В обзоре проведен анализ литературных данных по результатам исследований механизмов патогенеза ZIKV с использованием биомоделей (чувствительных культур клеток и животных). на культурах клеток человеческого и животного происхождения показано, что этот вирус эффективно инфицирует первичные стромальные клетки эндометрия, эмбриональные стволовые клетки, кортикальные и моторные нейроны, астроциты, периферические нейроны и клетки нервного гребня зародыша. культуры клеток простаты, семенников и почек показали высокий уровень нагрузки ZIKV без цитопатических нарушений, что предполагает их участие в персистенции патогена. продуктивная инфекция ZIKV на культурах клеток, полученных от нечеловекообразного примата, свиньи, кролика, хомяка и курицы предполагает, что эти виды животных могут быть важными резервуарами и/или потенциальными лабораторными моделями. у обезьян вида Macaca mulatta (макака-резус) течение болезни, вызванной ZIKV, сходно с таковым у человека, поэтому эти животные представляют собой подходящую модель для изучения патогенеза при врожденной инфекции, а также для доклинической оценки вакцин и антивирусных препаратов во время беременности. в качестве суррогатных моделей для исследования патогенеза ZIKV можно использовать мышей, обычных домашних свиней и гуманизированные куриные эмбрионы. аттенуированный ZIKV, обладающий нейротропностью, недавно стал объектом исследования в новом направлении медицинской вирусологии – в онколитической виротерапии глиобластомы.

В 2017 г. Международным комитетом по таксономии вирусов (International Committee on Taxonomy of Viruses, ICTY) установлен и утвержден новый отряд Bunyavirales, который объединил эволюционно связанные вирусы, чей геном представлен сегментированной линейной одноцепочечной рнк отрицательной или амбисенс (ambisense) полярности. В настоящее время отряд Bunyavirales включает 10 семейств вирусов, которые инфицируют позвоночных животных, беспозвоночных (членистоногие) и растения. На территории Северной Евразии изолировано не менее 41 зоонозного буньявируса, многие из которых имеют значение в патологии человека. В настоящем обзоре представлен состав семейств, входящих в порядок Bunyavirales, и представлен список зоонозных буньявирусов, циркулирующих на территории северной Евразии с указанием их современного таксономического положения. Большинство из них являются арбовирусами, экологически связанными с разными видами комаров или аргасовых и иксодовых клещей.

Среди вирусов, переносимых рукокрылыми, большую опасность для человека представляют филовирусы, лиссавирусы, хенипавирусы и коронавирусы. представленный обзор посвящен анализу результатов изучения роли африканских рукокрылых в поддержании циркуляции этих вирусов. приведены хронология исследований по поиску природного резервуара филовирусов и доказательства участия рукокрылых в их циркуляции. представлена обобщенная информация по вовлечению рукокрылых в циркуляцию лиссавирусов на Африканском континенте. Приводятся данные по участию африканских видов рукокрылых в циркуляции хенипавирусов - опасных для человека вирусов семейства Paramyxoviridae, ассоциированных с рукокрылыми Юго-Восточной Азии. Рассматривается возможность циркуляции SARS- и MERS-подобных коронавирусов в популяциях некоторых видов африканских рукокрылых. Оценивается также участие рукокрылых Гвинейской Республики в поддержании циркуляции вышеперечисленных вирусов в потенциальных природных очагах на территории этой страны и возможность возникновения вспышек опасных заболеваний человека. обосновывается необходимость изучения роли рукокрылых в качестве носителей этих вирусов с целью прояснения текущей эпидемиологической и эпизоотологической ситуации по этим вирусным патогенам в Гвинейской Республике.

