 472 с.
11. Фримель Г., редактор. Иммунологические методы. М.: Медицина; 1987. 472 с.
12. Buchanan T.M., Feeley J.C., Haues P.S., Brachman P.S. Anthrax in direct hemagglutination test. J. Immunol. 1971; 107:1631-6.
13. Ivins B.E., Ezzell J.W., Jemski J. et al. Immunization Studies with Attenuated Strains of Bacillus anthracis. Infect. Immun. 1986; 52:454-8.
14. Jernigan D.B., Raghunathan P.L., Bell B.P. et al. Investigation of biotrrorism-related anthrax, United States, 2001: epidemiologic findings. J. Emer. Infect. Dis. 2002; 8(10):1019-29.
15. Johnson-Winegar A. Comparison of enzyme-linked immunosorbend and indirect hemagglution assays for determining anthrax antibodies. J. Clinic. Microbiol. 1984; 20(3):357-61.
16. Little S.F, Knudson G.B. Comparative Efficacy of Bacillus anthracis Live Spore Vaccine and Protective Antigen Vaccine against Anthrax in the Guinea Pig. Infect. Immun. 1986; 52:509-12.
Review
For citations:
Barkov A.M., Barkova I.A., Alekseev V.V., Lipnitskiy A.V., Kulakov M.Ya. Detection of Antibodies to Protective Antigen of Bacillus anthracis Using Indirect Hemagglutination Test and Enzime-Linked Immunosorbent Assay. Problems of Particularly Dangerous Infections. 2010;(3(105)):42-45. (In Russ.) https://doi.org/10.21055/0370-1069-2010-3(105)-42-45
Views:
1753
Email this article 