Цель работы - провести анализ и обобщить опыт организации эпидемиологического надзора за внутренними рисками, связанными с активизацией природно-очаговых болезней в Республике Татарстан, и комплекса профилактических мероприятий в зонах эпидемиологического риска при подготовке и проведении Чемпионата мира по футболу FIFA-2018. Материалы и методы. Для анализа использованы эпизоотологические и эпидемиологические данные, представленные ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Республике Татарстан (Татарстан)» за 2015-2018 гг. Результаты и выводы. Природные условия Республики Татарстан благоприятны для циркуляции возбудителей некоторых природно-очаговых заболеваний, носителями которых являются млекопитающие (в первую очередь мелкие грызуны) и птицы, переносчиками - кровососущие членистоногие (иксодовые клещи, комары). Результаты мониторинга циркуляции возбудителей природно-очаговых инфекционных болезней позволили сделать вывод, что в период проведения Чемпионата мира 2018 г. сохранится высокая потенциальная эпидемическая опасность возникновения случаев заболеваний среди участников и гостей международного спортивного мероприятия. учитывая существующие и прогнозируемые внутренние риски, определены приоритетные направления при организации комплекса профилактических мероприятий, направленные на минимизацию эпидемиологических рисков в отношении природно-очаговых инфекций в период подготовки и проведения Чемпионата мира по футболу FIFA-2018. Выбранная стратегия и тактика профилактических мероприятий позволила не допустить случаев заражения природно-очаговыми инфекционными болезнями и обеспечить стабильную эпидемиологическую ситуацию в период проведения Чемпионата мира по футболу 2018 г.

Существующие международные и основная часть национальных документов, регламентирующих проведение экспериментов на лабораторных животных, изложены в биоэтической концепции 3«R». на сегодняшний день этот принцип остается актуальным и является общепринятым мировым стандартом. Цель исследования - проведение анализа соблюдения сотрудниками института в работе этических принципов и правил биологической безопасности при обращении с лабораторными животными, зараженными патогенными биологическими агентами (ПБА) I-II групп при проведении диагностических, экспериментальных и производственных работ. Результаты и обсуждение. Проведенный анализ реализации этических принципов в лаборатории при обращении с биомоделями, зараженными патогенными биологическими агентами I-II группы при проведении экспериментальных и производственных работ показывает, что программа соответствует требованиям биологической безопасности и нормам этического кодекса, а также международным стандартам гуманного отношения к животным в биомедицинских исследованиях. Выводы - работа в институте с лабораторными животными, зараженными ПБА I-II групп, соответствует требованиям биологической безопасности и нормам этического кодекса. Эксперименты на лабораторных животных направлены на получение новых научных знаний, сохранение и улучшение здоровья человека, а также на проведение мониторинга территории природных очагов особо опасных инфекций, с соблюдением биоэтической концепции 3«R».

Цель. Разработка метода выявления и количественного анализа (ОТ-ПЦР в реальном времени) для выявления генетических маркеров вируса Ласса - LASV-Fl. Материалы и методы. Для работы взяты все доступные в базе данных GenBank (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank/) последовательности вируса Ласса, которые были выровнены для идентификации консервативных сайтов с использованием программного пакета BioEdit 7.2.5 (IbisBiosciences, США). для апробации разработанного ПЦР-набора была использована контрольная панель РНК вируса Ласса и псевдовирусных частиц, 27 вирусных штаммов, относящихся к различным семействам, а также 37 образцов сывороток крови от пациентов с лихорадочными заболеваниями, отобранных в лечебных учреждениях Республики Гвинея в 2016-2018 гг., и 55 проб суспензий органов от многососковых мышей. Результаты и обсуждение. Аналитическая чувствительность метода варьировала от 10³ до 10⁵ копий/мл и имела 96,4 % диагностическую чувствительность, тогда как аналитическая и диагностическая специфичность составляли 100 %. показано, что разработанная методика может быть успешно применена на практике для обнаружения вируса Ласса в Гвинейской Республике, с использованием различных типов материала от мелких млекопитающих, включая цельную кровь и суспензии органов M. natalensis,а также образцы сывороток крови людей, собранных через 3-7 дней после начала заболевания. Сделано также предположение, что данный метод может быть использован для штаммов вируса Ласса, распространенных не только в Гвинее, но и на других эндемичных территориях, но данный факт необходимо подтвердить в дальнейших исследованиях.

Цель. Предложить на основе вероятностного подхода научно обоснованный критерий исключения части очаговой территории из обследования и, соответственно, из состава очага. Материалы и методы. Данные по эпизоотологическому обследованию Центрально-Кавказского природного высокогорного очага чумы с 1987 по 2013 год (28 лет). для каждого сектора первичного района в очаге посчитана кратность обследования и кратность регистрации эпизоотий. для статистической обработки использовались непараметрические методы: коэффициент ранговой корреляции Спирмена, квантильный анализ и некоторые понятия теории вероятности. Результаты и обсуждение. На примере Центрально-Кавказского природного высокогорного очага чумы представлен метод расчета вероятности появлений эпизоотий в секторах очага. предложен математически обоснованный критерий исключения сектора из очаговой территории. представлен алгоритм исключения секторов первичных районов из плана обследования при разных уровнях значимости. ранжирование очага по вероятности выявления эпизоотии в секторе и вероятности обследования сектора может быть использовано, наряду с индексом эпизоотичности, при планировании эпизоотологического обследования очаговой территории.

Цель исследования - проанализировать основные показатели качества выпускаемой вакцины чумной живой и стабильность препарата в процессе хранения. Материалы и методы. В работе проведен анализ паспортных данных серий вакцины чумной живой на основе штамма Yersinia pestis EV линии НИИЭГ, выпущенных с 2012 по 2017 год в соответствии с требованиями нормативной документации. исследуемые параметры: жизнеспособность, термостабильность, отсутствие посторонних микроорганизмов и грибов, потеря в массе при высушивании, иммуногенность. Результаты и выводы. Проведен сравнительный анализ жизнеспособности вакцины (количества живых микробных клеток) в сериях, произведенных за последние 6 лет. все исследованные серии вакцины соответствуют показателям, отраженным в спецификации к фармакопейной статье предприятия и промышленном регламенте, что свидетельствует о стабильности производства и основных показателей качества вакцины чумной живой в течение всего срока годности. отмечено, что выпуск вакцины, соответствующей требованиям нормативной документации, зависит от строгого соблюдения персоналом производственных правил, использования высококачественного сырья и материалов, проведения валидации оборудования и технологических процессов производства.

Цель - риск-ориентированная оценка современной эпидемиологической обстановки по Крымской геморрагической лихорадке (КГЛ) в Астраханской области. Материалы и методы. в работе использованы материалы ФКУЗ «Астраханская противочумная станция», Управления Роспотребнадзора по Астраханской области, ГБУЗ АО «Областной инфекционной клинической больницы им. А.М. Ничоги». основным методом исследования стал эпидемиологический анализ заболеваемости населения Астраханской области этой инфекцией за 2000-2016 гг. Эпидемиологическому анализу подвергнуты 125 историй болезни. Результаты и выводы. В результате ретроспективного эпидемиологического анализа определены и охарактеризованы основные категории риска заболевания Крымской геморрагической лихорадкой в Астраханской области в 2000-2016 гг. установлено, что чаще болеют мужчины (80 из 125 - 64,0 %) старших возрастных групп (31-50 лет - 32,8 % и 51-70 лет - 14,4 %). Среди женщин заболевания КГЛ распространены в этом же возрасте. Территорией высокого риска являются 3 района области, среднего - 3 района, низкого - 4 и очень низкого - 2. Анализ контингентов риска показал, что в последние десятилетия чаще болеют КГЛ неработающие лица - 43,2 %, пенсионеры - 17,6 %, служащие - 10,4 %, сельскохозяйственные рабочие и фермеры - 8,8 %. в подавляющем большинстве случаев (83 - 66,4 %) заражение людей КГЛ произошло при укусе, снятии с себя и раздавливании клеща незащищенными руками. в 26 случаях (20,8%) факторы риска не были установлены. КГЛ в Астраханской области имеет ярко выраженную весенне-летнюю сезонность с началом во второй половине апреля, пиком в июне и спадом в августе. среди клинических форм болезни наиболее часто встречалась среднетяжелая форма (83 чел. - 66,4 %), летальных исходов не зарегистрировано.

Цель. Определение микробиологическим методом эффективности заключительной дезинфекционной обработки вирусологических боксированных помещений «заразной» зоны максимально изолированной лаборатории фумигацией парами формальдегида, с установлением оптимального количества формалина. экспериментальная оценка пригодности генератора аэрозолей «Ультраспрейер Р-60» для заключительной дезинфекции помещений «заразной» зоны «сухим» паром перекиси водорода. Материалы и методы. Методом батистовых тест-объектов контаминированных спорообразующей тест-культурой Bacillus thuringiensis проведена оценка эффективности заключительной дезинфекции поверхностей помещений «заразной» зоны максимально изолированной лаборатории. Результаты и обсуждение. Экспериментальным путем, определено количество формалина, достаточное для полной инактивации возможных инфекционных загрязнений, потенциально находящихся на поверхностях оборудования и помещений, расположенных в «заразной» зоне максимально изолированной лаборатории, при проведении фумигации парами формальдегида. установленное опытным путем количество формалина оказалось в 1,4 раза больше, рекомендованного нормативной документацией для невентилируемых помещений, но в 2-2,5 раза меньше, применяемого ранее для заключительной дезинфекции максимально изолированной лаборатории. Дезинфекционная обработка помещений и оборудования, расположенных в «заразной» зоне лаборатории, «сухим» паром 6 % пероксида водорода, являющегося действующим началом, распыляемого генератором аэрозолей «Ультраспрейер Р-60» препарата «Дезаргент», оказалась эффективнее орошения факелом аэрозоля 6 % пероксида водорода, получаемого с помощью пневматической аэрозольной насадки. При этом, удалось добиться практически полной инактивации тест-микроорганизма, находящегося на тест-объектах в концентрации 1·10⁶ клеток/см², повысив концентрацию распыляемого прибором пероксида водорода до 10 %. однако даже в этом случае в скрытых полостях оборудования и оргтехники остались жизнеспособные тест-микроорганизмы, что делает актуальным дальнейшие исследования с целью установления оптимальной концентрации пероксида водорода при проведении заключительной дезинфекции генератором аэрозолей типа «ультраспрейер р-60» или подобным оборудованием других производителей.

Поддержание микроорганизмов в жизнеспособном состоянии при сохранении исходных практически важных свойств является важнейшей проблемой микробиологии. Целью настоящих исследований стало изучение сохранности основных биологических свойств лиофилизированных культур 18 штаммов разных подвидов возбудителя туляремии из коллекции микробных культур филиала ФГБУ «48 ЦНИИ» Минобороны России (г. Киров) с различными условиями предварительной подготовки (с анимализацией через организм морских свинок и без нее). Сроки хранения микробов при отрицательных температурах составили от 5 до 50 лет. Материалы и методы. В соответствии с общепринятыми методиками определялась выживаемость микробов в процессе высушивания и последующего хранения, оценивались и сравнивались с паспортными данными морфологические, культуральные, биохимические, антигенные, патогенные свойства культур штаммов F. tularensis с различными сроками хранения и условиями подготовки к лиофилизации. Результаты и обсуждение. Проведенные исследования показали, что, при условии предварительной стабилизации свойств штаммов возбудителя туляремии методом анимализации, хранение в лиофилизированном состоянии при отрицательных температурах под вакуумом продолжительностью до 50 лет практически в полной мере предохраняет их от изменения фенотипических свойств. В то же время после лиофилизации многократно субкультивированных на плотных питательных средах культур без признаков исходного нарушения свойств обнаруживались явления диссоциации, снижение титров культур в реакции агглютинации от 2 до 4 раз, повышение на порядок величин показателя ЛД₅₀.

Цель. Анализ эпидемиологической ситуации по Крымской геморрагической лихорадке (КГЛ) в Российской Федерации на современном этапе, определение путей совершенствования эпиднадзора и профилактики инфек­ции. Материалы и методы. использованы донесения и результаты ежегодных эпизоотологических обследований территории природного очага КГЛ, представленные управлениями роспотребнадзора, ФБУЗ «центр гигиены и эпидемиологии» в субъектах Южного и Северо-Кавказского федеральных округов, референс-центром по мониторингу за возбудителем КГЛ, научно-исследовательскими противочумными институтами и противочумными станциями роспотребнадзора. Результаты и обсуждение. эпидемиологическая ситуация по КГЛ остается нестабильной, ежегодно регистрируются случаи заболевания, в том числе с летальными исходами, сохраняется активность природного очага КГЛ в России, наблюдается расширение его границ в северном направлении. основные причины неблагополучной эпидемиологической обстановки по КГЛ в российской Федерации на современном этапе связаны с увеличением периода активности и численности клещей Hyalomma marginatumв связи с благоприятными погодно-климатическими условиями. разработанный Роспотребнадзором перечень первоочередных мер по стабилизации эпидемиологической ситуации по КГЛ позволил снизить в 2017 г. число больных по сравнению с 2016 г. на 51,9 % практически на всей территории юга России. в 2018 г. заболеваемость КГЛ в 1,5 раза ниже среднемноголетних значений (72 больных). количество случаев КГЛ по сравнению с 2017 г. снизилось в Ставропольском крае в 1,3 раза и в Ростовской области в 1,4 раза. отмечено увеличение числа больных в Астраханской (в 3 раза) и Волгоградской (в 2,3 раза) областях. в 2011 г. (Ростовская область) и в 2016 г. (Ставропольский край) зарегистрированы нозокомиальные случаи инфицирования возбудителем КГЛ, связанные с несоблюдением противоэпидемического режима в стационарах при оказании лечебной помощи больным, что свидетельствует о необходимости повышения готовности медицинского персонала к поступлению больных с особо опасной инфекцией.

Цель работы - проведение молекулярно-генетического типирования штаммов и изолятов нуклеиновых кислот возбудителей природно-очаговых инфекций бактериальной и вирусной этиологии, накопление данных о генетических особенностях региональных штаммов, циркулирующих на территории ставропольского края. Материалы и методы. для изучения генетического спектра возбудителей природно-очаговых инфекций проводили анализ штаммов и изолятов нуклеиновых кислот возбудителей, выявленных в образцах полевого и клинического материала. индикацию возбудителей природно-очаговых инфекций в образцах осуществляли методом ПЦР. Для генетического типирования штаммов и изолятов ДНК/РНК возбудителей природно-очаговых инфекций использовали методы MLVA-типирования и секвенирования участков генома с последующим филогенетическим анализом. Анализ территориального распространения генетических вариантов возбудителей природно-очаговых инфекций и построение карт выполняли в программном обеспечении ArcGIS 10.1. Результаты и выводы. Выполнены: MLVA-25 типирование 20 штаммов Francisella tularensis; MLVA-10 типирование 4 изолятов Coxiella burnetii; видовая идентификация 20 изолятов ДНК Rickettsia sp.; субвидовое типирование 40 РНК-изолятов вируса ККГЛ и 8 РНК-изолятов хантавирусов, циркулировавших на территории Ставропольского края в 2016-2017 гг. Изученные штаммы F. tularensis принадлежат к восьми MLVA генотипам, в основном приуроченным к определенным тер­риториям. Изоляты C. burnetii обладают идентичным MLVA-типом. Выявлены риккетсии, относящиеся к 5 ви­дам: R. massiliae R. raoultii, R. sibirica, R. aeschlimannii, R. slovaca, РНК-изоляты хантавируса генотипа «Тула», варианты вируса ККГЛ генотипов «Европа-1» и «Европа-3». Полученные данные могут быть использованы при эпидемиологическом анализе возможных случаев инфекционных болезней для определения источника и путей распространения инфекции.

Цель работы: исследование хантавирусов в новом природном резервуаре - насекомоядных, их многообразия и распространения на территории Западной и Восточной Сибири. Материалы и методы. Бурозубки рода Sorex (71 особь) отловлены на территории республики Алтай, Алтайского, Красноярского краев и Омской области. Все образцы выделенных РНК проанализированы методом обратной транскрипции - полимеразной цепной реакции с последующим секвенированием. результаты и выводы. Генотипированы 12 РНК изолятов вируса, выделенных от двух видов бурозубок - обыкновенной (S. araneus)и бурой (S. roboratus).Анализ последовательностей L- и S-сегментов вирусного генома выявил циркуляцию двух видов хантавирусов. В Алтайском крае у бурой бурозубки (S. roboratus)обнаружен вирус Кенкеме (KKMV), ранее найденный в географически удаленных точках Республики Саха и Китая. Новые очаги циркуляции вируса Сивис (SWSV) среди обыкновенных бурозубок (S. araneus) установлены на территории омской области, Алтайского и Красноярского краев. суммируя новые и ранее полученные данные, можно заключить, что хантавирусы в популяциях насекомоядных широко распростра­нены на территории Российской Федерации. Установленная на территории Сибири широкая циркуляция вирусов SWSV и KKMV дает веские основания для исследования роли выявленных вирусов в патологии человека.